肿瘤免疫研课程班课件

肿瘤免疫TumorImmunity肿瘤抗原机体抗肿瘤的免疫机制肿瘤的免疫逃逸机制肿瘤的免疫治疗

Modelofsequentialgeneticalterationsleadingtometastaticcoloncancer.Eachofthestagesindicatedatthebottomismorphologicallydistinct,allowingresearcherstodeterminethesequenceofgeneticalterations.屡次打击模型(MultihitModel)一、肿瘤特异性抗原二、肿瘤相关性抗原肿瘤抗原

(TumorAntigens)化学和物理致癌因素诱发的肿瘤抗原病毒诱发的肿瘤抗原癌基因和突变型抑癌基因表达的肿瘤抗原正常静止基因表达的肿瘤抗原一、肿瘤特异性抗原

Micewereinducedtoproducetumorsbytheinjectionofachemicalcarcinogen(methyl-cholanthrene).Tumorcellsfromthesemiceweretheninjectedsubcutaneouslyintogeneticallyidenticalmice.Later,thegrowingtumorwereremovedsurgically.Micechallengedwiththesametumorwereabletorejectit,butthosechallengedwithadifferenttumor(inducedwiththesamecarcinogen)werenot.Theabilitytorejectthetumorcouldbetransferredwithlymphoidcells.化学和物理(理化)致癌因素诱发的肿瘤抗原

Experimentalinductionofimmunityagainsttumorcellsinducedbypolyomavirus(PV)病毒诱发的肿瘤抗原癌基因和突变型抑癌基因表达的肿瘤抗原在不同致癌因素和特定条件下，原癌基因可被异常激活，抑癌基因发生突变，导致正常细胞癌变，并能检测到异常表达产物或相应的编码蛋白。这类蛋白在胞内经处理分解为不同小肽，通过MHCI类分子递呈可作为肿瘤特异性抗原肽被T细胞所识别，激活CTL反响。Wild-typep53isrequiredtorestraincellgrowth.Itsactivitymaybelostbydeletionofbothwild-typeallelesorbyadominantmutationinoneallele.突变的抑癌基因编码蛋白

Activationofagrowthfactorreceptorinvolvesligandbinding,dimerization,andautophosphorylation,Atruncatedoncogenicreceptorthatlackstheligand-bindingregionisconstitutivelyactivebecauseitisnotrepressedbytheN-terminaldomain.癌基因异常激活蛋白PathwaysthatrelyonRascouldfunctionbycontrollingeitherGNRForGAP.OncogenicRasmutantsarerefractorytocontrol,becauseRasremainsintheactiveform.

Translocationsbetweenchromosome22andchromosome9generatePhiladephiachromosomesthatsynthesizebcl-ablfusiontranscriptsthatareresponsiblefortwotypesofleukemia.

机体中某些染色体易位形成新的癌基因，所编码蛋白由于融合点上出现新的氨基酸顺序和形成新的空间构象，仅在恶性细胞中表达，并与细胞的恶性转化密切相关,是T细胞识别的特异性肿瘤抗原。染色体易位产生的融合蛋白Alteration Functionofprotein TumortypePointmutationERBB2 Growthfactorreceptor BreastcarcinomaFMS CSF-1receptor AML,myelodysplasiaRas GTP-bindingprotein Carcinomasandothersp53 Tumorsuppressorcellcyclecontrol Manyincludingbladder, colon,lungRB1 Tumorsuppressorcellcyclecontrol Retinoblastoma, osteosarcoma PancreaticcarcinomaChromosomaltranslocationBCR-ABL Tyrosinekinase CML,ALLEZA-PRL Transcriptionfactor Pre-BcellALLH4-RET Growthfactorreceptor/tyrosinekinase ThyroidcarcinomaTPR-MET Growthfactorreceptor/tyrosinekinase GastriccarcinomaLMYC-RLF Transcriptionfactor SmallcelllungcarcinomaNPM/ALK Tyrosinekinase LymphomaDeletionmutations

