第4章药物的鉴别

第4章药物的鉴别性状:1、外观：药品的聚集状态、色泽以及臭味等。2、溶解度3、物理常数

物理常数是鉴定药品质量的重要指标。其测定结果不仅对药品具有鉴别意义，也反映了该药品的纯杂程度。药典收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数。常用物理常数的测定1.溶解度中国药典采用的测定方法为：准确称取（或量取）供试品一定量，加入一定量的溶剂，在25℃±2℃每隔5分钟振摇30分钟，30分钟内观察溶解情况。一般看不到溶质颗粒或液滴时，即可认为已完全溶解。溶解度的数值如出现明显异常，表明供试品质量存在问题。常用物理常数的测定（1）称取（或量取）供试品的量，准确度为规定值的±2%，固体供试品应先研细；（2）易于溶解的样品，取样可在1~3g之间；贵重药品及剧毒药品可酌情减量，可用逐渐加入溶剂的方法，溶剂品种也可适当减少，但至少要作水、酸、碱、乙醇等溶剂。（3）一般常用溶剂有水、乙醇、乙醚、氯仿、甘油、无机酸和碱等。溶解度常用物理常数的测定质量标准中选用的部分溶剂及其在溶剂中的溶解性能，可供精制或制备溶液时参考。当遇有在特定溶剂中的溶解性能作质量控制时，应在相应药品的检查项下另作具体规定。溶解度常用物理常数的测定2.熔点中国药典中，熔点系指一种物质按规定的方法测定，由固体熔化成液体的温度，熔融同时分解的温度，或在融化时自初熔至全熔的一段温度。熔融同时分解系指某一药物在一定温度下产生气泡、变色或混浊等现象。

常用物理常数的测定具有熔融同时分解性质的药物必须严格按照药典规定操作，以供试品开始局部液化或开始产生气泡时的温度为初熔温度，供试品固相消失、全部液化时的温度作为全熔温度。若固相消失不明显，则应以供试品的分解物开始膨胀上升时的温度作为全熔温度。由于各物质熔融分解时的情况不一致，一些药品无法分辨初熔温度、全熔温度，此时可记录它们发生突变时的温度，作为熔融分解温度。熔点常用物理常数的测定（1）传温液：一般按药典规定选择传温液（2）毛细管内径：0.9~1.1mm（3）升温速度：1~1.5℃/min（4）温度计：应具有0.5℃温度刻度；需用“熔点测定用对照品”进行校正：即将待校温度计用对照品按药典规定方法测定熔点值，计算测定值与对照品规定值之差即得校正值。以测定值为横坐标，校正值为纵坐标，绘制校正曲线；然后在相同条件下测试供试品的熔点，将测得值代入校正曲线，即可求出校正值进而计算出实际熔点。影响熔点测定结果的主要因素常用物理常数的测定当采用毛细管法测定难以判断熔点时，需辅以差示扫描量热分析法（DSC）的结果。一类新药的熔点则需采用毛细管法和DSC法两种方法同时测定。熔点常用物理常数的测定3.黏度：指液体对流动的阻抗能力。黏度的种类：①动力黏度（Pa·s）；②运动黏度（mm2/s）；③特性黏度（）。常用物理常数的测定黏度计的种类：①平均黏度计；②旋转式黏度计；③乌式黏度计。中国药典对所收载的药品在性状下规定有黏度数值范围。此外，“检查项”下也会出现对黏度数值的限度。黏度常用物理常数的测定4.比旋度:具有光学异构体分子的药物，常常具有相同的物理性质和化学性质，但旋光性能不同，一般分为左旋体、右旋体和消旋体。有些药物的两种不同光学异构体的药理作用相同，如左旋和右旋的可待因具有相同的局部麻醉作用；但很多药物的左旋体和右旋体的生物活性却有较大差异，如奎宁和奎尼丁为光学异构体，奎宁是左旋体，用于治疗疟疾；奎尼丁是右旋体，用于治疗心律不齐、心房纤维性颤动。

