抗-lea型红细胞悬液的家系调查

抗-lea型红细胞悬液的家系调查

1输血后流式血清学检查患者，18岁，女性。因双下肢热水烫伤伴肿痛22d入院。入院后给予创面处理,静滴抗生素抗感染,先后用过多种抗菌素,其中对头孢三嗪过敏,均及时停用。患者在5月22日行手术封闭创面时,申请输A型红细胞悬液2U,在输入第2袋时(输入5～10ml),患者突然出现头晕,畏寒、四肢发抖等症状,及时停止输血,当时给予地塞米松10mg,非那根25mg,曲马多100mg,症状无明显好转。当日患者出现酱油色尿,急查尿常规示潜血试验强阳性。考虑溶血性输血反应而送检血样至本实验室进行血型血清学检查。经检查发现患者血清中含有IgG类型的抗-Lea,并对患者进行家系调查,现报告如下。2材料和方法2.1d细胞de抗-A、抗-B、抗-D、抗-Lea、抗-Leb、抗IgG、抗IgG+C3d均为美国Dominion公司试剂,谱细胞(深圳血液中心),抗-H(广州血液中心),A、B、O细胞(海南省血液中心血型室);KUBOTA2200型台式离心机(日本);37℃及56℃水浴箱。2.2阴阳对照实验ABO血型检查使用正反定型法,Lewis血型检查应用盐水反应性试剂抗-Lea、抗-Leb及谱细胞Le(a+b-)、Le(a-b+)分别做阴阳性对照,对细胞洗涤后定型,该步骤及以下实验所有血清均为获得的当天进行试验或添加新鲜血清后进行试验,以保证血清、放散液有补体存在。2.3不规则抗渗试验患者血清与谱细胞及自身细胞分别在盐水、抗-IgG和抗-IgG+C3d介质中反应。2.4凝集效价与抗-lea、抗-leb的浓度对不同贮藏期离子束凝集效价的影响将唾液煮沸10min,冷却后进行离心,除去杂物后用于检查。预先将抗-A、抗-B、抗-H、抗-Lea、抗-Leb用生理盐水配制成凝集效价为32左右,与处理后的唾液1∶1混合(各2滴),在室温下放置1h(不时地晃动)后分别与含相应抗原的A、B、O、和Le(a+b-)、Le(a-b+)红细胞悬液混合,以1000g离心15s后观察结果。3结果3.1红细胞蛋白成分献血者1(第1袋红细胞悬液)血型:A型、RhD阳性、Le(a-b+);献血者2(第2袋红细胞悬液)血型:A型、RhD阳性、Le(a+b-);患者红细胞血型:A型、RhD阳性、Le(a-b-);患者血清与献血者1红细胞在盐水、抗-IgG、抗-IgG+C3d介质中均无凝集反应,而与献血者2红细胞在盐水介质中无凝集反应,在抗-IgG、抗-IgG+C3d介质中出现凝集;患者红细胞直接抗人球蛋白试验:IgG:阴性;IgG+抗C3d:阴性;患者唾液分泌物质:分泌A、H物质,不分泌Lea物质和Leb物质;不规则抗体检查(表1)该患者血清与Le(a+b-)细胞在盐水介质中室温和37℃均无凝集反应,在抗-IgG、抗-IgG+抗-C3d介质中均发生凝集反应;该患者血清与Le(a-b+)和Le(a-b-)细胞在盐水、抗-IgG、抗-IgG+抗-C3d介质中均未发生凝集反应,从而确认该血清中含IgG类型的抗-Lea,其效价为2。3.2凝集、溶血现象患者血清与Lea+细胞在盐水介质中无凝集、溶血现象;在抗-IgG、抗-IgG+抗-C3d介质中发生凝集。提示其抗-Lea为IgG类型的抗体。3.3患者的家庭血样其家系成员基因型为根据家系血型血清学结果按有关Lewis和ABO系统的Grubb-Ceppellini学说推测而得,见表2。4严重溶血性输血反应Lewis血型系抗体在国外较为常见,这些抗体多数为低温抗体,抗体的性质主要或全部为IgM类型,一般没有临床意义,但也有暖抗体致溶血性输血反应的个例报道,抗-Lea引起溶血性输血反应在国内有过数例报道,这些报道的病例均有输血或妊娠史,有明显的致敏因素,且反应一般较轻,而本例患者无输血和妊娠史,血清中却有IgG抗-Lea并引起严重溶血性输血反应,国内未见报道。通过对患者的家系血型调查发现,其母亲为HAB非分泌型,推断其母亲的基因型为sese纯合子,患者及其同胞兄弟姐妹至少有一个se基因。患者与姐姐均为HAB分泌型,必需存在Se基因,红细胞表型为Le(a-b-),基因型应为Seselele,并说明父亲和母亲均存在le,母亲基因型应为seseLele;二哥和三哥均为Le(a-b+)分泌H、Lea和Leb物质,必需存在Se基因,加上来源于母亲的se基因,所以二哥和三哥基因型应为SeseLele或SeseLeLe;父亲Le(a-b+),分泌H、Lea和Leb物质,推断其基因型应为SeSeLele或SeseLele。家庭6位成员中除患者本身检测到抗-Lea外,其它成员均未检测到不规则抗体,且患者血清中抗-Lea属于IgG类型,应为免疫性抗体,但患者为18岁中学生,否认输血和妊娠史,