第03章蛋白质的结构与功能课件

第三章

蛋白质的结构与功能

第一节

蛋白质的生物学功能与分类

第二节

蛋白质的化学组成第三节

肽第四节

蛋白质的分子结构

第五节蛋白质结构与功能的关系第六节

蛋白质的理化性质（StructureandFunctionofProtein）定义：蛋白质是由许多不同的氨基酸通过肽键缩合而成的生物大分子。蛋白质是信息大分子，是DNA的遗传信息的体现者。在生命活动过程中发挥了极其重要的作用。第一节

蛋白质的生物学功能与分类1.蛋白质是生物体重要组成成分分布广：所有器官、组织都含有蛋白质；细胞的各个部分都含有蛋白质。含量高：蛋白质是细胞内最丰富的有机分子，占人体干重的45％，某些组织含量更高，例如脾、肺及横纹肌等高达80％。一、蛋白质的生物学意义1）作为生物催化剂（酶）2）代谢调节作用3）物质的转运4）参与细胞间信息传递5）运动作用6）免疫保护作用7）营养与贮存8）保护与支持2.蛋白质具有重要的生物学功能3.氧化供能二、蛋白质的分类*根据蛋白质组成成分单纯蛋白质结合蛋白质=蛋白质部分+非蛋白质部分*根据蛋白质形状纤维状蛋白质球状蛋白质单纯蛋白质按溶解度分类蛋白质分类举例溶解度白蛋白血清白蛋白溶于水、稀盐、稀酸、稀碱，不溶于饱和硫酸铵溶液球蛋白血清球蛋白、纤维蛋白原溶于稀盐、稀酸、稀碱，不溶于水、半饱和硫酸铵溶液谷蛋白麦谷蛋白溶于稀酸、稀碱；不溶于水、稀盐。醇溶蛋白醇溶谷蛋白、醇溶玉米蛋白溶于70-80%乙醇中；不溶于水硬蛋白角蛋白、胶原蛋白、弹性蛋白不溶于水、稀中性盐、稀酸、稀碱和一般不机溶剂组蛋白胸腺组蛋白溶于水、稀酸；不溶于稀氨水精蛋白鱼精蛋白溶于水，稀酸，不溶稀氨水各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16％。由于体内的含氮物质以蛋白质为主，因此，只要测定生物样品中的含氮量，就可以根据以下公式推算出蛋白质的大致含量：100克样品中蛋白质的含量(g%)=每克样品含氮克数×6.25×1001/16%

蛋白质元素组成的特点二、氨基酸蛋白质是高分子化合物，可以受酸、碱或蛋白酶作用彻底水解，最终产生各种氨基酸。因此，蛋白质的基本组成单位为氨基酸（一）氨基酸分类1、常见氨基酸基本结构与构型组成蛋白质的20种常见氨基酸都是α-氨基酸（脯氨酸为α-亚氨基酸）。除脯氨酸外，其余氨基酸可以用下面的结构通式表示。HRCCOOHNH2共同的结构，即：一个羧基（-COOH）、一个氨基(-NH2)和一个氢原子与碳原子相连，结构的差异表现在R基的不同。除甘氨酸（R为H）外，其他氨基酸的α碳原子都是手性碳原子，故具有旋光异构现象，存在L-型和D-型两种异构体，组成天然蛋白质的氨基酸均为L-型COOHCOOHNH2CHHCNH2

RRL-a-氨基酸D-a-氨基酸常见氨基酸的分类原则：20种常见氨基酸根据R侧链极性和带电荷的不同，可将氨基酸分为四类。优点：有利于反映不同氨基酸在蛋白质中可能发挥的作用。非极性R基氨基酸色氨酸

