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文档简介
第2节
动物细胞工程第2课时
动物细胞融合技术与单克隆抗体学习目标1.阐明动物细胞融合技术的概念,举例说出诱导动物细胞融合的方法。2.构建单克隆抗体的制备流程。3.说明单克隆抗体的特点及应用,认同单克隆抗体在临床上具有重要的应用价值。01基础落实·必备知识全过关02重难探究·能力素养全提升01基础落实·必备知识全过关知识点一
动物细胞融合技术1.
概念:使____________动物细胞结合形成__________的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的__________。两个或多个一个细胞遗传信息2.
诱导动物细胞融合的常用方法(1)
物理法:__________等。(2)
化学法:_____融合法等。(3)
生物法:__________诱导法等。电融合法
灭活病毒3.
意义:利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术,为________________开辟了新途径。制造单克隆抗体知识点二
单克隆抗体及其应用1.
传统抗体的制备向动物体内反复注射某种______,使之产生抗体从动物______中分离所需抗体抗原血清(2)
缺点:产量低、______低、________差。纯度特异性(1)
方法2.
单克隆抗体(1)
制备原理:一种B淋巴细胞只产生一种单一抗体,B淋巴细胞在体外不能无限增殖;骨髓瘤细胞能无限增殖;B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的____________,既能______________,又能产生特异性抗体。杂交瘤细胞
迅速大量增殖(2)
制备过程特定的抗原抗体小鼠腹腔内体外培养(3)
优点:能准确地识别抗原的细微差异,与__________发生特异性结合,并且可以大量制备。(4)
应用:①用作诊断试剂,在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。②用于治疗疾病和__________。特定抗原运载药物旁栏边角
想一想1.
[教材P49旁栏思考]19世纪30年代,科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象?_________________________________________________________提示
病人体内的病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。
提示
可以用放射性同位素标记单克隆抗体进行靶向放疗。一些作用于细胞信号转导通路的药物可以通过阻断肿瘤细胞的信号通路来抑制其生长,理论上也可以将这些药物与单克隆抗体结合进行治疗。3.
[教材P51拓展应用]假如你掌握了动物细胞融合技术,你想用这种技术来解决哪些问题?解决这些问题的大致思路是怎样的?这样做会有什么风险?_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
提示
可以利用动物细胞融合技术培育多倍体胚胎,研究其发育机制,甚至可能培育出新的物种。但是,目前相关技术还不成熟,存在融合率低、胚胎死亡率高等问题,并且还可能带来一些伦理方面的问题。结论语句
辨一辨(1)
与植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导方法是用灭活的病毒。(
)
√(2)
病毒灭活后并不破坏其抗原结构。
(
)
√(3)
二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞。
(
)
×(4)
B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后,得到的都是杂交瘤细胞。
(
)
×(5)
单克隆抗体制备过程中两次筛选的目的相同。
(
)
×
√02重难探究·能力素养全提升主题一
动物细胞融合情境探究科学家在培养动物细胞时加入失去活性的仙台病毒,发现能使两个动物细胞融合,产生具有两个核的细胞。研究表明,很多不同种的动物细胞都能进行融合,形成杂交细胞,如人—猴、人—鼠、鼠—兔、鼠—猴等。请讨论回答下列相关问题。1.
灭活病毒诱导动物细胞融合的原理是什么?_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________提示
病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。2.
为什么利用病毒诱导细胞融合前需要对病毒进行灭活处理?_____________________________________________________________________________________________________提示
避免病毒感染细胞。病毒灭活处理是利用物理、化学手段使病毒失去感染能力,但不破坏它们的抗原结构。3.
动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术的原理分别是什么?最终结果有什么不同?_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
提示
动物细胞融合技术的原理是细胞膜的流动性和细胞增殖;植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。动物细胞融合技术最终得到的是杂交细胞,而植物体细胞杂交技术最终得到的是杂种植株。方法突破
动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较比较项目动物细胞融合(单克隆抗体制备)植物体细胞杂交(番茄—马铃薯植株)过程正常小鼠的处理(注射特定的抗原)原生质体的制备(酶解法)动物细胞融合原生质体的融合杂交瘤细胞的筛选和培养杂种细胞的筛选和培养提纯单克隆抗体(特异性强、灵敏度高)杂种植株鉴定原理细胞膜的流动性、细胞增殖细胞膜的流动性、植物细胞的全能性融合前处理注射特定抗原,免疫处理正常小鼠酶解法去除细胞壁:纤维素酶、果胶酶续表诱导方法意义和用途(1)制备单克隆抗体(2)有助于疾病的诊断、治疗、预防(1)克服不同物种间远缘杂交的障碍(2)培育作物新品种续表视角应用视角1
动物细胞融合的原理和方法1.
动物细胞融合技术是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。下列关于动物细胞融合的叙述,错误的是(
)
CA.单克隆抗体制备的过程中需要进行动物细胞融合B.动物细胞融合的原理与植物组织培养的原理不同C.两个单倍体细胞融合后,形成的细胞中含有2个染色体组D.若将两种细胞放置于培养基中进行两两细胞融合,共有3种融合类型
视角2
动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较2.
下列对植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,描述正确的是(
)
DA.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同,诱导融合的方法也完全相同B.动物细胞培养可用于检测有毒物质,茎尖培养可用于植物抗病毒C.动物细胞融合后,可以通过体外适宜条件培养获得新物种D.动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基的物理性质不同[解析]
动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相似,诱导融合方法不完全相同,A项错误;动物细胞培养可以用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性,茎尖组织培养可用于植物脱除病毒,B项错误;动物细胞不能通过培养获得完整个体,C项错误;动物细胞培养使用液体培养基,植物组织培养一般要用固体培养基,D项正确。主题二
单克隆抗体及其应用情境探究
1.
B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经诱导融合后(只考虑细胞两两融合),培养基中共出现几种细胞?其中融合的细胞有几种?_________________________________________提示
共有5种细胞。其中融合的细胞有3种。2.
单克隆抗体制备过程中,两次筛选的目的和方法分别是什么?___________________________________________________________________________________________________________________________________________提示
第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞,方法是用选择培养基进行筛选。第二次筛选的目的是筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞,方法是抗体检测。3.
请根据资料1提出筛选出杂交瘤细胞的方法,并解释原因。_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
方法突破
单克隆抗体制备过程中两次筛选的区别项目第一次筛选第二次筛选筛选原因诱导融合后会得到多种杂交细胞,另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选方法用特定的选择培养基筛选:在该培养基上,未融合的亲本细胞和具有同种
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