ERB-B Growthfactorreceptor GlimasGeneticalterationsinhumantumorsproducingnewproteinsequences正常静止基因表达的肿瘤抗原肿瘤细胞中某些被T细胞所识别的抗原往往由正常状态下的静止基因(silentgenes)所表达，除人的正常睾丸细胞外，这些基因一般只在恶性细胞中被激活而呈异常高表达,又被称为C-T抗原(cancer-testisantigen)；其中,MAGE家族至少有14个成员(MAGE-1～MAGE-14)，它们之间具有高度同源性(80～90％)；MAGE家族成员表达特征：在不同肿瘤中有不同程度的表达，多个成员也可在同一肿瘤中表达。同一肿瘤中可测出多种静止基因的表达。这类基因的编码蛋白经胞质溶胶途径处理成小肽，通过MHCI类分子递呈于肿瘤细胞外表，被CD8+T细胞所识别。TumourantigensrecognizedbyTlymphocytes:atthecoreofcancerimmunotherapy.NATUREREVIEWS|CANCERVOLUME14|FEBRUARY2021

ImmunogenicityofNY-ESO-1,MAGE-A1,MAGE-A3,andSSX-2CTantigenmRNAExpressionfrequencyFrequencyofserum T-cellepitopesantibodyincancerpatients CD8

CD4NY-ESO-134%Melanoma9%MelanomaA2DR425%OvarianCancer12%OvarianCancerA3116%LungCancer4%LungCancerCw3 24%BreastCancer 8%BreastCancer Cw6MAGE-A116%Melanoma 1%MelanomaA1B35Cw2DR13 28%OvarianCancer 3%OvarianCancerA3B7Cw3DR15 49%LungCancer 4%LungCancer A24B53Cw16 18%BreastCancer 0BreastCancer A28MAGE-A336%Melanoma 2%Melanoma A1B35DR4 17%OvarianCancer 0OvarianCancer A2B37DR7 47%LungCancer 0LungCancer A2B40DR11 11%BreastCancer 0BreastCancer A24B44 DR13 A24B52SSX-235%Melanoma 1%Melanoma A2 Unknown 0OvarianCancer 0OvarianCancer 17%LungCancer 0LungCancer 7%BreastCancer 0BreastCancerImmunologicalReviews2002;Vol188:22–32mRNAMAGE-1蛋白309氨基酸HLA-Cw16HLA-A1161169EADPTGHSYSAYGEPRKL

开放阅读框230238MAGE-1基因X染色体q28区

外显子3

外显子2

外显子1MAGE-1.Cw16肽段

MAGE1基因定位于X染色体q28区，mRNA转录表达的MAGE-1蛋白为309氨基酸，由HLA-A1和HLA-Cw16提呈的抗原肽位于161～169和230～238区域氨基酸序列。MAGE-1基因、编码蛋白和抗原肽

肿瘤相关性抗原胚胎性抗原分化抗原癌基因高表达的抗原异常表达的糖脂/糖蛋白抗原ElevationofAFPandCEAinserumofpatientswithvariousdiseases胚胎性抗原细胞发生恶性转化时，胚胎抗原编码基因可被激活呈异常表达，出现在细胞质、膜外表或分泌在血流中，其蛋白含量与细胞的恶性程度往往呈正相关。此类抗原一般难以激发机体产生抗体，但发现某些抗原可经胞质溶胶途径处理成抗原肽由MHCI类分子递呈于细胞膜外表，被T细胞识别。分化抗原分化抗原是细胞在分化成熟不同阶段出现的抗原，不同来源、不同分化阶段的细胞可表达不同的分化抗原。这些抗原在多种黑色素瘤细胞呈异常高表达、结构高度同源，即很少显示个体差异。异常表达的分化抗原可经胞内途径处理成为抗原肽，通过MHCI或II类分子递呈于细胞外表，被CD8+或CD4+T细胞所识别。某些肿瘤细胞癌基因表达产物未发现突变特征仅有表达量的差异。这些过度表达蛋白中某些肽经MHCI类分子递呈于细胞外表可被机体CD8+T细胞所识别，同时在某些患者体内可测出相应的抗体。癌基因高表达的抗原黑色素瘤特异性CTL识别的黑色素细胞分化抗原肽分化抗原 抗原肽结构 肽位置 递呈分子酪氨酸酶

MLLAVLYCL

1-9

HLA-A2

YMNGTMSQV

369-377

HLA-A2

AFLPWHRLF(L)