tryptophanTryW

5.89丙氨酸

alanineAlaA

6.00缬氨酸

valineValV

5.96亮氨酸

leucineLeuL

5.98异亮氨酸

isoleucineIleI

6.02苯丙氨酸

phenylalaninePheF

5.48

蛋氨酸

methionine

MetM

5.74脯氨酸

prolineProP

6.30丝氨酸

serineSerS

5.68酪氨酸

tyrosineTryY

5.66

半胱氨酸

cysteineCysC

5.07天冬酰胺

asparagineAsnN

5.41

谷氨酰胺

glutamineGlnQ

5.65

苏氨酸

threonineThrT5.60极性中性R基氨基酸甘氨酸

glycine

Gly

G

5.97天冬氨酸

asparticacidAspD

2.97谷氨酸

glutamicacidGluE

3.22赖氨酸

lysineLysK

9.74精氨酸

arginineArgR

10.76组氨酸

histidineHisH

7.59酸性氨基酸碱性氨基酸非极性氨基酸

其侧链为烃基、吲哚环或甲硫基等非极性疏水基团，共有8种。不带电荷的极性氨基酸

其侧链上有羟基、巯基或酰胺基等极性基团，这些基团有亲水性，在水溶液中不带电荷碱性氨基酸

侧链上有氨基、胍基或咪唑基，在水溶液中能结合H+而带正电荷。酸性氨基酸

侧链上有羧基，在水溶液中能释放H+而带负电荷。2、稀有氨基酸

4-羟脯氨酸胱氨酸二硫键HO—蛋白质中含量较少的氨基酸。3、非蛋白质的氨基酸不参与蛋白质的组成，而是以游离的状态存在于生物体之中。（二）氨基酸的理化性质1.紫外吸收色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在280nm

附近。苯丙氨酸的最大吸收峰为260nm大多数蛋白质含有这些氨基酸残基，测定蛋白质溶液280nm的光吸收值是分析溶液蛋白质含量的快捷的方法。芳香族氨基酸的紫外吸收2.两性解离及等电点氨基酸是两性电解质，其解离程度取决于所处溶液的酸碱度。等电点(isoelectricpoint,pI)

在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性。此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。pH=pI+OH-pH>pI+H++OH-+H+pH<pI氨基酸的兼性离子阳离子阴离子3、茚三酮反应(ninhydrinreaction)茚三酮氨基酸茚三酮(还原型)醛茚三酮蓝色或紫色化合物2氨基酸与茚三酮水合物共热，可生成蓝紫色化合物，其最大吸收峰在570nm处。可作为氨基酸定量分析方法。4、Sanger反应与2，4二硝基氟苯（DNFB）反应生成相应的DNP-氨基酸（黄色）应用：该反应常用于多肽链或蛋白质的N—端氨基酸的分析。NH2NCHR1CNOHCHR2CNOHCHR3CNOHCHR1CNOHCHR2CNOHCHR3CNOHHNCSNHCNHCNCSOR1HH2NCHR2CNOHCHR3CNOH多肽(氨基酸=n)异硫氰酸苯酯苯氨基硫甲酰多肽苯乙内酰硫脲衍生物6mol/L

HCl多肽(氨基酸=n-1)重复下一轮反应CS

荧光时间5、Edman反应一、基本概念肽:是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物。肽键：一个Aa的α-羧基与另一个氨基酸分子的α-氨基缩合脱掉一分子的H2O而形成的化学键叫肽键（酰胺键）第三节肽+-HOH甘氨酰甘氨酸肽键*两分子氨基酸缩合形成二肽，三分子氨基酸缩合则形成三肽……*多肽链：许多Aa残基通过肽键彼此连接而成的链状多肽*由几个到十几个氨基酸相连而成的肽称为寡肽(oligopeptide)，由更多的氨基酸相连形成的肽称多肽(polypeptide)。氨基酸残基(residue)：肽链中的氨基酸分子因为脱水缩合而成为不完整的分子形式。主链骨架（mainchainbackbone）由许多氨基酸残基通过肽键连接而成的长链，不包括侧链R。N—末端

肽链中有游离的氨基的一端。写在肽链的左边C—末端

肽链中有游离的羧基的一端。写在肽链的右边N末端C末端牛核糖核酸酶肽单位与二面角肽单位（piptideunit）是主链骨架的重复单位，C-CONHC。肽平面：肽单位上的六个原子都位于同一个刚性平面称肽平面。结构特点1、肽键具有双键性质，不能自由旋转2、肽单位6个原子位于同一个刚性平面，酰胺平面3、方式排布：C==O与N—H或者Ca—C与Ca

—N4、一定的键长和键角二面角：二面角决定多肽链主链置架的构象二、几种生物活性肽概念生物体内很多以游离状态存在，相对分子质量小于6000，在构象上较松弛、并且具有多种生物学功能的小肽。GSH过氧化物酶H2O22GSH2H2OGSSG

GSH还原酶NADPH+H+NADP+1.谷胱甘肽(glutathione,GSH)

