动物细胞融合技术及应用 高二生物人教版选择性必修三

第三节

动物细胞工程及应用第3课时

动物细胞融合技术及应用特异性高：双抗夹心法保证了抗体交叉反应低，从而有效提高了免疫学方法的特异性，减少假阳性的发生。第三节

动物细胞工程及应用第3课时

动物细胞融合技术及应用【学习目标】1.阐述动物细胞融合技术的概念、方法、原理2.利用细胞融合的知识分析单克隆抗体的制备过程、特点3.通过分析新冠抗原试剂盒检测原理，体会单克隆抗体的应用，并能将所学知识应用于社会生产生活实践，参与社会事件的探讨。探究一

动物细胞融合技术【活动一】自主阅读课本P66-67，填写学案内容。探究一

动物细胞融合技术1.概念：在一定条件下将_______或_______动物细胞，通过

、

或

方法，结合形

细胞的技术。2.诱导方法：物理方法

化学方法

等

生物方法

等

两个多个生物物理化学电融合诱导1个PEG诱导灭活的病毒探究一

动物细胞融合技术【活动一】自主阅读课本，填写学案内容。3.融合的结果：

___________

4.完成的标志：

5.融合的原理：

形成杂种细胞细胞核融合细胞质膜有一定的流动性【检测一】判断：1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术诱导融合的原理、方法相同。（

）2.二倍体动物细胞融合后的杂种细胞仍是二倍体细胞。（

）3.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术的结果不同。（

）探究一动物细胞融合技术XX√探究一动物细胞融合技术三、应用：在疾病诊断、治疗等领域展现出美好的前景。特别是大量制备抗体。传统制备抗体的方法过程：向小鼠反复注射某种抗原小鼠产生抗体从血清中分离相应抗体缺

点

❓资料：1.从血清中获得相应抗体，需要大量小鼠血液。2.动物在生存环境中会接触多种抗原，产生数百万种以上抗体。传统制备抗体的方法产量低纯度低、特异性差如何获得产量高、纯度高、特异性强的单一抗体呢？1.抗体由

细胞产生。2.多种不同的抗原刺激B细胞分化为

种（个）浆细胞，

1个浆细胞只产生

种特异性抗体。【知识回顾】浆多1【设计方案】结合动物细胞培养技术，如何获得纯度高的单一抗体？一般无增殖能力可行吗？1个浆细胞体外培养浆细胞细胞群单一抗体产生什么细胞能无限增殖？癌细胞单克隆抗体的制备体外大量增殖1个浆细胞癌细胞融合单克隆抗体（克隆）米尔斯坦科勒诺贝尔生理医学奖获得者：单克隆抗体制备过程【任务二】根据图中操作，完成下列填空一、免疫小鼠、诱导融合：浆细胞单克隆抗体制备过程1.向小鼠体内注入

；2.对小鼠免疫处理的目的是

；3.多次免疫刺激的目的是获得

；4.从小鼠的

部位获得浆细胞；一、免疫小鼠、诱导融合：获得相应浆细胞特定的抗原蛋白大量相应浆细胞脾脏（已免疫的B细胞）单克隆抗体制备过程5.取出的脾脏组织可剪碎后用

处理制备单细胞悬液。6.用

技术培养小鼠的

细胞，7.将

细胞和

细胞诱导

；若融合，只考虑两两融合，结果培养液中共

种细胞。一、免疫小鼠、诱导融合：胰蛋白酶或胶原蛋白酶动物细胞培养骨髓瘤浆骨髓瘤融合5单克隆抗体制备过程如何筛选？杂交瘤细胞浆细胞一、免疫小鼠、诱导融合：单克隆抗体制备过程二、第一次筛选：【活动三】根据资料2讨论在培养液中添加什么物质可以

筛选出杂交瘤细胞，并说明理由。选择培养基单克隆抗体制备过程二、第一次筛选：HAT选择培养基浆细胞浆-浆骨髓瘤细胞骨-骨杂交瘤细胞DSDDS不能增殖而死亡不能合成DNA而死亡通过S途径合成DNA，大量增殖注：培养液中还需要添加次黄嘌呤（H）、胸腺嘧啶（T）。单克隆抗体制备过程二、第一次筛选：HAT选择培养基浆细胞浆-浆骨髓瘤细胞骨-骨杂交瘤细胞DSDDS不能增殖而死亡不能合成DNA而死亡通过S途径合成DNA，大量增殖思考：得到的杂交瘤细胞合成并分泌的抗体都是同一种吗？单克隆抗体制备过程浆细胞1种抗原蛋白上有不同种抗原表位，每一种抗原表位都可刺激产生相应的抗体。不同的抗原表位多种不同单克隆抗体制备过程三、第二次筛选：目的？选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞【活动四】小组活动，结合稀释涂布平板法和单个菌

落的来源，讨论问题

1

和

2单克隆抗体制备过程稀释加到最多1个细胞❓多孔培养板三、第二次筛选：单克隆抗体制备过程方法：抗体检测法阳性孔(1)怎样筛选出所需的杂交瘤细胞？原理是什么？三、第二次筛选：原理：抗原和抗体特异性结合单克隆抗体制备过程细胞增殖，获得单一细胞群阳性孔(2)第二次筛选时，克隆化培养的目的是什么？三、第二次筛选：【思考】单位时间内，荧光现象越明显，说明什么？杂交瘤细胞合成并分泌抗体能力强单克隆抗体制备过程四、大规模生产：杂交瘤细胞单克隆抗体的优点:特异性强、灵敏度高、可大量制备既能无限增殖、又能分泌单一抗体改进：鼠-人嵌合抗体、全人源抗体。单克隆抗体制备过程【构建概念模型】1.

每个小组根据所给卡片和箭头构建制备单克隆抗体的流程（用胶带黏贴）;2.

标出过程中进行筛选的环节；3.思考应用了哪些细胞工程技术。小组活动：【解决实际问题】

应用1.诊断疾病：新冠抗原检测试剂盒单克隆抗体应用1.诊断疾病：

新冠抗原检测试剂盒核衣壳蛋白(N)包膜蛋白(E)刺突蛋白(S)膜糖蛋白(M)RNA包膜检测原理？【活动六】请结合图示，小组讨论学案问题。单克隆抗体应用单克隆抗体应用一1.制备抗体1和T线抗体时给动物注射什么？

检测的原理是什么？

新冠病毒N蛋白新冠病毒N蛋白与抗体特异性结合与N蛋白不同抗原表位结合双抗夹心法降低交叉反应这两种单克隆抗体与N蛋白的相同抗原表位结合吗？单克隆抗体应用2.新冠抗原检测阳性时为什么会出现两色显色带，阴性时为什么只出现一条显色