－

HLA-A24

SEIWRDIDF

192-200

HLA-B44Pmel17/gp100

KTWGQYWQV

154-162

HLA-A2

ITDQVQGSV

209-217

HLA-A2

YLEPGPVTA

280-288

HLA-A2

LLGDTATLRL

457-466

HLA-A2

VLYRYGSFSV

476-485

HLA-A2Melan-AMART-1

(E)AAGIGILTV

26(7)-35

HLA-A2

ILTVILGVL

32-40

HLA-A2gp75TRP1

－

－

HLA-A31Overexpressionofoncogene-encodedproteinsinhumantumorsProtein Normalfunction TumorknowntoexpresshighlevelsoftheproteinCyclinD1 RegulatoroftheG1-S Breastcancer(approx.20%),Coloncancer(20%) transitionviadependentkinase Thyroidcancer,Livercancer(11-13%)CyclinE RegulatoroftheG1-Stransition Breastcancer(90%) viabindtocyclin-dependentkinaseMdm2 Nuclearphosphoprotein. Sarcomas(30-36%),Leukaemia(between42-73%) Inhibitsthefunctionofp53 breastcancercellline,Gliomas(10-15%) byinteractionwiththeproteinReceptortyrosinekinasesEGFreceptorReceptorfortheepidermal Breastcancer(30-40%),Lungcancer(80%),Gliomas, growthfactor Bladdercancer(70%),Renalcancer(73%),Headand neckcancer(50%)ormore,dependentontype)ErbB2 Receptorbelongingtothesame Breastcancer(26%),Ovariancancer(20-30%),Stomach(Her-2/neu)familyastheEGFRreceptor.Cancer(4%)Non-small-celllungcancer(upto30%).

Ligandnotclearlyidentified.NuclearoncogenesC-myc Transcriptionfactor Breastcancer(6-57%),Small-celllung(20-30%), Cervicalcancer(30%),Testicularcancer,Colon cancerandHeadandneckcancer.ProteinsinvolvedintheregulationofapoptosisBcl-2 inhibitsapoptosis Non-Hodgkin’slymphoma(40-80%)WTp53 Tumorsuppressorprotein, Gliomas(astrocytomas)(60-80%) transcriptionfactorcaninduce Headandneckcancer(34%),Sarcoma(17%),apoptosisinresponsetoDNAdamage.

Acutemyeloidleukaemia(69%) 异常表达的糖脂/糖蛋白抗原某些肿瘤细胞可出现膜结构改变，表达过量或结构异常的糖脂和糖蛋白，其中包括神经节苷脂、血型抗原和粘蛋白等。外表结构改变和异常有助于肿瘤的侵袭和转移。这类异常的糖脂和糖蛋白可诱发B细胞产生抗体和激发CTL反响。应用相应单抗检测其含量，可为肿瘤的诊断和预后判断提供参考。

B细胞CD4+T细胞CD8+T细胞MHCI类分子MHCII类分子Th1细胞因子

T细胞抗原特异T前体细胞NK

LAK活化M

直接裂解Th2细胞因子B细胞肿瘤细胞ADCCCDC激活补体分子肿瘤细胞克隆增殖APCTCRpMHCTCRpMHC激活的CD8+CTL降解成8-10寡肽降解成14-25寡肽CD4+T肿瘤细胞

CD8+T肿瘤抗原诱导凋亡机体抗肿瘤的免疫机制

MechanismofImmuneResponsetoTumor一、体液免疫抗肿瘤作用二、细胞免疫抗肿瘤作用

免疫系统识别肿瘤细胞表达抗原产生免疫应答，激活效应细胞和释放一系列效应分子，攻击和去除肿瘤细胞。一、体液免疫抗肿瘤作用Tumor二、细胞免疫抗肿瘤作用1.T细胞CD4+T细胞与CD8+T细胞3.NK细胞4.巨噬细胞CD4+T细胞TumorCathepsins(blue)LFA-1(green)Talin(red)CD8+T细胞

杀伤肿瘤细胞过程分为效靶细胞结合，攻击杀伤和靶细胞裂解。显示对肿瘤细胞效应功能具有高度的特异性和有效性。NK细胞特点NK细胞是一类对多种靶细胞自发性细胞毒活性的淋巴细胞谱系的特殊亚群，不表达T、B细胞特有外表标志物(TCR、BCR、CD4和CD8等)，人类NK细胞表达CD16和CD56等分化抗原，占外周淋巴细胞的10-15%。杀伤靶细胞的机制

抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用受体介导杀伤作用受体介导杀伤作用（MHCI类分子

）KIR和/或CD94/NKG2活化受体活化受体配体正常细胞NK细胞MHCI类分子－＋肿瘤细胞NK细胞杀伤＋受体介导的NK细胞激活及其对肿瘤细胞的杀伤机制

MHCI类分子是KIR配体，相互作用产生抑制性信号，可抑制NK细胞激活。当肿瘤细胞I类分子表达下降或缺陷，缺乏炎症信号，抑制NK细胞激活，发挥杀伤效应。抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)巨噬细胞巨噬细胞参与非特异性免疫和特异性免疫，杀伤肿瘤细胞机制主要为：①吞噬和杀伤作用；②介导炎症反响；③释放细胞因子参与免疫调节；④加工递呈抗原、启动免疫应答；⑤参与ADCC释放效应分子杀伤靶细胞。一、肿瘤细胞免疫原性低下二、免疫增强三、效应细胞的功能异常四、肿瘤微环境中的免疫抑制细胞和相关分子肿瘤的免疫逃逸机制

MechanismofTumorEvasionoftheImmuneSystem一、肿瘤细胞免疫原性低下1.抗原表达不稳定性2.MHCI类分子表达异常3.肿瘤细胞抗原加工处理缺陷4.缺乏共刺激信号Lowimmunogenicityandantigenicmodulation遗传不稳定性和抗原表达异质性抗原调变

抗原表达不稳定性NatureRev.CancerVol.15,473-483(2021)MHCI类分子表达异常肿瘤细胞外表MHCⅠ类分子表达下降或丧失2微球蛋白表达异常A1A33B8B44Cw3Cw4ABCw3A1B8CCw3A1A3Cw4Cw3B8Cw4B44DCw3A1Cw4B8E肿瘤细胞异常的HLA表型A.正常细胞HLAI类分子表型(举例)。肿瘤细胞异常HLAI类分子表型：B.全部丧失，包括HLA-A、B、C；C.HLA一条单元型丧失，即HLA-A、B、三位点均丧失一半等位基因；D.某一位点丧失(此处为HLA-B或A位点);E.某一等位基因丧失(此处为HLA-B44)。参见表18-5CD8+CTL内源性抗原蛋白酶体TAPER抑制蛋白酶体活性：EBV，人CMV阻断MHC合成和ER潴留：腺病毒，人CMV阻断TAP转运：HSV从ER中移除MHCI类分子：CMVMHCI类相关抗原加工提呈途径病毒I类样分子干扰CTL的识别：小鼠CMV抗原肽pMHC

某些病毒在肿瘤细胞内可抑制蛋白酶体活性，阻断TAP转运，干扰MHC分子合成及其与抗原肽的结合等，从而影响MHC分子-抗原肽复合物在肿瘤细胞膜上的表达和CD8CTL对肿瘤细胞的识别。肿瘤细胞抗原加工处理途径的缺陷多种病毒干扰肿瘤细胞抗原加工处理途径参见表18-6缺乏共刺激信号CD8T细胞肿瘤细胞CD28TCRMHCI类分子抗原肽CD28B7TCRMHCI类分子抗原肽T细胞增殖细胞毒效应ABB7cDNACTL杀伤协同刺激信号〔B7分子〕与T细胞增殖、活化〔A〕肿瘤细胞缺乏B7分子，不能有效激活T细胞；〔B〕转染B7基因的肿瘤细胞表达B7分子后可激活CTL显示对肿瘤细胞的细胞毒活性。二、免疫增强在实验中发现，给荷瘤动物输入抗肿瘤免疫血清可促进肿瘤细胞的生长，称之为免疫增强。〔削弱机体的抗肿瘤能力，从而有利于肿瘤细胞逃避效应细胞的识别和攻击〕。现认为，免疫增强是由于血清中存在封闭因子(blockingfactor)，后者遮盖了肿瘤细胞外表的抗原决定簇。肿瘤的免疫增强不仅与封闭因子有关，也可能涉及某些淋巴细胞。在过继性免疫治疗中发现，某些致敏淋巴细胞过继性注入带瘤宿主，对肿瘤细胞出现刺激而非抑制其生长。这些淋巴细胞有可能属于抑制性细胞。三、效应细胞的功能异常1.T细胞信号转导途径缺陷2.细胞因子产生异常引起Th1/Th2细胞漂移AbnormalanddeficientofTCR-mediatedsignaltransductionT细胞信号转导途径缺陷参见表18-7TwosubsetsofCD4+Tcellseachregulationbyproducingcytokines细胞因子产生异常引起Th1/Th2细胞漂移髓样抑制性细胞M2巨噬细胞调节性T细胞肿瘤细胞分泌免疫抑制因子肿瘤微环境中存在多种蛋白酶和相关分子四、肿瘤微环境中的免疫抑制细胞和相关分子VEGF,GM-CSF,