体内许多激素属寡肽或多肽神经肽(neuropeptide)2.多肽类激素及神经肽表一些生物活性肽的结构与功能下丘脑分泌，促腺垂体分泌促甲状腺素焦谷·组·脯-NH2促甲状腺素释放激素胰岛

-细胞分泌的激素，调节糖代谢H·组·丝·谷胺·甘·苏·苯丙·苏·丝·天·酪·丝·赖·酪·亮·天·丝·精·精·丙·谷胺·天·苯丙·缬·谷胺·色·亮·蛋·天胺·苏·OH胰高血糖素（牛）神经递质H·精·脯·赖·脯·谷胺·苯丙·甘·亮·蛋·OHP物质血管疏张肽H·精·脯·脯·甘·苯丙·丝·脯·苯丙·精·OH血浆缓激肽（牛）垂体后叶分泌，促进肾保留水H·半·酪·苯丙·谷胺·天胺·半·脯·精·甘·NH2抗利尿激素（加压素）升高血压，刺激肾上腺皮质分泌醛固酮H·天·精·缬·酪·异·组·脯·苯丙·OH血管紧张素-II（牛）脑内存在的抑制疼痛的阿片样肽H·酪·甘·甘·苯丙·蛋·OH蛋氨酸脑啡肽生理活性分子结构生物活性肽SS一、概述蛋白质分子是指蛋白质中具有完整生物功能的最小结构单位。构象与构型

构型是指在具有相同分子式的立体异构体中取代基团在空间的相对取向。构型的改变需要共价键的变化。

构象是指具有相同结构式和相同构型的分子在空间里可能的多种形态。是由单键的旋转而产生的。第四节蛋白质的分子结构研究蛋白质分子构象的主要方法X射线衍射技术

测定晶体蛋白质分子构象。光谱技术

测定溶液中蛋白质分子构象。包括紫外光谱、荧光光谱、核磁共振。蛋白质分子的结构层次一级结构（多肽链Aa排列顺序）二级结构（多肽链主链骨架的局部空间结构）超二级结构（二级结构单位的集合体）结构域（structuraldomain二级结构或超二级结构形成相对独立的区域）三级结构（一条多肽链所有原子的空间排布）四级结构（亚基缔合而成）二、蛋白质的一级结构(primarystructure)（一）、概念蛋白质的一级结构是指多肽链中各种氨基酸残基的排列顺序，即氨基酸序列。主要的化学键肽键，有些蛋白质还包括二硫键。SerGlyIleValGluGlnCysCysThrIleCysSerLeuTyrGlnLeuGluAsnTyrCysAsnPheValAsnGlnHisLeuCysGlySerHisLeuValGluAlaLeuTyrLeuValCysGlyGlyGluArgPhePheTyrThrProLysThrNH215101520COOHA链NH2151015202530HOOCB链一级结构是蛋白质的基本结构，是空间结构的基础，是在分子水平上阐述蛋白质结构与其功能关系的基础。（二）多肽链的氨基酸序列分析1、测序前的准备测定蛋白质的分子量及氨基酸组成N端分析以确定蛋白质的多肽链数目断裂二硫键分离单一多肽链2、多肽链的氨基酸序列测定和重叠组合对多肽链进行限制性水解成小片段Edman降解法进行小片段肽段的序列分析对各片段序列进行比较叠加，拼出完整的多肽序列确定二硫键的位置氨基酸的组成分析：2苯、6丙、3蛋、4甘、2精、1赖、3亮、1酪、2丝、1苏、1天、1缬、1异、1组多肽链的N端和C端的确定：H-甘，天-OH多肽的水解和肽段的测序：胰蛋白酶水解：甘-丙-丙-苏-蛋-组-酪-苯-精甘-丙-丝-蛋-丙-亮-异-赖苯-甘-亮-蛋-丙-缬-丝-精亮-甘-丙-天溴化氰水解：甘-丙-丙-苏-蛋组-酪-苯-精-甘-丙-丝-蛋丙-亮-异-赖-苯-甘-亮-蛋丙-缬-丝-精-亮-甘-丙-天多肽段的组合叠加：甘-丙-丙-苏-蛋-组-酪-苯-精甘-丙-丙-苏-蛋组-酪-苯-精-甘-丙-丝-蛋甘-丙-丝-蛋-丙-亮-异-赖丙-亮-异-赖-苯-甘-亮-蛋苯-甘-亮-蛋-丙-缬-丝-精丙-缬-丝-精-亮-甘-丙-天亮-甘-丙-天H-甘-丙-丙-苏-蛋-组-酪-苯-精-甘-丙-丝-蛋-丙-亮-异-赖-苯-甘-亮-蛋-丙-缬-丝-精-亮-甘-丙-天-OH两种水解作用所得肽链的测序与组合三、蛋白质二级结构(secondarystructure)定义

