21实验物质鉴定

原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。三、检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质1.还原糖的检测和观察选材制备组织样液颜色反应观察得结论1.还原糖的检测和观察苹果、梨等含糖量较高，颜色为白色或近于白色的植物组织还原糖：含有半缩醛羟基的糖类，主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。选材制备组织样液颜色反应观察得结论制浆1.还原糖的检测和观察过滤取液选材制备组织样液颜色反应观察得结论振荡混匀50～65℃水浴加热2min2mL组织样液刚配制的斐林试剂1mL呈现浅蓝色变成砖红色选材制备组织样液颜色反应观察得结论1.还原糖的检测和观察振荡混匀50～65℃水浴加热2min2mL组织样液刚配制的斐林试剂1mL呈现浅蓝色变成砖红色选材制备组织样液颜色反应观察得结论1.还原糖的检测和观察甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴加，或者久置后才用。振荡混匀50～65℃水浴加热2min2mL组织样液刚配制的斐林试剂1mL呈现浅蓝色变成砖红色选材制备组织样液颜色反应观察得结论1.还原糖的检测和观察甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴加，或者久置后才用。【斐林试剂】甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液，使用前等体积混合均匀，生成浅蓝色的Cu（OH）2悬浊液。Cu（OH）2与还原糖共热，能够生成砖红色沉淀Cu2O。需现配现用。（时间一长，Cu（OH）2

沉淀在溶液底部无法发生反应。）选材制备组织样液颜色反应观察得结论1.还原糖的检测和观察生成砖红色沉淀，说明组织样液中含有还原糖。浅蓝色

棕色

砖红色选材颜色反应观察得结论2.淀粉的检测和观察选材颜色反应观察得结论2.淀粉的检测和观察马铃薯匀浆选材颜色反应观察得结论2.淀粉的检测和观察选材颜色反应观察得结论2.淀粉的检测和观察依据淀粉遇碘液呈现蓝色，证明组织样液中含有淀粉。观察颜色变化马铃薯匀浆变成蓝色加入碘液方法一：直接染色3.脂肪的检测和观察步骤及现象：向待测组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液，有橘黄色（或红色）的颜色反应。结论：依据橘黄色（或红色）的颜色反应，证明待测组织样液中含有脂肪。3.脂肪的检测和观察方法二：制片观察取材制片观察结论切片3.脂肪的检测和观察方法二：制片观察取材制片观察结论花生种子浸泡3-4h,去掉种皮。切片3.脂肪的检测和观察方法二：制片观察取材制片观察结论用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片，放入盛有清水的培养皿中待用。切片3.脂肪的检测和观察方法二：制片观察取材制片观察结论切片选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央制成临时装片：用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精，滴1滴蒸馏水，盖上盖玻片，成临时装片。染色：在薄片上滴加23滴苏丹Ⅲ染液，染色23min（如用苏丹苏丹Ⅳ染色1min）洗去浮色：用吸水纸吸去染液，滴加体积分数为50%的酒精12滴。3.脂肪的检测和观察方法二：制片观察取材制片观察结论切片3.脂肪的检测和观察方法二：制片观察取材制片观察结论切片依据脂肪能被苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液染成橘黄色（红色），证明花生子叶细胞中含有脂肪。4.蛋白质的检测和观察选材制备组织样液颜色反应观察得结论4.蛋白质的检测和观察黄豆、鸡蛋清等富含蛋白质的实验材料。选材制备组织样液颜色反应观察得结论4.蛋白质的检测和观察选材制备组织样液颜色反应观察得结论鸡蛋清加水稀释蛋清稀释液黄豆

（浸泡1-2d）研磨豆浆过滤滤液4.蛋白质的检测和观察选材制备组织样液颜色反应观察得结论4.蛋白质的检测和观察选材制备组织样液颜色反应观察得结论【双缩脲试剂】：A液：0.1g/mLNaOH，B液：0.01g/mLCuSO4。先加A液后加B液，且B不能过量，不需要加热。4.蛋白质的检测和观察选材制备组织样液颜色反应观察得结论【双缩脲试剂】：A液：0.1g/mLNaOH，B液：0.01g/mLCuSO4。先加A液后加B液，且B不能过量，不需要加热。双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）在碱性环境（NaOH）中能和Cu2+作用生成紫色络合物，这个反应叫做双缩脲反应。蛋白质分子中含有的肽键结构与双缩脲结构相似，因此，蛋白质也可与双缩脲试剂发生颜色反应。4.蛋白质的检测和观察选材制备组织样液颜色反应观察得结论依据蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应，证明组织样液中有蛋白质。2ml组织样液加入2ml双缩脲试剂A液，摇匀3-4滴双缩脲试剂B液，摇匀斐林试剂与双缩脲试剂的不同点4、斐林试剂与双缩脲试剂的不同点

用途不同斐林试剂与双缩脲试剂的不同点

用途不同

斐林试剂用于可溶性还原糖的鉴定双缩脲试剂用于蛋白质的鉴定斐林试剂与双缩脲试剂的不同点4、斐林试剂与双缩脲试剂的不同点②

CuSO4溶液的浓度不同

用途不同

斐林试剂用于可溶性还原糖的鉴定双缩脲试剂用于蛋白质的鉴定斐林试剂与双缩脲试剂的不同点4、斐林试剂与双缩脲试剂的不同点②

CuSO4溶液的浓度不同

用途不同

斐林试剂用于可溶性还原糖的鉴定双缩脲试剂用于蛋白质的鉴定

在斐林试剂中CuSO4溶液质量浓度为0.05g/ml

在双缩脲试剂中CuSO4溶液质量浓度为0.01g/ml斐林试剂与双缩脲试剂的不同点4、斐林试剂与双缩脲试剂的不同点③使用方法不同②

CuSO4溶液的浓度不同

用途不同斐林试剂与双缩脲试剂的不同点4、斐林试剂与双缩脲试剂的不同点③使用方法不同

斐林试剂，NaOH溶液和CuSO4溶液混合后加入待检测的材料中，现用现配；双缩脲试剂，NaOH溶液和CuSO4溶液是先后加入的。②

CuSO4溶液的浓度不同

用途不同斐林试剂与双缩脲试剂的不同点4、斐林试剂与双缩脲试剂的不同点④使用原理不同③使用方法不同②

CuSO4溶液的浓度不同

用途不同斐林试剂与双缩脲试剂的不同点4、斐林试剂与双缩脲试剂的不同点④使用原理不同

斐林试剂参加反应的实质上是Cu(OH)2,

其中Cu(OH)2被还原为砖红色的Cu2O；双缩脲试剂实质上是碱性环境下的Cu2+起反应。③使用方法不同②

CuSO4溶液的浓度不同

用途不同斐林试剂与双缩脲试剂的不同点4、斐林试剂与双缩脲试剂的不同点④使用原理不同③使用方法不同②

CuSO4溶液的浓度不同

用途不同⑤颜色反应不同斐林试剂与双缩脲试剂的不同点4、斐林试剂与双缩脲试剂的不同点④使用原理不同

斐林试剂与还原糖发生作用，产生砖红色沉淀蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应③使用方法不同②

CuSO4溶液的浓度不同

用途不同⑤颜色反应不同斐林试剂与双缩脲试剂