肿瘤细胞肿瘤微环境DC成熟T细胞IL-10IL-12下降NK细胞精氨酸酶ROS

髓样抑制细胞在肿瘤微环境中VEGF等因子诱导作用下，髓样抑制细胞〔MSC〕通过分泌精氨酸酶、ROS和IL-10，下调效应T细胞的杀伤活性,抑制DC细胞成熟。IL-10也可抑制巨噬细胞分泌IL-12，从而降低NK细胞的活性。髓样抑制细胞发挥免疫抑制作用的可能机制髓样抑制性细胞巨噬细胞TGF-

,IL-6,PGE2,COX-2M2巨噬细胞肿瘤抗原肿瘤细胞PGE2CCL22H铁蛋白肿瘤浸润巨噬细胞Treg耐受型DC效应性T细胞CCR4CCR4CCR7CCR7CD45RA未致敏Treg记忆性Treg诱导耐受诱导Treg扩增吸引Treg肿瘤细胞以及肿瘤浸润的巨噬细胞分泌CCL22及H铁蛋白，招募初始的CCR4+Treg细胞在肿瘤部位积聚，Treg细胞与耐受性DC细胞相互作用下，抑制效应T细胞的功能。Treg细胞的诱导和免疫抑制作用调节性T细胞IL-10FasLFasIL-6

肿瘤细胞阻止凋亡

＋mTNFRsTNF-αBPsTNF-αTGF-

凋亡

效应细胞肿瘤细胞产生的免疫抑制因子和表达蛋白对效应细胞的作用--肿瘤细胞分泌免疫抑制因子FasLandthepossiblefatesofantitumorCTLs

ARG是L-精氨酸代谢通路中的关键酶之一，能催化L-精氨酸转化成L-鸟氨酸，从而降低L-精氨酸的水平。而L-精氨酸缺乏可下调T细胞CD3

链的表达；L-鸟氨酸是体内多胺生物合成的关键成分，而多胺是重要的内源性肿瘤刺激因子，在肿瘤细胞转化和肿瘤增殖中发挥重要作用。

L-精氨酸是NOS的作用底物，NOS能催化L-精氨酸产生NO和L-瓜氨酸。NOS2及其产物NO可以阻断IL-2的信号转导途径，从而抑制T细胞增殖活化。ARG1和NOS可协同作用导致过氧化亚硝酸盐ONOO－的产生，抑制T细胞功能。

COX-2过表达可刺激血管生成因子如VEGF和bFGF分泌，促进血管形成；COX-2过表达能够增加Bcl-2蛋白表达，抑制肿瘤细胞凋亡;COX-2能促进Th2型免疫应答;增强CD4+CD25+Treg的抑制功能，并诱导CD4+CD25－T表达foxp3。肿瘤微环境中存在多种蛋白酶和相关分子肿瘤的免疫治疗〔Tumorimmunotherapy〕一、肿瘤的主动免疫治疗二、肿瘤的被动免疫治疗