常用物理常数的测定

为了保证药品的质量，中国药典规定：具有旋光性药物要作比旋度测定，以鉴别药物或检验纯度。C—浓度，g/mLl—液层厚度，dm比旋度常用物理常数的测定5.折射率某些液体药物，尤其是植物油，对光折射具有特定的折射率。测定折射率可以区别不同油类或检查某些药物的纯杂程度。例如，中国药典中的挥发油、油脂和有机溶剂等性状项下都列有折射率一项。中国药典所收载的维生素E、维生素K1、苯丙醇也规定了折射率指标。常用物理常数的测定6.吸收系数中国药典采用百分吸光系数（E1cm1%），列入某些紫外吸收药物的性状项下，即用于相应原料药质量的考察，也作为制剂含量测定中紫外分光光度法的计算依据。当制剂的含量测定采用“吸收系数法”，而其原料药的含量由于精密度的要求而改用其它法方法时，原料药的性状项下将列出吸收系数。该吸收系数是尽可能采用制剂含量测定中的条件测得的，目的是使原料药的质量标准与其制剂的标准相适应。中国药典对吸收系数的测定作了相应规定。常用物理常数的测定吸收系数A—吸光度E1cm1%—百分吸收系数C—浓度（g/100mL）L—光路长度（cm）百分吸收系数（）：吸收物质浓度为1%(g/mL)，光程长度为1cm时的吸光度值。（二）一般鉴别试验一般鉴别试验（generalidentificationtest）是依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪。对无机药物是根据其组成的阴离子和阳离子的特殊反应；对有机药物则大都采用典型的官能团反应。1、有机氟化物2、有机酸盐3、芳香第一胺4、托烷生物碱5、无机金属6、无机酸根1、有机氟化物取供试品约7mg，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用水20mL与0.01mol/L氢氧化钠溶液6.5mL为吸收液，待燃烧完毕后，充分振摇；取吸收液2mL，加茜素氟蓝试液0.5mL，再加12%醋酸钠的稀醋酸溶液0.2mL，用水稀释至4mL，加硝酸亚铈试液0.5mL，即显蓝紫色，同时做空白对照试验。2、有机酸盐枸橼酸盐(1)取供试品溶液2mL（约相当于枸橼酸10mg）,加稀硫酸数滴,加热至沸，加高锰酸钾试液数滴，振摇，紫色即消失；溶液分成两份，一份中加硫酸汞试液1滴,另一份中逐滴加入溴试液，均生成白色沉淀。(2)取供试品约5mg，加吡啶－醋酐(3∶1)约5mL，振摇，即生成黄色到红色或紫红色的溶液。

2、有机酸盐乳酸盐取供试品溶液5mL(约相当于乳酸5mg),置试管中，加溴试液1mL与稀硫酸0.5mL，置水浴上加热，并用玻棒小心搅拌至退色，加硫酸铵4g，混匀，沿管壁逐滴加入10％亚硝基铁氰化钠的稀硫酸溶液0.2mL和浓氨试液1mL，使成两液层；在放置30分钟内，两液层的接界面处出现一暗绿色的环。酒石酸盐(1)取供试品的中性溶液，置洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银即游离并附在管的内壁成银镜。酒石酸盐(2)取供试品溶液，加醋酸成酸性后，加硫酸亚铁试液1滴和过氧化氢试液1滴，俟溶液退色后，用氢氧化钠试液碱化，溶液即显紫色。3、芳香第一胺取供试品约50mg，加稀盐酸1mL，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β－萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。4、托烷生物碱---Vitali反应本类药物为酯类生物碱，水解后生成的莨菪酸，经发烟硝酸加热处理，转变为三硝基衍生物，再与氢氧化钾醇溶液和固体氢氧化钾作用，则转成有色的醌型产物，开始呈深紫色。5、无机金属钠盐(1)取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。(2)取供试品的中性溶液，加醋酸氧铀锌试液，即生成黄色沉淀。

