多不饱和脂肪酸对后备公猪精液品质

四川农业大学本科毕业设计（论文）页四川农业大学本科生毕业论文（设计）论文题目：多不饱和脂肪酸比值对后备公猪精液品质的影响学院：动物科技学院专业：动物科学2010级2班指导老师：林燕姓名：陈嘉学号：20102042多不饱和脂肪酸比值对后备公猪精液品质的影响动物科技学院动物科学2010级陈嘉指导教师：林燕副研究员摘要：目的：本试验旨在探讨不同比例的ω-6和ω-3脂肪酸对后备公猪精液品质的影响，为实际生产提供一定的参考数据。方法：试验共设4个处理，选择L*LY后备种公猪32头，按体重随机分为4组，每组8个重复，每个重复一头猪。4个处理组分别是：正常日粮组（对照组）、处理一、处理二、处理三。试验分为15kg-40kg、40-60kg、60-80kg、80-100kg、100-120kg五个阶段，采用玉米-豆粕型基础日粮，对照组参照NRC（2012）进行配制。各阶段日粮中添加对照组（ω-6/ω-3=1：29）处理一（ω-6/ω-3=1：20）、处理二（ω-6/ω-3=1：1）处理三（ω-6/ω-3=20：1）相应比例的鱼油或葵花籽油。结果：比例为1:1的多不饱和脂肪酸饲粮能显著提高精子密度。结论：比例为1:1的多不饱和脂肪酸饲粮，可有效提高后备公猪精液的品质。关键词：多不饱和脂肪酸后备公猪性成熟精液品质ProportionofpolyunsaturatedfattyacidsaffectbackupboarsemenqualityMajor:AnimalScienceName:ChenJiaInstructor:ProfessorLinYanAbstract：Objective:Thisexperimentwastoinvestigatetheeffectofdifferentproportionofω-6andω-3fattyacidsonsemenqualityofboa，toprovidesomereferencedatafortheactualproduction。Methods:theexperimentconsistsof4processing,choosetheL*LYreservefor32barrows,wererandomlydividedinto4groups,eachgroupof8repeats,eachrepeatapig，4treatmentgroupswere:normaldietgroup(controlgroup),treatmentone,treatmenttwo,treatmentthree.Thetestisdividedinto15kg-40kg,40-60kg,60-80kg,80-100kg,100-120kginfivestages,thecornsoybeanmealbaseddiet,thecontrolgroupwaspreparedbyNRC(2012).Eachstageofdietarycontrolgroup(ω-6/ω-3=1:29)treatmentone(ω-6/ω-3=1:20)、treatmenttwo(ω-6/ω-3=1:1)、treatmentthree(ω-6/ω-3=20:1)thecorrespondingproportionoffishoilorsunfloweroil.Results:theproportionof1:1polyunsaturatedfattyaciddietcansignificantlyimprovethespermdensity。表340-60Kg日粮配方及营养水平原料含量（%）对照组处理一处理二处理三玉米67.0663.5263.5263.52豆粕20202020麦麸3333鱼粉3.53.53.53.5酵母蛋白3333葵花油02.851.510鱼油00.151.493小苏打食盐碳酸钙磷酸氢钙氯化胆碱LysMetThr维生素混合物矿物质混合物00000.250.250.250.250.330.30.270.271.91.951.951950.150.150.150.150.370.380.380.380.050.050.050.050.080.090.090.090.330.330.330.330.50.50.50.5合计100100100100营养水平Nutritionlevels粗蛋白CP(%)18.118.118.118.1代谢能(Mkal/kg)3.183.183.183.18赖氨酸Lys(%)1.061.061.061.06蛋氨酸Met(%)0.320.320.320.32钙Ca(%)0.810.810.810.81有效磷AP(%)0.600.600.600.60表460-80Kg日粮配方及营养水平原料含量（%）对照组处理一处理二处理三玉米67.3563.6563.6563.65豆粕23.424.224.224.2麦麸4444鱼粉1111葵花油02.7741.510鱼油00.2261.493食盐碳酸钙磷酸氢钙氯化