罗氏调经种子丸治疗肾虚肝郁型黄体不健的实验研究

罗氏调经种子丸治疗肾虚肝郁型黄体不健的实验研究

黄绿色功能障碍（pmd）是指卵黄酮分泌不足或采取措施减少妊娠高血压的临床综合征。西医学一般认为是由于下丘脑—垂体功能失调,使卵巢排卵后黄体分泌孕酮不足,黄体期缩短,以致子宫内膜分泌反应不良,引起月经不调;或内膜发育不良,不利于受精卵的种植和早期发育,而导致不孕、自然流产。本课题组应用已故著名妇科专家罗元恺教授的经验方罗氏调经种子丸对肾虚肝郁型黄体不健所致系列疾病和高催乳素血症进行了多年的研究,取得了良好的疗效,现将其中月经失调部分研究结果报道如下。1临床研究1.1数据和方法1.1.1菌株年龄、资料及标准全部病例来自1998年11月至2002年3月在广州中医药大学第一附属医院妇科门诊就诊的月经失调患者96例,年龄最大38岁,最小23岁,平均年龄(29.86±3.65)岁;病程最长10年,最短3个月,平均(39.48±30.73)月;其中月经先期43例,月经后期13例,月经先后无定期19例,月经过多35例,月经过少12例,经期延长29例。诊断标准、纳入标准和排除标准符合卫生部《中药新药临床研究指导原则》有关规定。采用随机数字表法将患者随机分为罗氏调经种子丸治疗组(简称治疗组)79例和麒麟丸对照组(简称对照组)17例,两组的年龄、病程等均无显著性差异(P>0.05),具有可比性。1.1.2患者组2治疗组给予服用罗氏调经种子丸(本院制剂,主要成分有菟丝子、白芍、当归、熟地、淮山药、柴胡等),温开水送服,每次6g,3次/d,连续服用3个月为1疗程。对照组给予麒麟丸[广东汕头市中药厂生产,主要成分有何首乌、淫羊藿、菟丝子、锁阳、党参等,具有补肾填精,益气养血之效。批准文号:(93)卫药准字Z-46号]口服,每次6g,3次/d,连续服用3个月为1疗程。1.1.3两组临床疗效比较(1)观察病人的主要临床症状、体征、舌象、脉象和基础体温,统计两组临床总疗效;(2)月经期第7～10天抽血测定血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、催乳素(PRL),基础体温上升第7～8天测定孕酮(P),治疗前后各检测1次。1.1.4疗效判定标准根据《中华人民共和国中医药行业标准·中医病证诊断疗效标准》。有效:治疗后月经周期、经量、经期恢复正常达3个月以上,或在治疗中妊娠,其他症状消失或减轻。无效:治疗后月经情况无明显改善或加重。1.1.5统计方法采用SPSS11.0统计软件包进行统计。1.2结果1.2.1两组均能的比较表1结果显示,经3个月治疗后,两组疗效相仿(P>0.05)。1.2.2lh/fsh比值表2结果显示,治疗后患者血清FSH、LH、E2、PRL、P水平及LH/FSH比值均较治疗前有显著性改善(P<0.01)。说明罗氏调经种子丸能够调整LH/FSH比值,升高血中E2、P水平,进而调整内分泌。1.2.3构造前两种种子丸的临床应用表3结果显示,罗氏调经种子丸治疗后患者BBT在卵泡期和黄体期均有显著性改善(P<0.01),提示罗氏调经种子丸有促进卵泡发育和改善黄体功能的作用。2机械研究2.1材料和方法2.1.1药物、试剂和仪器动物:健康雌性SD大鼠,清洁级,体质量200～250g,共40只,由广州中医药大学实验动物中心提供。实验药品及仪器:灭吐灵注射液由无锡市第七制药有限公司生产,批号:001113;溴隐停片由德国许瓦兹大药厂生产,批号:T16082A;罗氏调经种子丸由广州中医药大学第一附属医院制剂室提供,水提后制成每mL含生药1.35g;血清E2、P、PRL放射免疫试剂盒由天津九鼎医学生物工程公司提供;SN-695型智能放免γ测量仪由上海原子核研究所日环仪器一厂生产;DDL-5低速冷冻离心机由上海安婷科学仪器厂生产;HZS-H水浴振荡器由哈尔滨市东联电子技术开发有限公司生产。2.1.2灌胃水提液及定期用药①分组:称体质量,将大鼠随机分为4组,每组10只动物:空白组(A组)、模型组(B组)、中药组(C组)、西药组(D组)。②将大鼠每日早晚各1次阴道涂片观察动情周期,连续2个动情周期稳定后施行以下给药方案:各组大鼠进入动情前期(即卵泡期)开始用药,空白组(A组)与模型组(B组)每100g体质量每日灌胃生理盐水1mL;中药组(C组)每日灌胃中药水提液13.5g/kg?(相当于成人剂量的5.7倍);西药组(D组)每日灌胃溴隐停(用注射用水稀释成混悬液)1.6mg/kg,4组均持续灌胃5个性周期(20d)。