免疫治疗分为主动免疫疗法和被动免疫疗法两大类。前者着重激发机体抗肿瘤免疫应答能力；后者向宿主转移有抗肿瘤活性的治疗因子或细胞，抑制肿瘤生长。1.非特异性主动免疫疗法2.特异性主动免疫疗法肿瘤的主动免疫治疗非特异性刺激因子非特异性地激发机体的免疫系统，增强抗肿瘤免疫应答能力，而到达杀伤肿瘤细胞的目的。目前常用的有卡介苗(BCG)、短小棒状杆菌(PV)、左旋咪唑(Levamisole，LMS)和寡聚脱氧核苷酸(CpG)等。非特异性主动免疫疗法细胞因子特异性主动免疫疗法处理的瘤细胞作为疫苗肿瘤抗原(肽)和人工合成肽抗原作为疫苗Enhancementoftumorcellimmunogenicitybytransfectionofcostimulatorandcytokinegenes.TumorcellsthatdonotadequatelystimulateTcellsontransplantationintoananimalwillnotberejectedandwillthereforegrowintotumors.Vaccinationwithtumorcellstransfectedwithgenesencodingcostimulatorsorcytokines,suchasIL-2,canleadtoenhancedactivationofTcells.Thisapproachofusingtransfectedtumorcellsasvaccineshasworkedinmousemodels,butclinicaltrialshavenotyetbeensuccessful.Tumorvaccines.Twotypesoftumorvaccinesthathaveshownefficacyinclinicaltrialsandanimalmodelsareillustrated.Autologousdendriticcellsarepreparedfrompatients’ownperipheralbloodcells.Thedendriticcellsareeitherpulsedwithrecombinantproteinortransfectedwithageneconstructthatexpressestheprotein.Theconstructmayalsoexpresscostimulatorymolecules(notshown).基因工程疫苗UseofDNAvaccinesraisesbothhumoralandcellularimmunityDNA疫苗DC治疗性疫苗DC是专职抗原提呈细胞，负责对抗原进行加工处理后提呈给T细胞，诱导T细胞的活化和增殖，激发有效的免疫应答。由目前基于DC的治疗性肿瘤疫苗，主要分为两种，一是DC体外别离培养、扩增鉴定后，荷载特定抗原回输到患者体内，二是诱导DC在体内增殖、成熟，有效摄取特定肿瘤抗原提呈并激活T细胞。二者的共同目的都是最大程度活化肿瘤抗原特异性CD4T和CD8T细胞，发挥抗肿瘤效应。目前认为，单纯DC疫苗虽有疗效但仍须改进，需要寻找更为适宜的肿瘤抗原、更有效地促进DC增殖活化的方法或者与其他方法联合使用。需在整体设计实施合理，以保证在促进DC抗肿瘤效应，同时注意检测负向调节方面的变化。AppropriateutilizationandregulationofDCsinvaccinedesigninduceamuchmorepotentCTLantitumorimmuneresponse.(a)Tumorantigen-loadingtechniquesactivateDCsexvivo.(b)TargeteddrugsfacilitatethecaptureoftumorantigensbyDCsandtheexpressionofcostimulatorymoleculesandMHC-IIinvivo.(c)StimulatoryadjuvantsinducematurationofDCsandenhancetheactivationofCTLs.Aneffectivevaccineagainsthumanpapillomavirus(HPV)inducesantibodiesthatprotectagainstHPVinfection.Serotype16ofHPV(HPV-16)ishighlyassociatedwiththedevelopmentofcervicalcancer.Inaclinicaltrial,755healthyuninfectedwomenwereimmunizedwithavaccinegeneratedfromhighlypurifiednoninfectious'virus-likeparticles'(VLP)consistingofthecapsidproteinL1ofHPV-16andformulatedwithanalumadjuvant(inthiscasealuminumhydroxyphosphatesulfate).Incomparisonwiththeverylowtitersofantibodyinplacebo-treateduninfectedwomen(greenline),orwomenpreviouslyinfectedwithHPVthatreceivedplacebo(blueline),thewomentreatedwiththevirus-likeparticlevaccine(redline)developedhightitersofantibodyagainsttheL1capsidprotein.NoneoftheseimmunizedwomensubsequentlybecameinfectedbyHPV-16.Ananti-HPVvaccinemarketedasGardasilisnowavailableandrecommendedforuseingirlsandyoungwomenasaprotectionfromcervicalcancercausedbyHPVserotypes6,11,16,and18.肿瘤的被动免疫治疗

1.过继性免疫疗法

2.抗体导向疗法过继性免疫疗法过继性免疫疗法是指把自身或异体的具有抗肿瘤活性的免疫血清或免疫细胞转输到免疫功能低下的肿瘤患者，在体内发挥抗肿瘤作用，以此到达治疗肿瘤的目的。淋巴因子激活的杀伤细胞〔LAK〕肿瘤浸润性淋巴细胞〔TIL〕LAK细胞的制备和应用肿瘤患者

全血细胞（淋巴细胞）加IL-2，培养、扩增过继性输注抗肿瘤淋巴细胞加IL-2培养、扩增的淋巴细胞Before

AfterTreatmentofmelanomawithLAKcellsandIL-2淋巴因子激活的杀伤细胞小鼠脾脏细胞或人外周血淋巴细胞在体外培养中，经高浓度的细胞因子〔主要为IL-2〕诱导后发生扩增，产生一类能非特异性地杀伤自身和异体肿瘤细胞的效应细胞，称为淋巴因子激活的杀伤细胞〔lymphokineactivatedkillercell〕,简称LAK细胞。