是指多肽链主链骨架中局部空间结构，不包括侧链的构象。

-螺旋(

-helix)

-折叠(

-pleatedsheet)

-转角(

-turn)无规卷曲(randomcoil)二级结构的基本形式主要化学键

氢键1、α-螺旋

指多肽链中肽平面通过α-碳原子的相对旋转，沿长轴方向，按规律盘绕形成的一种紧密螺旋构象，又称3.613-螺旋特点a、沿中心轴一圈一圈地上升，形成一个螺旋式的构象。每一圈包括3.6个氨基酸残基，非整数，螺距0.54nm。b、两个螺旋之间形成链内氢键，羰基氧与其前第三个肽平面氨基上的氢生成氢键，氢键封闭环内有13个原子，α-螺旋仅靠氢键维持。c、R侧链，位于α-螺旋的外侧，对螺旋的形成与稳定有较大影响。d、有右手螺旋和左手螺旋之分，蛋白质中几乎都是右手螺旋。2、β-折叠β-折叠股：多肽链中一段较伸展的周期性折叠成的锯齿形的主链构象。β-折叠片：两条β-折叠股彼此平行排列，以氢键相连，从而形成β-折叠片。R基团交错伸向锯齿状结构的上下方。有顺向平行和逆向平行两种。3、β-转角

一条多肽链的主链发生180℃的转弯，这种回折角处就是β-转角。由4个氨基酸残基构成，由第一个肽单位的羧基碳上的氧与第三个肽单位氨基上的氢生成氢键。Ⅰ型

稳定Ⅱ型

不稳定RROOCCCCCHHNNOCCHN4、无规卷曲主链骨架某些片段中，大多数的二面角（Φ、Ψ）都不相同，其构象不规则。四、超二级结构和结构域超二级结构在蛋白质中，相邻二级结构单位组合在一起，相互作用，从而形成有规则的二级结构集合体，充当更高层级的构件。

结构域

一条长的多肽链，在超二级结构的基础上组装成n个相对独立的，且具有一定生物学功能的球状区域，称为结构域。具有特定的生物学功能。磷酸丙糖异构酶丙酮酸激酶结构域1

五、三级结构(tertiarystructure)定义一条多肽链，通过各种二级结构组装，借助非共价键的作用形成了紧密的球状构象，这种球状构象、就是蛋白质分子三级结构（适用于球蛋白）广义的三级结构是指：多肽链中所有原子在三维空间中的排布。主要的化学键主要是疏水作用力，另外，还有氢键、盐键、配位键主键：肽键副键

共价键：配位键、二硫键

非共价键

氢键

离子键

范德华引力

疏水键维持蛋白质分子构象的化学键

牛胰核糖核酸酶N端C端肌红蛋白(Mb)六、四级结构(quaternarystructure)1、寡聚蛋白：由二条或几条多肽链通过非共价键组成的蛋白质。2、多聚蛋白：由几十条、甚至更多多肽链聚合而成的蛋白质。3、亚基：蛋白质中具有独立三级结构的多肽链。4、蛋白质四级结构：由相同或不同的亚基（或分子）按照一定的排布方式聚合而成的聚合体。包括亚基的种类，数目、空间排布及相互作用。5、作用力：亚基之间的结合力主要是疏水作用力、其次是氢键和离子键等。血红蛋白的四级结构Hb与Mb一样能可逆地与O2结合，Hb与O2结合后称为氧合Hb。氧合Hb占总Hb的百分数（称百分饱和度）随O2浓度变化而改变。七、血红蛋白与肌红蛋白氧合能力肌红蛋白(Mb)和血红蛋白(Hb)的氧解离曲线第五节

蛋白质结构与功能关系

蛋白质特定的功能都是由其特定的构象决定的，蛋白质特定的构象又是由其一级结构决定的。一、蛋白质的一级结构与功能关系（一）、同功能蛋白质结构的种属差异和保守性。同功能蛋白质是指来源于不同生物的具有同一生物学功能的蛋白质。又称同源蛋白质。守恒Aa残基同功能蛋白质的一级结构中始终不变的氨基酸残基。

