高考生物一轮总复习课件：专题22微生物的利用

专题二十二微生物的利用考点一微生物的实验室培养1.微生物的实验室培养液体固体碳源生长因子计算灭菌不能微生物2.大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(2)纯化大肠杆菌的方法称量灭菌倒平板接种环连续划线梯度稀释不同稀释度比较消毒与灭菌实验室常用的消毒和灭菌的方法项目概念常用方法应用范围消毒使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法：在100℃下煮沸5～6min一般物品巴氏消毒法：在70～75℃下煮30min或在80℃下煮15min一些不耐高温的液体，如牛奶化学药剂消毒法如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等紫外线消毒法：紫外灯照射30min接种室、操作台灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)灼烧灭菌：酒精灯火焰接种工具的灭菌和试管口的灭菌干热灭菌：在160～170℃下灭菌1～2h玻璃器皿、金属工具的灭菌高压蒸汽灭菌：在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，灭菌15～30min培养基及容器的灭菌微生物的纯化培养——平板划线法与稀释涂布平板法方法平板划线法稀释涂布平板法注意事项(1)接种环的灼烧①第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避免污染培养物②之后每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端③划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者(2)灼烧接种环之后，要冷却后再进行取种，以免温度太高杀死菌种(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连(4)划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破(1)稀释操作时：每支试管及其中的9mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1cm～2cm处(2)涂布平板时：①涂布器用体积分数为70%酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精目的在培养基上形成由单个菌种繁殖而来的子细胞群体——菌落培养平板冷凝后倒置培养，使培养基表面的水分更好地挥发，防止皿盖上水珠落入培养基造成污染比较选择培养基与鉴别培养基(1)两种培养基比较种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入某些化学物质依据某些微生物对某些物质的特殊需求或抗性而设计从众多微生物中分离所需的微生物加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基培养基中加入某种指示剂或化学药品产生特定的颜色或其他变化鉴别不同种类的微生物用伊红—美蓝培养基鉴别大肠杆菌(2)选择培养基四种常见制备方法或实例考点二微生物的筛选与计数1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数分离与计数菌种筛选使用以尿素为唯一氮源的选择培养基计数方法稀释涂布平板法；显微镜直接计数法实验流程土壤取样→样品稀释→培养与观察→计数菌种鉴定以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂2.分解纤维素的微生物的分离筛选分解尿素的细菌与分解纤维素的微生物的比较项目土壤中分解尿素的细菌的分离分解纤维素的微生物的分离选择培养基以尿素为唯一氮源的选择培养基富含纤维素的选择培养基鉴定方法在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，pH升高，说明细菌能分解尿素刚果红染色法，即刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，培养基出现以纤维素分解菌为中心的透明圈特有代谢过程分离纤维素分解菌所用的两种培养基比较分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基，再用鉴别培养基。(1)选择培养基为液体培养基，以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长；因培养基中无凝固剂，为液体培养基，利用液体培养基能使营养成分被充分消耗，以增加纤维素分解菌的浓度。(2)鉴别培养基含琼脂，为固体培养基，细菌可在培养基上形成肉眼可见的菌落。刚果红染色法应用的就是鉴别培养基。1.误认为所有微生物培养基中均需加入“生长因子”点拨碳源、氮源、水分、无机盐、生长因子是微生物生长必需的五大营养成分，但大多数培养基中都含碳源、氮源水分、无机盐四类物质，可能不需额外添加“生长因子(如维生素)”，这是因为许多微生物可自行合成这些生长因子，而对那些合成能力有限或不能合成生长因子的微生物(如乳酸菌)，则需在培养基中添加诸如维生素等生长因子2.混淆两种“对照组”与“重复组”点拨

(1)两种对照组作用比较①判断培养基中“是否有杂菌污染”，需将未接种的培养基同时进行培养。②判断选择培养基“是否具有筛选作用”，需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。(2)重复组的设置及作用为排除偶然因素对实验结果的干扰，在每一稀释度下宜设置3个平板作重复组，选择菌落数均在30～300且数目相差不大的三个平板，用“平均值”代入计数公式予以计算菌落数。3.不明确每次划线操作中“灼烧接种环”的目的或误认为划线结束后“不必灼烧接种环”点拨平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同①第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。②每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。③划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。4.不知道菌落