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文档简介
QB/TXXX—20XX孢子发芽率的测定本文件规定了酱油、黄豆酱的种曲及曲精孢子发芽率的测定方法。本文件适用于酱油、黄豆酱的种曲及曲精孢子发芽率的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义3.1孢子发芽率rateofconidiagermination菌种在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得发芽孢子数占孢子总数的比例,即为该试样的孢子发芽率。4设备和材料4.1恒温培养箱。4.2显微镜。4.3凹玻片、载玻片、盖玻片、培养皿、接种环、接种棒、等。5培养基和试剂5.1查氏培养基:制备方法见附录A.1。5.2无菌生理盐水:制备方法见附录A.2。6分析步骤6.1制备悬浮液取试样适量入盛有25mL事先灭菌的生理盐水和玻璃珠的锥形瓶中,充分振摇约15min,务使孢子个个分散,制成孢子悬浮液。悬浮液制备后要立刻制作标本培养,时间不宜放长。6.2制作标本先在凹玻片的凹窝内滴入无菌水4滴,再将查氏培养基融化并冷却至45℃~50℃后,接入孢子悬浮液数滴。充分摇匀后,用玻璃棒以薄层涂布在盖玻片上,然后反盖于凹玻片的窝上,四周涂凡士林封固。放置于30℃~32℃恒温箱内培养3h~8h。6.3镜检取出标本在10×40倍镜头条件下观察孢子发芽情况,逐个数出发芽孢子数(孢子边缘有明显芽体记为已发芽孢子数)和未发芽孢子数。在计数时每个标本一般选取10个不同视野进行观察,每个视野内有10~20个孢子为宜。每个样品制作标本不少于2次并镜检,然后取其平均值,即为该样品的孢子发芽率。QB/TXXX—20XX7分析结果的表述试样的孢子发芽率按式(1)计算:X=×100……(1)式中:X——孢子发芽率,%;a——发芽孢子数,个;A——发芽及不发芽孢子总数,个。结果保留整数。8精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。QB/TXXX—20XXA.1.1成分硝酸钠3.0g磷酸氢二钾1.0g硫酸镁0.5g氯化钾0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15g三级水1000mLA.1.2制法上述各成分加入三级水中,加热煮沸至完全溶解。分装后,121℃灭菌15min。A.2.1成分氯化钠
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