表中九种动物之间胰岛素分子一级结构中存在的氨基酸残基组成的差异不影响胰岛素的生物活性。临床上曾经应用猪和牛的胰岛素治疗人的糖尿病，取得了显著的疗效。胰岛素分子中氨基酸残基的差异部分来源氨基酸残基的差异部分A8A9A10B30人ThrSerIleThr猪TheSerIleAla狗ThrSerIleAla兔ThrSerIleSer牛AlaSerValAla羊AlaGlyValAla马ThrGlyIleAla抹香鲸ThrSerIleAla鲸AlaSerThrAla

动物体细胞色素C一级结构的进化树图中的数字表示该类动物与其祖先相比细胞色素C一级结构氨基酸残基的差异数（二）、一级结构变异与分子病所谓分子病是指由于基因突变导致合成了异常蛋白质或丧失合成蛋白质的能力，而引起的疾病。例：镰刀形红细胞贫血N-val·his·leu·thr·pro·glu·glu·····C(146)HbSβ肽链HbAβ肽链N-val·his·leu·thr·pro·val

·glu·····C(146)（一）、蛋白质的变性与复性

变性

（denaturation）在某些物理或化学因素的作用下，维系蛋白质空间结构的次级键断裂，天然构象被破坏，从而引起理化性质改变，生物学活性丧失。

二、蛋白质分子构象与功能关系

变性蛋白质的特性1、

生物功能丧失2、

物理性质发生了改变3、

化学性质发生改变

复性(renaturation)

蛋白质的变性有些是可逆的，除去变性因素后，在适宜的条件下，变性蛋白质可以从伸展态恢复到折迭态，并恢复所有的生物活性。这种现象称之为复性。

造成变性的因素

加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂等。

变性的本质

破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。天然状态，有催化活性尿素、β-巯基乙醇去除尿素、β-巯基乙醇非折叠状态，无活性（二）变构效应(allostericeffect)如果是促进作用则称为正协同效应(positivecooperativity)如果是抑制作用则称为负协同效应(negativecooperativity)一个寡聚体蛋白质的一个亚基与其配体结合后发生构象的改变，引起相邻亚基发生构象的改变，从而影响寡聚体中其它亚基与配体结合能力发生改变的现象，称为变构效应（协同效应cooperativity）。蛋白质组(proteome)：一个组织或一个细胞中基因组所表达的全部蛋白质，或在特定条件下，一个细胞内所存在的所有蛋白质蛋白质组学(proteomics)

研究和阐述在不同条件下，蛋白质组中全部蛋白质的结构、性质与功能，影响因素及其相互联系。一、蛋白质的两性解离和等电点

蛋白质是由氨基酸组成的，其分子中除多肽链两端的α-氨基和α-羧基外，侧链上还有一些可解离R基团，既有能解离出H+的酸性基团，又有能结合H+的碱性基团，因此蛋白质是多价的两性电解质。

第六节蛋白质的理化性质*蛋白质的等电点(isoelectricpoint,pI)

当溶液处于某一pH值时，蛋白质分子所带正、负电荷相等，即静电荷为零，呈兼性离子状态，此时溶液的pH称为该蛋白质的等电点（pI）电泳在直流电场中，带电粒子（蛋白质分子）向相反电极移动的现象。电泳的速度和方向，取决于它所带电荷的性质、数目及蛋白质分子的大小和形状。几种重要的蛋白质电泳*SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于蛋白质分子量的测定。*等电聚焦电泳，通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。*双向凝胶电泳是蛋白质组学研究的重要技术。二、蛋白质的胶体性质蛋白质是生物大分子,分子量6×103－106之间，其水溶液颗粒大小已达胶粒1—100nm范围之内，可以形成水化膜，故蛋白质具有胶体性质。*蛋白质胶体稳定的因素颗粒表面电荷；水化膜+++++++带正电荷的蛋白质－－－－－－－－带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质水化膜++++++++带正电荷的蛋白质－－－－－－－－带负电荷的蛋白质不稳定的蛋白质颗粒酸碱酸碱溶液中蛋白质的聚沉酸碱脱水作用脱水作用脱水作用三、蛋白质的沉淀1、

盐折：高浓度的中性盐（如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等）破坏蛋白质的胶体性质使蛋白质从水溶液中沉淀出来。2、

