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文档简介

高中生物选修1高考考点解析

一、微生物的培养和分离

1、培养基

(1)培养基的分类:

①按物理性质分:培养基可分为液体培养基和固体培养基。配置成液

体状态的基质,一般用于生产。在液体培养基中加入凝固剂琼脂后,制成

琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长,可以形成肉眼可见的菌

落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。

②按用途分为:选择培养基和鉴别培养基

(2)培养基的组成要素

各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种营养物质。满足

微生物生长还需要适宜的pH、氧气的要求(根据微生物的需求提供有氧或

无氧环境)、特殊营养物质等。

微生物的营养物质:水、无机盐、碳源、氮源及特殊营养物质五类。

①碳源:能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如C02、NaHC03等

无机碳源;糖类、蛋白质、脂肪等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳

源。单质碳不能作为碳源。

②氮源:能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、N03、

NH4、蛋白质、氨基酸等。只有固氮微生物才能利用N2。

③水:在生物体内含量很高,在低等生物体内含量更高。

④无机盐:为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素,包括大量元

素。

⑤特殊营养物质:生长必不可少的微量有机物。如维生素、氨基酸、

碱基等。

2、无菌技术

(1)消毒与灭菌的区别

消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部

分对人体有害的微生物(不包括芽抱和抱子)。消毒方法常用煮沸消毒法,

还有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、红外线消毒。1-+

灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽

抱和抱子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。

(2)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,要注意以下几

个方面:

①对实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。

②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。

③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进

行。

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

3、纯化大肠杆菌以及菌种的保藏

(1)制作牛肉膏蛋白陈固体培养基

方法步骤:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。

(2)纯化大肠杆菌

①原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的

菌落,这个菌落就是一个细胞繁殖而来的子细胞群体。

②方法:平板划线法、稀释涂布平板法。

(3)菌种的保藏

①短期保存:将菌种接种到试管的固体斜面培养基上4℃保存,菌种

易被污染或产生变异。

②长期保存:一20℃甘油管在冷冻箱中保藏。

4、壤中分解尿素的细菌的分离与计数

a、分离的原理

(1)土壤中的细菌之所以能够分解尿素,是因为它们体内能合成胭

酶。这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。

(2)实验室中微生物的筛选应用的原理:人为提供有利于目的菌株

生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。

b、统计菌落数目的方法:

稀释涂布平板法和显微镜直接计数。

c、细菌分离与计数的实验流程

土壤取样一样品稀释一取样涂布一微生物培养一观察并记录结果一

细菌计数

5、分解纤维素的微生物的分离

a、纤维素酶

纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶、

CX酶和葡萄糖昔酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维

二糖分解成葡萄糖。纤维素最终被水解成葡萄糖,为微生物的生2

长提供营养。

b、纤维素分解菌的筛选方法及原理

(1)方法:刚果红染色法。能够通过颜色反应直接对微生物进行筛

选。

(2)原理:

①刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和

水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。

②纤维素被纤维素酶分解后,刚果红一纤维素的复合物就无法形成,

培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样,我们就可以通过

是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

c、土壤中纤维素分解菌的筛选

土壤取样一选择培养(此步是否需要,应根据样品中目的菌株数量的

多少来确定)一梯度稀释一将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上一

挑选产生透明圈的菌落

二、培养基对微生物的选择作用

选择培养基是用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离

出来的培养基。根据不同种类微生物的特殊营养需求或对某种化学物质的

敏感性不同,在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质,抑制不需

要的微生物的生长,有利于所需微生物的生长。

一种类型选择培养基是依据某些微生物的特殊营养需求设计的,例如,

利用以纤维素或石蜡油作为唯一碳源的选择培养基,可以从混杂的微生物

群体中分离出能分解纤维素或石蜡油的微生物;利用以蛋白质作为唯一氮

源的选择培养基,可以分离产胞外蛋白酶的微生物;缺乏氮源的选择培养

基可用来分离自生固氮微生物。另一类选择培养基是在培养基中加入某种

化学物质,这种化学物质没有营养作用,对所需分离的微生物无害,但可

以抑制或杀死其他微生物,例如,在培养基中加人数滴10%酚可以抑制细

菌和霉菌的生长,从而由混杂的微生物群体中分离出放线菌;在培养墓中

加入亚硫酸铀,可以抑制革兰氏阳性细菌和绝大多数革兰氏阴性细菌的生

长,而革兰氏阴性的伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphi)可以在这种培养基上

生长;在培养基中加入染料亮绿(brilliantgreen)或结晶紫(crystalviolet),可

以抑制革兰氏阳性细菌的生长,从而达到分离革兰氏阴性细菌的目的;在

培养基中加入青霉素、四环素或链霉素,可以抑制细菌和放线菌生长,而

将酵母菌和霉菌分离出来;在培养基中加入7.5%NaCI,可将耐高浓度

NaCl的金黄色葡萄球菌分离出来;现代基因克隆技术中也常用选择培养基,

在筛选含有重组质粒的基因工程菌株过程中,利用质粒上具有的对某种(些)

抗生素的抗性选择标记,在培养基中加入相应抗生素,就能比较方便地淘

汰非重组菌株,以减少筛选目标菌株的工作量。

三、利用微生物发酵来生产特定的产物

酿酒,选用异养厌氧型(酒精发酵型)微生物,利用无氧呼吸,获取

代谢产物

2、制醋,选用醋酸杆菌(异养需氧型),在有氧条件下将酒精氧化成

醋酸

3

3、做腐乳选用霉菌(毛霉、根霉),利用毛霉或根霉中的淀粉酶和蛋

白酶将豆腐中的淀粉、蛋白质水解为糖、多肽和氨基酸。

4、做泡菜,选用乳酸菌(异养厌氧型)在密闭条件下,利用乳酸菌

的发酵作用,发酵产物乳酸不断积累,抑制其他菌的活动。

四、从生物材料中提取某些特定的成分

1、玫瑰精油的提取实验流程

加入NaCINaSO????一分离油层?加入无水?????一除水鲜玫瑰花+清水

(1:4)一水蒸气蒸储一油水混合物24

?过滤?T玫瑰油

2、橘皮精油的提取实验流程

石灰水浸泡橘皮一漂洗一压榨一过滤一静置一再次过滤一橘皮油。

3、胡萝卜素的提取实验流程

胡萝卜一粉碎一干燥一萃取一过滤一浓缩一胡萝卜素。

4、三中物质的提取方法及原理的比较

比较三种提取方法

4

五、植物组织培养的原理与基本过程

1、原理:细胞全能性。

2、基本过程:

(1)、菊花组织培养过程

(2)、月季花的花药培养

(3)、植物组织培养技术与花药培养技术有何区别?

相同之处:培养基的配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。

不同之处:花药培养的选材非常重要,需事先摸索时期适宜的花蕾;

花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基;花北培养对

培养基配方的要求更为严格。这些都使花药的培养难度加大。

3、影响植物组织培养的因素

(1)、外植体的选取:生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化

和再分化。

(2)、培养基:

配制:要严格的进行灭菌;营养:矿质元素和有机物;调节剂:生长

素、细胞分裂素及其比例。

(3)、环境条件:温度、PH、光照等。

4、植物激素在组织培养过程中的重要作用

生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素,

其作用及特点为:

六、运用发酵技术加工食品的基本方法

1、与传统发酵有关的几类微生物的比较

5

2、果酒、果醋、腐乳及泡菜的制作原理及过程

6

七、DNA的粗提取与鉴定

1、实验原理:DNA与杂质的溶解度不同,在不同浓度的NaCI溶液中

溶解度不同,在0.14mol/l的NaCI溶液中溶解度最低。

2、实验设计:

①实验材料的选取:凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但是使用

DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大。

②破碎细胞:动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细

胞液中加入一定量的蒸储水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。

③去除滤液中的杂质:利用DNA在不同浓度NaCI溶液中溶解度不同,

控制NaCI溶液的浓度去除杂质。④DNA的析出:将处理后的溶液过滤,

加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液,静置2〜3min,溶液中会出现白

色丝状物,这就是粗提取的DNAo用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,

并用滤纸吸取上面的水分。

⑤DNA的鉴定:取两支20ml的试管,各加入物质的量浓度为2moi/L

的NaCI溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状

物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后,将

试管置于沸水中

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