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文档简介

动物机能学实验2编者：陈小军实验内容实验一影响药物作用的因素实验二药物代谢动力学实验实验三处方与药物的配伍禁忌实验四中毒与解救试验实验五药物对离体肠的影响实验六抗微生物药物的体外抑菌实验实验七生物碱的提取及其药敏实验实验八药物对离体心脏的影响实验六、抗菌药物的体外抑菌实验

【实验目的】

掌握药敏试验的方法，了解药物对常见菌的作用。下一张

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耐药性抗菌作用防治作用与不良反应药动学过程抗病力致病力【实验原理】下一张

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【基本原理】抗菌活性：是指抗菌药抑制或杀灭病原微生物的能力。两种测定方法：体外与体内（化学治疗实验）；评价指标：

（1）最低抑菌浓度（MIC）：

能够抑制培养基中细菌生长的最低浓度。

（2）最低杀菌浓度（MBC）：能够杀灭培养基中细菌的最低浓度。意义：体外抗菌试验对临床用药具有参考价值。鉴定新药是否具有抗菌活性。下一张

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0.500.50.50.50.50.50.50.50.5葡萄球菌液（ml）弃1111111111青霉素（ml）1111111111牛肉膏汤（ml）10987654321

试管号下一张

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１－８，１０管各加入培养18h并用牛肉膏汤稀释至5X１０７～１０８ｃｆｕ／ｍｌ的金黄色葡萄球菌菌液０．５ml。放入37℃培养箱内培养24h后，取出观察细菌生长情况。以能抑制细菌生长的最小浓度为青霉素对该细菌的最低抑制浓度（MIC）。结果记录于下表：下一张

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管号12345678910稀释倍数11/21/41/81/161/321/641/1281/2560稀释浓度(u/ml)12864321684210.5－金色葡萄球菌

记录实验结果下一张

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二、纸片法

以灭菌小棉签取金黄色葡萄球菌液（每ml约含3亿个细菌），注意不宜蘸取过多，以刚浸湿整个棉签为度，轻轻地从四个不同方向平行交叉划线，使菌液均匀涂布于整个琼脂平板上。同样方法，也可制作大肠杆菌平板备用。

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二、纸片法

取已经制备好的6种药敏片：青霉素20000μ/ml、链霉素、多西环素、10％磺胺二甲嘧啶钠，10％恩诺沙星，碘酒2.5％，放置在已接种细菌的琼脂平板表面的不同区域。为了位置间隔准确，最好事先在平皿底用蜡笔作上记号。

将培养皿置37℃培养24h，观察纸片周围有无抑菌环，并测量抑菌圈的直径，比较各药的抗菌效力。样例如下图：下一张

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细菌青霉素链霉素磺氨嘧啶钠四环素金葡菌链球菌大肠杆菌

实验结果记录：抑菌直径（mm）下一张

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药物沙门氏杆菌【注意事项】1.接种细菌时要在无菌条件下均匀涂抹；2.用试管二倍稀释法测MIC值，稀释时注意稀释的顺序；3.药敏片之间要间隔适当距离，以免抑菌圈出现交叉。4.四人一组，纸片法每人一个平皿，作四种药物对一种菌的作用，同组每人所接菌种不同，结果记录时将本组结果综合。

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【思考题】

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