有机溶剂沉淀：可与水混溶的有机溶剂如乙醇、丙酮等，能破坏蛋白质颗粒的水化膜。3、

重金属沉淀：碱性条件下，重金属离子如Ag+、Hg2+、Cu2+、Pb2+等，可与蛋白质负离子结合，形成不溶性的蛋白盐沉淀。4、生物碱试剂沉淀反应：鞣酸、苦味酸、钨酸和三氯醋酸等均可使生物碱沉淀，故称为生物碱试剂。一般为酸性物质，可与蛋白质正离子结合，变成不溶性的盐而沉淀，条件为pH<pI。四、蛋白质呈色反应蛋白质分子中的肽键及组成氨基酸的各种特殊基团可以和有关试剂呈现一定的颜色反应。可用于蛋白质的定性、定量分析。⒈茚三酮反应(ninhydrinreaction)

蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚三酮反应。⒉双缩脲反应(biuretreaction)蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与硫酸铜共热，呈现紫色或红色，此反应称为双缩脲反应，双缩脲反应可用来检测蛋白质水解程度。五、蛋白质紫外吸收光谱特征由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸，因此在280nm波长处有特征性吸收峰。蛋白质的OD280与其浓度呈正比关系，因此可作蛋白质定量测定。六、蛋白质相对分子量的测定测定蛋白质的相对分子量常用方法:

沉降速度法凝胶过滤法

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法

（一）凝胶过滤(gelfiltration)又称分子筛层析层析(chromatography)的原理待分离蛋白质溶液（流动相）经过一个固态物质（固定相）时，根据溶液中待分离的蛋白质颗粒大小、电荷多少及亲和力等，使待分离的蛋白质组分在两相中反复分配，并以不同速度流经固定相而达到分离蛋白质的目的。凝胶过滤（gelfiltration）

凝胶过滤又称分子筛层析，在层析柱内填充惰性的微孔胶粒（如交联葡聚糖），将蛋白质溶液加入柱上部后，小分子物质通过胶粒的微孔进入胶粒，向下流动的路径加长，移动缓慢；大分子物质不能或很难进入胶粒内部，通过胶粒间的空隙向下流动，其流动的路径短，移动速度较快，从而达到按不同分子量将溶液中各组分分开的目的（二）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳常用于蛋白质分子量的测定。十二烷基硫酸钠END第三章

蛋白质

（多选题）

一、A型题（1-32)

1.使蛋白质和酶分子显示巯基的氨基酸是A.蛋氨酸B.胱氨酸C.半胱氨酸D.谷氨酸E.赖氨酸2.蛋白质分子引起280nm光吸收的最主要成分是A.肽键B.半胱氨酸的-SH基C.苯丙氨酸的苯环D.色氨酸的吲哚环E.组氨酸的咪唑环

