Neuro Oncol（IF=15.9）：质谱流式（CyTOF）揭示免疫治疗相关不良事件的细胞亚群标志物

部分患者在免疫检查点抑制剂（ICI）治疗后出产生严重副作用，例如神经免疫相关不良事件（irAE-n）。为了克服诊断和治疗挑战，深入地了解irAE-n的发生机制至关重要。2023年10月12日，NeuroOncol（IF=15.9）杂志上发表了一篇题为“Immunesignaturesofcheckpointinhibitor-inducedautoimmunity-afocusonneurotoxicity”的文章，通过质谱流式细胞技术（CyTOF）发现irAE-n患者存在特异性的免疫细胞失调，并通过Luminex芯片技术发现接受ICI治疗的irAE-n患者出现炎症因子和趋化因子的增加。通过建立诊断模型发现效应记忆型CD8+

T细胞和CXCL10可作为诊断irAE-n的潜在标志物。

研究设计为了寻找irAE-n的癌症患者中的特异性免疫细胞亚群，研究人员通过质谱流式（CyTOF）分析来自34例irAE-n患者和49名没有irAE-n的对照患者的外周血样本，总共检测分析了48个蛋白靶标。并使用多重细胞因子测定（Luminex）进行血清细胞因子检测。图1研究设计研究结果1、CyTOF发现与irAE-n相关的T细胞谱、先天免疫亚群和B细胞谱考虑到ICI治疗靶点主要表达在T细胞上，研究首先将CyTOF数据分析集中在T细胞亚群上。评估了每位参与者大约20000个外周血T细胞，并分析了50个不同簇中37个T细胞标记物的表达，发现irAE-n患者的效应记忆型CD8+

T细胞水平增加（图1A）。由于早期临床研究报告表明B细胞耗竭疗法对irAE-n有益，研究人员分析了非T细胞免疫细胞群体的变化。评估了每个参与者大约50000个非T细胞，并分析了30个簇中21个白细胞标记物，发现irAE-n患者与对照组相比CD11c+cDC减少，NK细胞减少，非经典CD16+CD14-单核细胞减少，同时CD14+

CD11b+单核细胞增加（图1B）。这些发现表明irAE-n患者的先天免疫细胞失调。此外，结合前期自身抗体数据，发现自身抗体阳性irAE-n患者存在特异性B细胞改变。图2CyTOF发现与irAE-n相关的细胞亚群2、Luminex发现与irAE-n相关的细胞因子特征采用Luminex液相芯片检测了血清样本中45种细胞因子/趋化因子/生长因子。结果显示介导免疫细胞运输的趋化因子显著增加，如CXCL10、CCL3、CCL4、CCL5。此外，TNFα、IL-1R显著增加。此外生长因子VEGF-α、PIGF-1、PDGF-BB、HGF在irAE-n中显示出更高浓度。总之，这些结果表明，接受ICI治疗的irAE-n患者出现炎症并增强免疫细胞迁移（图3）。图3Luminex发现与irAE-n相关的细胞因子特征3、irAE-n的潜在外周血标志物其他病因（例如感染等）可能会出现irAE-n类似的体征和症状。因此，鉴定ICI诱导的irAE-n自身免疫标志物非常重要。研究人员使用多因素逻辑回归研究了不同外周血免疫标志物与irAE-n之间的关系，发现具有较高的CD8+EM1T细胞比例（阈值=T细胞的7.2%）和较高的CXCL10浓度（阈值=49.5pg/ml）的患者出现irAE-n的可能性较高（图4A、4B）。CD8+EM1T细胞比例和CXCL10浓度诊断irAE-n准确度达到82.1%（图4C）。CD8+EM1T细胞频率和CXCL10水平的低相关性表明这些参数与irAE-n独立相关（图4D）。总之，研究结果表明CD8+EM1T细胞和CXCL10可能是ICI诱导的自身免疫的标志物。图4CD8+EM1T细胞和CXCL10可作为irAE-n外周血标志物总结与讨论本研究采用CyTOF发现神经免疫相关不良事件（irAE-n）患者的特异性免疫细胞亚群，发现免疫细胞失调（T细胞亚群、先天免疫亚群和B细胞亚群），并通过Luminex芯片技术发现接受ICI治疗的irAE-n患者出现炎症并增强免疫细胞迁移。结合前期结合前期自身抗体数据，发现自身抗体阳性irAE-n患者存在特异性B细胞改变。最后通过建立诊断模型发现CD8+效应记忆T细胞和CXCL10可作为诊断irAE-n的有潜力的标记物。总之，研究通过联合CyTOF、Luminex和自身抗体分析，全面揭示了检查点抑制剂诱导的自身免疫免疫特征。华盈生物：单细胞+空间+蛋白组系统性服务平台1）“蛋白芯片”和“蛋白质谱”双平台技术服务体系将完美助力于血液蛋白、细胞因子、外泌体蛋白标志物的发现，双管齐下，最大限度的不漏筛低丰度的血液蛋白，发现最具临床意义的标志物。2）包含大约2万多种人类蛋白的“人类蛋白组芯片”，可用来全面筛选血液自身抗体，发现肿瘤、自身免疫疾病等新的自身抗体诊断标志物。3）“ISOP单细胞功能蛋白组”可实现对单个细胞亚群分泌蛋白组的检测，发现关键的多功能性细胞，作为肿瘤免疫治疗、CAR-T细胞治疗的预测标志物。4）质谱流式细胞术（CyTOF）可以支持全血样本、组织样本、单细胞悬液等多种样本类型的分析，抗体库包含常用的人源抗体500多种，鼠源抗体300多种，可以实现对细胞亚型、细胞功能的精准分析。5）空间单细胞蛋白组学（IMC+PCF）可获得特定组织结构中细胞亚群数量、细胞邻域的关系图谱、细胞通讯网络、以及免疫检查点等关键功能蛋白在单个细胞上的表达定位等深度空间信息，可用于疾病机制靶点和诊断、疗效、预后等标志物的发现。

业务咨询400-869-2936微信同号）相关文献Müller-JensenL,SchulzAR,MeiHE,etal.

Immunesignaturesofcheckpointinhibitor-inducedautoimmunity-afocusonneurotoxicity.

NeuroOncol.2023Oct12:noad198.doi:10.1093/neuonc/noad198.Epubaheadofprint.|工作邮箱：market@|官网链接：#

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