钡盐(1)取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显黄绿色；通过绿色玻璃透视，火焰显蓝色。(2)取供试品溶液，加稀硫酸，即生成白色沉淀；分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。

钙盐(1)取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显砖红色。(2)取供试品溶液(1→20)，加甲基红指示液2滴，用氨试液中和，再滴加盐酸至恰呈酸性，加草酸铵试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀不溶于醋酸，但可溶于盐酸。镁盐(1)取供试品溶液，加氨试液，即生成白色沉淀；滴加氯化铵试液，沉淀溶解；再加磷酸氢二钠试液1滴，振摇，即生成白色沉淀。沉淀在氨试液中不溶。(2)取供试品溶液，加氢氧化钠试液，即生成白色沉淀。分离，沉淀分成两份，一份中加过量的氢氧化钠试液，沉淀不溶；另一份中加碘试液，沉淀转成红棕色。亚铁盐(1)取供试品溶液，加铁氰化钾试液，即生成深蓝色沉淀；分离，沉淀在稀盐酸中不溶，但加氢氧化钠试液，即分解成棕色沉淀。(2)取供试品溶液，加1％邻二氮菲的乙醇溶液数滴，即显深红色。

铁盐(1)取供试品溶液，加亚铁氰化钾试液，即生成深蓝色沉淀；分离，沉淀在稀盐酸中不溶，但加氢氧化钠试液，即分解成棕色沉淀。(2)取供试品溶液，加硫氰酸铵试液，即显血红色。

6、无机酸根硼酸盐(1)取供试品溶液，加盐酸成酸性后，能使姜黄试纸变成棕红色；放置干燥，颜色即变深，用氨试液湿润，即变为绿黑色。(2)取供试品，加硫酸，混合后，加甲醇，点火燃烧，即发生边缘带绿色的火焰。

碳酸盐与碳酸氢盐(1)取供试品溶液，加稀酸，即泡沸，发生二氧化碳气，导入氢氧化钙试液中，即生成白色沉淀。(2)取供试品溶液，加硫酸镁试液，如为碳酸盐溶液，即生成白色沉淀；如为碳酸氢盐溶液，须煮沸，始生成白色沉淀。(3)取供试品溶液，加酚酞指示液，如为碳酸盐溶液，即显深红色；如为碳酸氢盐溶液，不变色或仅显微红色。

磷酸盐(1)取供试品的中性溶液，加硝酸银试液，即生成浅黄色沉淀；分离，沉淀在氨试液或稀硝酸中均易溶解。(2)取供试品溶液，加氯化铵镁试液，即生成白色结晶性沉淀。(3)取供试品溶液，加钼酸铵试液与硝酸后，加热即生成黄色沉淀；分离，沉淀能在氨试液中溶解。

碘化物(1)取供试品溶液，加硝酸银试液，即生成黄色凝乳状沉淀；分离，沉淀在硝酸或氨试液中均不溶解。(2)取供试品溶液，加少量的氯试液，碘即游离；如加氯仿振摇，氯仿层显紫色；如加淀粉指示液，溶液显蓝色。铵盐(1)取供试品，加过量的氢氧化钠试液后，加热，即分解，发生氨臭；遇湿润的红色石蕊试纸，能使之变蓝色，并能使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色。(2)取供试品溶液，加碱性碘化汞钾试液1滴，即生成红棕色沉淀。

银盐(1)取供试品溶液，加稀盐酸，即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀能在氨试液中溶解，加硝酸，沉淀复生成。(2)取供试品的中性溶液，加铬酸钾试液，即生成砖红色沉淀；分离，沉淀能在硝酸中溶解其他一般鉴别试验苯甲酸盐(1)取供试品的中性溶液，加三氯化铁试液，即生成赭色沉淀；加稀盐酸，变为白色沉淀。