3.天然蛋白中不存在的氨基酸是A.半胱氨酸B.瓜氨酸C.脯氨酸D.蛋氨酸E.丝氨酸4.以下哪一种氨基酸不具备不对称碳原子A.甘氨酸B.丝氨酸C.半胱氨酸D.苏氨酸E.丙氨酸5.维系蛋白质一级结构的化学键是A.氢键B.肽键C.盐键D.疏水键E.范德华力6.下列氨基酸不含极性侧链的是A.丝氨酸B.苏氨酸C.亮氨酸D.酪氨酸E.半胱氨酸7.下列对氨基酸的叙述错误的是A.赖氨酸和精氨酸都是碱性氨基酸B.谷氨酸和天冬氨酸各含两个氨基C.丝氨酸和酪氨酸均含羟基D.缬氨酸和亮氨酸属支链氨基酸E.苯丙氨酸和酪氨酸均含苯环8.下列含有两个羧基的氨基酸是A.丙氨酸B.酪氨酸C.赖氨酸D.甘氨酸E.谷氨酸9.组成蛋白质的基本单位是A.L-α-氨基酸B.D-β-氨基酸C.L-β-氨基酸D.L,D-α-氨基酸E.D-β-氨基酸10.下列哪一物质不属于生物活性肽A.胰高血糖素B.短杆菌素SC.催产素D.胃泌素E.血红素11.变性蛋白质的特点是A.粘度下降B.丧失原有的生物活性C.颜色反应减弱D.溶解度增加E.不易被胃蛋白酶水解12.蛋白质变性是由于A.蛋白质一级结构改变B.蛋白质空间构象的改变C.辅基的脱落D.蛋白质水解E.以上都不是13.下列有关蛋白质β片层结构的叙述正确的是A.主链骨架呈锯齿状B.两个相邻的肽平面呈折纸状C.β片层结构是一种较伸展的肽链结构D.若干矩齿状肽链骨架平行或反平行排列，链间靠氢键维系E.以上都正确14.可用于蛋白质定量的测定方法有A.双缩脲法B.紫外吸收法C.Folin酚试剂法D.凯氏定氮法E.以上都可以．15.蛋白质多肽链具有的方向性是A.从3＇端到5＇端B.从5＇端到3＇端C.从C端到N端D.从N端到C端E.以上都不是16.血浆蛋白质的pI大多为pH5-6，它们在血液中的主要存在形式是A.兼性离子B.带负电荷C.带正电荷D.非极性分子E.疏水分子17.蛋白质分子中的α螺旋和β片层都属于A.一级结构B.二级结构C.三级结构D.域结构E.四级结构18.α螺旋每上升一圈相当于氨基酸残基的个数是A.4.5B.3.6C.3.0D.2.7E.2.519.维持蛋白质二级结构的主要化学键是A.疏水键B.盐键C.肽键D.氢键E.二硫键20.关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是A.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性B.天然蛋白质分子均有这种结构C.三级结构的稳定性主要是次级键维系D.亲水基团多聚集在三级结构的表面E.决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基21.在生理pH下，下列哪一种是带正电荷的氨基酸A.半胱氨酸B.谷氨酸C.赖氨酸D.色氨酸E.缬氨酸22.蛋白质的一级结构及高级结构决定于A.亚基B.分子中盐键C.氨基酸组成和顺序D.分子内部疏水键E.分子中氢键23.蛋白质溶液的稳定因素是A.蛋白质溶液的粘度大B.蛋白质在溶液中有布朗运动C.蛋白质分子表面带有水化膜和同种电荷D.蛋白质溶液有分子扩散现象E.蛋白质分子带有电荷24.有关血红蛋白(Hb)和肌红蛋白(Mb)的叙述不正确的是A.都可以和氧结合B.Hb和Mb都含铁C.都是含辅基的结合蛋白D.都具有四级结构形式E.都属于色蛋白类25.下面哪一种氨基酸是前体掺入多肽后才合成的A.脯氨酸B.赖氨酸C.羟脯氨酸D.谷氨酸E.丝氨酸26.有一蛋白质水解产物在pH6用阳离子交换柱层析时，第一个被洗脱下来的氨基酸是A.Val(pI5.96)B.Lys(pI9.74)C.Asp(pI2.77)D.Arg(pI10.76)E.Tyr(pI5.66)27.经测定，一血清标本的含氮量为10g/L，那么，蛋白质的浓度是多少A.52.5g/LB.57.5g/LC.62.5g/LD.67.5g/LE.72.5g/L二、B型选择题(33-52)A.碱性氨基酸B.亚氨基酸C.芳香族氨基酸D.含硫氨基酸E.含羟基氨基酸33.脯氨酸34.色氨酸35.蛋氨酸36.丝氨酸37.组氨酸A．一级结构B．二级结构C．三级结构D．四级结构E．超二级结构

38.蛋白质变性，何结构未破坏39.亚基具有几级结构40.有活性的血红蛋白A.凝胶过滤B.离子交换层析C.亲和层析D.超速离心E.聚丙烯酰胺凝胶电泳

41.根据蛋白质的密度与形态来分离蛋白质42.根据蛋白质的生物学特性来分离蛋白质43.根据蛋白质分子量和所携带的电量来分离蛋白质A.胰蛋白酶B.8mol/L尿素C.溴化氰D.2-巯基乙醇E.过甲酸

44.削弱或断裂氢键45.还原二硫键46.水解赖氨酸或精氨酸羧基侧肽键A.盐键B.二硫键C.肽键D.疏水键E.3‘,5’-磷酸二酯键47.连接蛋白质一级结构的键为48.连接核酸一级结构的键为49.在蛋白质分子中谷氨酸和精氨酸侧链之间可形成A.β-巯基乙醇B.盐酸胍C.碘乙酸D.SDSE.以上都不是50.能与蛋白质半胱氨酸的-SH反应生成羧甲基衍生物的是51.使蛋白质亚基解聚和变性但不向蛋白质分子中引入负电荷的是52.SDS-聚丙烯酰胺凝胶