免疫学-酶联免疫法理论知识考核试卷

免疫学-酶联免疫法理论知识考核试卷1.酶免疫分析中，HRP、ALP的名称是______，______。HRP、ALP的底物是（英语简称）______、______。空1答案：辣根过氧化物酶空2答案：碱性磷酸酶空3答案：TMB空4答案：PNPP2.（1）HRP催化（中文简称）TMB______，显示______色，终止反应时加入______，显示______色，测定波长为______nm。（2）ALP催化（中文简称）PNPP______，显示______色，终止反应时加入______，测定波长为______nm。空1答案：四甲基联苯胺空2答案：蓝空3答案：酸空4答案：黄空5答案：450空6答案：对硝酸苯磷酸酯空7答案：黄色空8答案：碱空9答案：4053.HRP：（1）酶联免疫中，HRP的主酶、辅酶的最高吸收峰分别是______nm、______nm空1答案：275空2答案：403（2）衡量酶的质量标准是______，RZ：λ403/λ275nm。——高纯度的HRP，RZ值>______空1答案：纯度值空2答案：3.0(3)HRP标记抗原或抗体，最常用的方法是{改良过碘酸钠法}对(正确答案)错（4）HPR的重要性：它是目前ELISA应用______标记酶。空1答案：最多的4.（1）ELISA中最常用的固相载体是______。（2）酶免疫测定分为______酶免疫测定、______酶免疫测定。空1答案：聚苯乙烯空2答案：均相空3答案：非均相（2.1）分类依据（熟悉）——是否需要分离游离的、和与抗原（抗体）结合的酶标记物。()5.ELISA是目前在酶免疫技术中，发展最快、应用最广的技术。()6.ELISA中，双抗体夹心法测定对象______，双位点一步法，测定大分子______。竞争法一般多用于测定______。间接法、捕获法的测定对象是抗体______、______.空1答案：抗原空2答案：抗原空3答案：抗原空4答案：IgG空5答案：IgM双抗原夹心法常用于检测（HBsAb）抗体。对(正确答案)错7.（1）ELISA中，双抗体夹心法测定抗原，注意______带来的______结果影响；（2）双位点一步法测定大分子抗原，注意______带来的______结果影响，必要时稀释样本。空1答案：类风湿因子空2答案：假阳性空3答案：钩状效应空4答案：假阴性（3）竞争法多用于测定（小分子抗原或半抗原），颜色深浅与待测物含量称______比。空1答案：反（4）捕获法测定IgM，注意{类风湿因子}，带来的{假阳性}结果。对错(正确答案)8.荧光物质在某一特定波长处有（最大吸收峰），（最大发射峰）；分别可以用来设置______波长、______波长。空1答案：激发光空2答案：发射光9.（1）常见的荧光色素异硫氰酸荧光素（英语简写）______,它的发光颜色是______色，最大吸收光谱(490-495)nm、最大发射光谱(520-530）nm。（2）其他荧光物质：空1答案：FITC空2答案：黄绿(2.1)三价稀土镧系元素中，（铕的化学符号）______应用最广。空1答案：Eu3+(2.2)荧光底物如4-甲基伞酮-β-半乳糖苷，经{β-半乳糖苷酶}作用，分解成4-甲基伞酮后可发出荧光，激发光波长360nm，发射光波长450nm。对(正确答案)错10.荧光免疫显微技术，又称______、______。原理：（熟悉）采用荧光素标记抗体与标本片中组织或细胞抗原结合，洗涤除去游离的荧光抗体后，于显微镜下观察，呈现特异性荧光的抗原-抗体复合物及其存在部位，借此对组织细胞抗原进行定性和定位检测，或对自身抗体进行定性和滴度测定。空1答案：荧光抗体技术空2答案：荧光免疫组织化学技术11.荧光免疫显微技术中：直接法、间接法的优劣。直接法，检测未知抗原，操作简便快速、特异性高，但敏感性低，且一种荧光抗体只能检测一种抗原。()间接法，敏感性高、一种荧光二抗可以检测多种抗原抗体系统；特异性低。()12.时间分辨荧光免疫测定的英文简称______，常用______（或铕）元素标记抗原或抗体。空1答案：TRFIA空2答案：镧系13.荧光偏振免疫测定（FPIA），主要用于测定______的抗原物质，是临床药物浓度测定的______方法空1答案：小分子空2答案：首选14.荧光免疫技术包括荧光免疫显微技术、荧光免疫测定技术。荧光免疫显微技术，主要用于组织切片和其他标本中抗原定位。()荧光免疫测定，用于液体标本中抗原或抗体的测定，包括方法有TRFIA、FPIA。()15.化学发光与荧光的概念、区别。{区别：形成激发态分子的激发能不同。()化学发光：化学过程中产生的化学能。荧光：激发光源（荧光）}()16.（1）直接化学发光剂，不需要酶催化，直接参与发光，直接标记抗原或抗体。例如{吖啶酯}，在{碱性}条件下被H2O2氧化，发出470nm波长的光。（2）酶促反应的发光底物：需要标记酶的催化，发光剂（底物）才发光。常用的酶和底物。HRP的发光底物{鲁米诺}（碱性催化环境）、ALP的发光底物{金刚烷}（AMPPD）（碱性）。(3)电化学发光剂：三联吡啶钌（化学符号）______和电子供体三丙胺（英文简称）______，可直接标记抗原或抗体。空1答案：[Ru(bpy)2+]空2答案：TPA17.（1）直接化学发光免疫，用来标记抗原（或抗体）的发光剂是______。（中文名）（2）化学发光酶免疫分析，用HRP或ALP标记抗原（抗体），结合标本中抗体（抗原），洗涤，加入底物（发光剂），酶催化底物发光，光检测仪检测发光强度，通过标准曲线计算出待测物浓度。空1答案：吖啶酯（3）电化学发光免疫分析，以电化学发光剂______标记抗体（抗原），以______（TPA）位电子供体。空1答案：三联吡啶