LAK细胞是一群异质性的细胞群，主要来源于外周血淋巴细胞，其表型既可是CD3＋细胞，也可是CD3－细胞，往往具有NK细胞样标记〔CD16和CD56〕，其杀伤肿瘤细胞不需要抗原致敏，亦无MHC约束性。TIL细胞的制备和应用肿瘤患者肿瘤切除

肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)加IL-2反复培养ELISA测刺激后IFN-

水平用IL-2及抗CD3单抗克隆扩增TIL过继性输注抗肿瘤淋巴细胞阳性克隆治疗前以化疗作非髓系淋巴细胞清除BeforeAfterTreatmentofMelanomaswithTIL+IL-2肿瘤浸润性淋巴细胞〔tumor-infiltrationlymphocytes,TIL〕嵌合抗原受体(CAT)Examplesoftumorantigensthathavebeentargetedbymonoclonalantibodiesintherapeutictrials.抗体导向疗法人源化抗体前药活性药物肿瘤细胞酶mAb-核素结合物mAb-蓖麻毒素结合物双特异性抗体（抗肿瘤/抗CD16）NK细胞人源性Fc段嵌合抗体免疫细胞因子（IL-2）肿瘤细胞双特异性抗体（抗肿瘤/抗CD3）T细胞CD16CD3A．制备抗肿瘤的抗体与效应分子〔毒蛋白、化疗药物或放射性同位素〕偶联物，利用抗体特异性识别肿瘤抗原作用，使效应分子有效地到达肿瘤部位，选择性杀伤肿瘤细胞。B.双特异性抗体中包含着两种不同识别特异性抗原的Fab段，通过特异结合肿瘤抗原同时结合不同效应细胞和分子，到达有效杀伤肿瘤的作用。抗体偶联物/双特异性抗体的抗肿瘤作用机制双特异性抗体抗体偶联物Mechanismsoftumourcellkillingbyantibodies.a|Directtumourcellkillingcanbeelicitedbyreceptoragonistactivity,suchasanantibodybindingtoatumourcellsurfacereceptorandactivatingit,leadingtoapoptosis(representedbythemitochondrion).Itcanalsobemediatedbyreceptorantagonistactivity,suchasanantibodybindingtoacellsurfacereceptorandblockingdimerization,kinaseactivationanddownstreamsignalling,leadingtoreducedproliferationandapoptosis.Anantibodybindingtoanenzymecanleadtoneutralization,signallingabrogationandcelldeath,andconjugatedantibodiescanbeusedtodeliverapayload(suchasadrug,toxin,smallinterferingRNAorradioisotope)toatumourcell.b|Immune-mediatedtumourcellkillingcanbecarriedoutbytheinductionofphagocytosis;complementactivation;antibody-dependentcellularcytotoxicity(ADCC);geneticallymodifiedTcellsbeingtargetedtothetumourbysingle-chainvariablefragment(scFv);Tcellsbeingactivatedbyantibody-mediatedcross-presentationofantigentodendriticcells;andinhibitionofTcellinhibitoryreceptors,suchascytotoxicTlymphocyte-associatedantigen4(CTLA4).c|Vascularandstromalcellablationcanbeinducedbyvasculaturereceptorantagonismorligandtrapping(notshown);stromalcellinhibition;deliveryofatoxintostromalcells;anddeliveryofatoxintothevasculature.MAC,membraneattackcomplex;MHC,majorhistocompatibilitycomplex;NK,naturalkiller.Antibodytherapyofcancer.NATUREREVIEWS.CANCERVOLUME12APRIL2021Strategiestoinactivateand/ordepleteCD4+CD25+Tregcellsincancer.BasedonthecurrentlyavailableevidenceinfavourofTreg-mediatedsuppressionofanti-tumorT-cellresponses,severalstrategiestoinactivateand/ordepleteTregshavebeenevaluatedinpre-clinicalmodelsofcancer.ChemotherapeuticdrugssuchasCYandfludarabineinterferewithTregfunctions.AbdirectedagainstAgassignedtoTregcells(CD25,GITR,CTLA-4,CD4)depleteand/orfunctionallyinhibitTregs,thuscontributingtotherapeuticefficacyofconcomitantlyadminis