化学检验工(高级)第一章 分光光度法

化学检验工（高级）第一章分光光度法分光光度法是根据物质对不同波长的单色光的吸收程度不同而对物质进行定性和定量的分析方法。分光光度法光是一种电磁波：

1）波动性波长λ、频率v、光速c、波数(cm-1)等参数。

2)粒子性(光量子)E=hv1.1光的性质1.物质的颜色1.2物质对光的选择性吸收远紫外近紫外可见10~200nm200~400nm400~760nm互补色：蓝－黄、绿－紫红、红－青物质呈现的颜色是其反射光的颜色，也是其吸收光的互补色。（）1.如果把适当颜色的两种光按一定强度比例混合，也可成为白光，这两种颜色的光称为互补色光，如绿色光与紫红色光互补。（）2.当一束白光通过KMnO4溶液时，该溶液选择性地吸收了绿色光，所以KMnO4溶液呈现紫红色。（）3.透光物质不吸收任何光，黑色物质吸收所有光。1.2物质对光的选择性吸收

2.吸收曲线1.2物质对光的选择性吸收λmax=525nm34605005405800.51.0波长/nm吸光度AKMnO4溶液(不同浓度)的吸收曲线121.同一物质对不同波长的光吸光度不同。2.不同浓度同一物质，吸收曲线相似。3.不同物质，吸收曲线不同。1.吸收峰的长移和短移长移：吸收峰向长波移动的现象，红移。短移：吸收峰向短波移动的现象，紫移。增强效应：吸收强度增强的现象。减弱效应：吸收强度减弱的现象。2.发色团和助色团发色团：具有π轨道的不饱和官能团。－C=O、－N=N－、－C≡C－助色团：本身不“生色”，但能使生色团生色效应增强的官能团。－OH、－NH2、－SH、－Cl

1.3紫外-可见吸收光谱It1.4光吸收基本定律—朗伯比尔定律I0透光率(T%)=It/I0吸光度(A)=

－lgT=

Kbcbc()1.朗伯－比耳定律的应用条件：一是必须使用单色光；二是吸收发生在均匀的介质；三是吸收过程中，吸收物质相互不发生作用。()2.有色物质的吸光度A是透光度的倒数。()3.在分光光度分析中，入射光强度与透射光强度之比称为吸光度，吸光度的倒数的对数为透光率。()4.有色溶液的吸光度为0，其透光率也为0。1.4光吸收基本定律—朗伯比尔定律

×××吸光系数K物理意义：吸光物质在单位浓度、单位厚度时的吸光度。1.5吸光系数1.质量吸光系数

c单位g/L，b单位cm，K单位L·g-1·cm-1A=Kbc2.摩尔吸光系数

c单位mol/L，b单位cm，ε单位L·mol-1·cm-1A=εbc1.5吸光系数摩尔吸光系数ε意义：1）吸光物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数。2）不随浓度c和光程长度b的改变而改变。3）可作为定性鉴定的参数。4）同一物质在不同波长下的ε值不同。1.5吸光系数（

）2.一遵守朗伯－比耳定律的溶液，吸收池厚度不变，测得透光度为40%，如果该溶液浓度增加1倍，则该溶液的透光度为A.20%B.32%C.80%D.16%（

）1.某有色溶液，当用1cm吸收池时，其透光率为T，若改用2cm吸收池，则透光率应为

A.2TB.2lgTC.D.T2DD1.吸收定律本身的局限性简答题：朗伯比耳定律为什么只有在稀溶液中才能成立？由于在高浓度时(c>0.01mol/L)，吸收质点之间的平均距离缩小到一定程度，邻近质点彼此的电荷分布都会相互受到影响，此影响能改变它们对特定辐射的吸收能力，相互影响程度取决于c，因此，此现象可导致A与c线性关系发生偏差。1.6引起偏离朗伯比耳定律的因素2.化学因素3.仪器因素(非单色光的影响)4.其他光学因素1.6引起偏离朗伯比耳定律的因素1.7分光光度计光源单色器吸收池检测器信号指示1.紫外-可见分光光度计主要部件1)光源钨灯或碘钨灯340-2500nm氢灯或氘灯160-375nm1.7分光光度计2)单色器色散元件：棱镜、光栅。3)吸收池4)检测器光电管、光电倍增管5)信号检测系统2.分光光度计的类型1.7分光光度计1)单光束分光光度计3)双波长分光光度计2)双光束分光光度计光谱比较法1.8定性及定量分析方法1.定性分析2.定量分析1)标准曲线法2)直接比较法A标=Kbc标A样=Kbc样1.8定性及定量分析方法3)差示分光光度法采用已知浓度的成分与待测溶液相同的溶液作参比溶液。高吸光度差示法低吸光度差示法极限精密差示法1.影响显色反应的因素及反应条件的选择1.9显色反应条件和测量条件的选择(1)显色剂的选择1)选择性好2)灵敏度高3)有色化合物稳定、组成恒定4)有色化合物与显色剂的颜色差别大1.9显色反应条件和测量条件的选择(2)影响反应的因素及反应条件1)显色剂的用量2)溶液的酸度3)显色时间4)显色温度5)溶剂6)溶液中共存离子的干扰1.9显色反应条件和测量条件的选择2.分光光度法测量误差及实验条件的选择(1)测量误差及A选择范围控制溶液的c及b使A在0.2~0.7范围内。(2)测量波长选择(3)狭缝宽度(4)空白溶液的选择溶剂空白、试剂空白、试样空白、平行操作空白()1.如果显色剂有色，则要求有色化合物与显色剂之间的颜色差别要大，以减小试剂空白值，提高测定的灵敏度。通常把两种有色物质最大吸收波长之差称为“对比度”。一般要求显色剂与有色化合物的对比度在∆λ60nm以上。1.9