除空白组外,其他各组从第2个性周期(8d)后1d?开始皮下注射灭吐灵针12.5mg?/只,持续用药3个性周期(12d)。③上述各组第1次给药前及最后1次给药后2d,称取大鼠体质量,眼眶取血,离心收集血清,采用放射免疫法测定P、E2、PRL,同时处死大鼠,分离子宫、卵巢,去除周围脂肪组织,迅速称取组织(湿称)的质量,分别计算子宫、卵巢系数[器官组织(湿)质量(mg)与大鼠体质量(100g)的比],并立即用体积分数为10%甲醛固定,送病理检查。2.2运行监测患者精子、卵巢系数(1)一般情况:毛色、纳食、体质量、大便、活动等。(2)解剖后观察:子宫、卵巢形态和质量(湿质量),计算子宫、卵巢系数。(3)光镜下观察子宫内膜所处时期、卵巢黄体形态、成熟卵泡数、新生黄体数、闭锁卵泡数目。(4)放射免疫法测定血清P、E2、PRL值。2.3统计方法采用SPSS11.0统计软件包进行统计。2.4结果2.4.1各组大鼠动物体质量情况造模后西药组大鼠明显表现为精神倦怠思睡,睡多活动少,饮食减少,体质量减轻;模型组部分大鼠有倦怠表现,较西药组轻,经刺激后可有改善;中药组较其他3组活动明显增加,大便溏;空白组大鼠表现受惊吓,毛稀松,活动少,大便溏或饮食减少。各组动物体质量情况详见表4。结果显示,模型组体质量低于空白组(P<0.05),中药组体质量高于模型组(P<0.01),并超过空白组(P<0.05),西药组体质量与模型组相仿(P>0.05)。2.4.2各组动物子宫和卵巢系数的比较表5结果显示,罗氏调经种子丸可增加模型动物的子宫系数和卵巢系数(P<0.01),其作用与西药溴隐停相仿(P>0.05)。2.4.3各组动物的血清水平为ii、p和prl表6结果显示,中药和西药均能改善模型动物的性激素的分泌(P<0.01)。2.4.4各组的成熟卵数、新生黄芽数和封闭卵数的比较表7结果显示,罗氏调经种子丸和溴隐停均可增加模型动物的成熟卵泡数和新生黄体数(P<0.01)。2.4.5罗氏种子处理丸对子宫内膜病理变化的影响表8结果显示,罗氏调经种子丸能较好地将模型大鼠增殖期的子宫内膜转化为分泌期的子宫内膜。3讨论3.1肾中阴阳转化病对于黄体不健的中医辨证,目前尚无统一的认识,有些医家认为,黄体不健的中医辨证主要分为肾虚肝郁、肾虚宫寒、肾虚脾弱三型;亦有学者研究认为,黄体不健的中医辨证主要为肾虚肝郁型,其中偏肾阳虚者占69%～86%。本课题组根据“肾藏精”、“肾主生殖”、“经水出诸肾”及真机期(排卵期)是肾中阴阳转化,“重阴必阳”的结果,认为阴精不足则转化排卵不良,出现阴不足阳亦虚的证候,同时肾水不足以养肝柔肝亦出现肝郁之证。本研究前曾通过对46例月经失调的患者进行临床分析和内分泌测定,发现属黄体不健的有23例,占50%,说明月经不调与黄体不健关系密切。应用补肾疏肝为主的罗氏调经种子丸治疗本病取得了显著的疗效,本研究进一步证实以补肾疏肝为主的罗氏调经种子丸对黄体不健有改善作用。3.2《罗元恺论医集》定经汤全国著名中医学专家罗元恺教授在治疗妇科疾病方面具有丰富的临床经验和深厚的学术造诣,尤其擅长于调经、助孕、安胎。罗元恺教授根据《傅青主女科》定经汤原方,结合多年的临床经验而拟定的加味定经丸(罗氏调经种子丸),具有补肾、舒肝、健脾、调经种子之功。主治月经不调、先后无定期,或断续不净,以致难以受孕,亦治更年期综合征。他在《罗元恺论医集》论逍遥散、定经汤等的沿革及其异同中,详述了定经汤在舒肝、健脾、养血、滋肾之中,比较着重于滋肾养血;他的经水出诸肾的观点,是根据《素问·上古天真论》论述月经产生的机理而提出的。因肾精所化之气为肾气,肾气盛而后天癸至,天癸至才有月经来潮,故滋肾养血是调治月经或通或闭的重要原则。当然,月经之定期来潮,还有赖肝、脾的共同协调,但以肾水的充沛为根本,又以血为用事。故定经汤从肾、肝、脾兼顾,以肾为重点治月经失调,是比较全面和有效的。肾为阴中之阴,位居下焦,故滋肾药宜重。补可扶弱,重可镇怯而直达下焦,以收水到渠成之效。罗氏调经种子丸(原名加味定经汤)是在定经汤的基础上,结合罗老自己的经验加减而成。方中菟丝子、熟地补肾益精,调补肾阴阳为君;当归、白芍、淮山养血滋肾助君为臣,柴胡、白芍疏肝养肝。诸药合用,共奏滋肾补肾,疏肝健脾,调经种子之功。3.3减少体质细度、提高体质量现代医学认为黄体不健是由于下丘脑—垂体—卵巢功能失调所致。本课题的实验部分采用脑内多