胆碱LysMetThr维生素混合物矿物质混合物0.20.20.20.20.350.330.330.332.052.082.082.080.150.150.150.150.380.370.370.370.050.050.050.050.140.140.140.140.330.330.330.330.50.50.50.5合计100100100100营养水平Nutritionlevels粗蛋白CP(%)17.017.017.017.0代谢能(Mkal/kg)3.143.313.303.29赖氨酸Lys(%)1.011.011.011.01蛋氨酸Met(%)0.290.290.290.29钙Ca(%)0.760.760.760.76有效磷AP(%)0.560.560.560.56表580-100Kg日粮配方及营养水平原料含量（%）对照组处理一处理二处理三玉米70.1766.1966.1966.19豆粕2121.521.521.5麦麸44.54.54.5鱼粉1111葵花油02.7741.510鱼油00.2261.493食盐碳酸钙磷酸氢钙氯化胆碱LysMetThr维生素混合物矿物质混合物0.20.20.20.20.380.360.360.361.871.881.881.880.150.150.150.150.290.280.280.280.020.020.020.020.10.10.10.10.330.330.330.330.50.50.50.5合计100100100100营养水平Nutritionlevels粗蛋白CP(%)16.016.016.016.0代谢能(Mkal/kg)3.163.323.313.30赖氨酸Lys(%)0.890.890.890.89蛋氨酸Met(%)0.250.250.250.25钙Ca(%)0.720.720.720.72有效磷AP(%)0.530.530.530.53表6100-120Kg日粮配方及营养水平原料含量（%）对照组处理一处理二处理三玉米70.1466.6266.6268豆粕21.5222221麦麸4446鱼粉1111.5葵花油02.7741.510鱼油00.2261.490食盐碳酸钙磷酸氢钙氯化胆碱LysThr维生素混合物矿物质混合物0.20.20.20.20.410.390.3911.631.661.661.350.150.150.150.150.120.130.130.140.040.040.040.020.330.330.330.330.50.50.50.5合计100100100100营养水平Nutritionlevels粗蛋白CP(%)16.116.016.016.3代谢能(Mkal/kg)3.173.343.343.14赖氨酸Lys(%)0.770.790.790.80蛋氨酸Met(%)0.240.240.240.24钙Ca(%)0.680.680.680.87有效磷AP(%)0.480.480.480.45矿物质混合物为每千克饲粮提供Fe165mg,Cu16mg,Zn165mg,Mn30mg,Se0.3mg,Cr0.3mg,I0.3mg。维生素混合物为每千克饲粮提供VA17500IU,VD35000IU,VE37.50IU,VK3500mg,VB1500mg,VB22500mg,VB6750mg,VB125mg,烟酸5000mg,叶酸250mg,D-泛酸钙2500mg,生物素20mg,抗氧化剂10mg。2、4饲养管理试验场地在川农动物营养所实验农场进行，试验前对场地进行熏蒸消毒，保证场地的卫生条件，室内温度保持在20-25℃。试验期从15Kg种公猪饲喂到性成熟（约110kg,7月龄），70kg前自由采食，70kg-120kg阶段，采用限制饲养，按其体重2％～2.5％执行，每天早晚饲喂两次料（共2.5Kg）,试验期间自由饮水，按时喂料，做好保暖防寒工作，定期进行粪污清理、消毒以及免疫程序。3、指标测定及方法3.1精液采集7月龄性成熟后进行采精的调教，进行首次精液的采集保存，记录采精前后时间，射精反应时间等，用套有4-5层无菌纱布的保温杯采集公猪精液之后将过滤掉胶状物质的精液保存至37℃，测量精液的品质。之后将精液置于4℃、1800r/min的离心机处离心20分钟，将精子和精浆分离置于-20℃进一步分析。调教后每周进行2次采精，共采8次。3.2精液常规品质分析精液量、精子活力、精子密度和精子畸形率4项精液常规性状参照世界卫生组织标准(WHO)的方法测定，方法如下：3.3精液量采精用带刻度的集精杯(500mL)进行，精液经4层纱布过滤去除胶体等杂质为每次精液量每头猪采精完成之后立刻读取刻度，记录数据，精确到1mL。3.4精子活力精液过滤后立即在显微镜下观察精子活力，采用百分制法，直线前进精子数占总精子数的百分比为精子活力。3.5精子密度利用722型分光光度计，在波长440nm下快速测定公猪精液吸光度值(蒸馏水作为空白)，用南京源诚科技公司生产的Macro精子计数板，查出对应精液吸光度值的精子密度。