(2)取供试品，置干燥试管中，加硫酸后，加热，不炭化，但析出苯甲酸，在试管内壁凝结成白色升华物。（三）专属鉴别试验

药物的专属鉴别试验(specificidentificationtest)是证实某一种药物的依据，它是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。（一）化学鉴别方法1、呈色反应鉴别法2、沉淀生成反应鉴别法3、荧光反应鉴别法4、气体生成反应鉴别法

5、测定生成物的熔点三、专属鉴别方法

1、呈色反应鉴别法苯巴比妥(1)取本品约10mg，加硫酸2滴与亚硝酸钠约5mg，混合，即显橙黄色，随即转橙红色。(2)取本品约50mg，置试管中，加甲醛试液1mL，加热煮沸，冷却，沿管壁缓缓加硫酸0.5mL，使成两液层，置水浴中加热。接界面显玫瑰红色。盐酸土霉素取本品约0.5mg，加硫酸2mL，即显深朱红色；再加水1mL，溶液变为黄色。维生素C取本品约0.2g，加水10mL溶解，取溶液5mL，加二氯靛酚钠试液1-2滴，试液的颜色消失。2、沉淀生成反应鉴别法异烟肼的鉴别取本品约10mg，置于试管中，加水2mL溶解后，加氨制硝酸银1mL，即发生气泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜。磺胺嘧啶的鉴别

取本品0.1g，加水与0.4%氢氧化钠溶液各3mL，振荡，使溶解，滤过，取滤液加硫酸铜试液1滴，即生成黄绿色沉淀，放置后变为紫色。3、荧光反应鉴别法维生素B1的鉴别取本品的约5mg，加4%氢氧化钠试液2.5mL，加铁氰化钾试液0.5mL与正丁醇5mL,强力振摇2分钟，放置使分层，上层醇液显强烈的的蓝色荧光；加酸使成酸性，荧光即消失。再加碱使成碱性，荧光又显出。4、气体生成反应鉴别法①大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某些酰胺类药物，可经强碱处理后加热产生氨气巴比妥药物②化学结构含硫药物，可经强酸处理后加热产生硫化氢气体硫鸟嘌呤4、气体生成反应鉴别法③含碘有机药物经直火加热可生成紫色碘蒸气。④含醋酸酯和乙酰胺类药物经硫酸水解后，加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。对乙酰氨基酚碘苷5、测定生成物的熔点异烟肼的鉴别取本品约0.1g，加水5mL溶解后，加10％香草醛的乙醇溶液1mL，摇匀，微热，放冷，即析出黄色结晶，滤过，用稀乙醇重结晶，在105℃干燥后，测定熔点，其熔点为228～231℃，熔融时同时分解。（二）光谱鉴别法1、紫外光谱鉴别法对比吸收曲线的一致性

对比最大吸收波长和相应吸光度或对比最大吸收波长和相应吸光系数的一致性对比最大、最小吸收波长和相应吸光度比值的一致性经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性2、红外光谱鉴别法红外光谱法是一种专属性很强、应用较广（固体、液体、气体样品）的鉴别方法。主要用于组分单一、结构明确的原料药、特别适用于用其他方法不易区分的同类药物，如磺胺类、甾体激素类和半合成抗生素类药品。（三）色谱鉴别法1、薄层色谱鉴别法瑞士CAMAGSCANNER3薄层扫描仪岛津CS-9000双波长薄层扫描仪薄层色谱鉴别方法的特点是固定相一次使用，不会被污染，样品预处理简单。应用范围广，节约溶剂，减少污染，利于不同性质化合物分离。在实际工作中，一般采用对照品（或标准品）比较法，即将供试品和对照品（或标准品）用同种溶剂配制成同样浓度的溶液，在同一薄层级上点样、展开、显色，供试品所显主