3.6精子畸形率采用龙胆紫酒精溶液染色法，将精子涂片染色，在400×显微镜下观察，计算不同视野500个精子中畸形精子占比例即为畸形率(取3次计算的平均值)。3.7数据统计分析所有的数据先用Excel进行初步数据统计分析，再采用SPSS20.0统计软件进行单因数方差分析(ANOVA)，差异显著性以Duncan法进行多重比较，以P<0.05为差异显著水平判断。结果与分析4.1实验结果各处理间精液量差异不显著；对照组、处理一、处理二和处理三的精子活力相互间差异不显著；对照组和处理三精子的密度极显著低于处理二精子的密度且处理一的精子密度与对照组、处理二、处理三的差异不显著；对照组、处理一、处理二和处理三精子的畸形率相互间差异不显著;精子中ω-6和ω-3脂肪酸各处理间差异不显著；精子中脂肪酸(ω-6/ω-3)处理一和处理二极显著高与处理二,处理二与处理三差异极显著。组别表3精液品质组别指标对照组处理一处理二处理三精液量151.37±34.95148.50±13.59183.28±18.92199.96±51.76精子活力76.10±1.9676.81±2.8877.51±4.6472.50±3.65精子密度2.31±0.24b2.80±0.17ab2.96±0.22a2.20±0.47b精子畸形率7.41±3.025.06±1.464.53±2.596.29±1.34组别表4精子中脂肪酸组别指标对照组处理一处理二处理三ω-60.13±0.020.25±0.110.19±0.150.15±0.05ω-30.62±0.101.20±0.511.17±0.201.18±0.39ω-6/ω-30.20±0.01a0.21±0.02a0.16±0.00b0.13±0.00c4.2实验分析由表3可以看出饲粮中添加不同比例的多不饱和脂肪酸，对后备公猪的精液量、精子活力、精子畸形率的影响不大；饲粮中添加等比例的ω-3多不饱和脂肪酸与ω-6多不饱和脂肪酸，使后备公猪精子密度显著升高，从而提升精子质量，然而其他比例多不饱和脂肪酸对后备公猪精子密度影响不大；虽然饲粮中添加不同比例的ω-3多不饱和脂肪酸与ω-6多不饱和脂肪酸，对后备公猪精液品质影响不大，但是我可以看出精液品质随ω-3多不饱和脂肪酸与ω-6多不饱和脂肪酸比例趋于相同的时候品质最好。表4中可以看出ω-6多不饱和脂肪酸与ω-3多不饱和脂肪酸的比例的不同对精子中脂肪酸的含量的影响是极显著的，由于饲粮中脂肪酸可以很有效地转化到猪精子中[14]，且PUFA可促进动物精子的成熟[15]，当ω-6多不饱和脂肪酸与ω-3多不饱和脂肪酸的比例不平衡时DHA和DPA的含量也将不平衡，最终导致精子的发育不良，密度降低。5、结论含相同比例的多不饱和脂肪酸的饲粮，可有效提高后备公猪精液的品质，有利于提高精子的利用率；高比例的n-3多不饱和脂肪酸和高比例的n-6多不饱和脂肪对后备公猪精液品质影响不大。参考文献[1]于昱.袁缨．多不饱和脂肪酸的营养研究[J]．中国饲料，2003，24：2l～23．[2]许娥.夏先林．多不饱和脂肪酸在反刍动物饲养中的应用研究概述[J]．贵州畜牧兽医。2004，28(3)：14～16．[3]覃健萍．曹永长.毕英佐．类同醇激素免疫在调控畜禽繁殖和生长中的应用[J]．中国家禽学报，2004，8(1)：206～208．[4]MaldjianA,PizziF，GliozziT，eta1．ChangesinspermqualityandlipidCompositionduringcryopreservationofboarsemen[J]．Theriogenology，2005，63：411～421．[5]WangXJ;DysonMT;MondilloCInteractionbetweenarachidonicacidandcAMPsignalingpathwaysenhancessteroidogenesisandStARgeneexpressioninMA-10Leydigtumorcells2002(1/2)[6]KimJY;KinoshitaM;OshnishiMLipidandfattyacidanalysisoffreshandfrozen-thawedimmatureandinvitromaturedbovineoocytes[外文期刊]2001(1)[7]AlvarezJG，StoreyBT．Differentialincorporationoffattyacidsintoandperoxidativelossoffattyacidsfromphospholipidsofhu—manspermatozoa[J]．MolReprodDev，1995．42：334～336．[8]高进东，毛军福，黎艳．前列腺素的作用机理及其应用[J]．兽医导刊，2007，1：27～28．[9]RookeJA，ShaoCC，SpeakeBK．Theeffectoffeedingtunaoiluponporcinespermatozoalipid’andfattya