DB6101T158-2020种鸡场戊型肝炎（HEV）净化技术规范

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DB6101西 安 市 地 方 标 准DB6101/T158—2020种鸡场戊型肝炎（HEV）净化技术规范20202020111220201212西安市市场监督管理局发布DB6101/T158DB6101/T158—2020DB6101/T158DB6101/T158—2020目 次前 言 II范围 1规范性用文件 1术语和义 1检测要求 1出壳鸡胎粪检测与汰 1育雏期的检与淘汰 2开产的检测淘汰 2留种的检测处理 2饲养管理 3饲养式 3出雏理 35.4无害处理 35.4无害处理 3净化标准 3病原检测 3血清检测 3附录A（规性）场群内体监测样数量 4I前 言本文件按照GB/T1草。本文件由西安市市场监督管理局提出。本文件由西安市农业农村局归口。本文件起草单位：西安市动物疫病预防控制中心、西北农林科技大学、西安秦岭野生动物园、西安瑞尔康农牧有限公司、咸阳康大农牧业有限公司、西安市长安区万缘养殖专业合作社。本文件由西安市动物疫病预防控制中心负责解释。本文件为首次发布。单位：西安市动物疫病预防控制中心。地址：西安市长安南路138号。邮编：710061联系方式位：西安市动物疫病预防控制中心。地址：西安市长安南路138号。邮编：710061联系方式I种鸡场戊型肝炎（HEV）净化技术规范范围本文件规定了种鸡场戊型肝炎(HEV)净化技术的术语和定义、检测、饲养管理、净化标准等要求。本文件适用于种鸡场戊型肝炎(HEV)净化。（适用于本文件。GB13078饲料卫生标准GB/T14926.52实验动物酶联免疫吸附实验GB/T36195畜禽粪便无害化处理技术规范NY/T388畜禽场环境质量标准NY/T1167畜禽场环境质量及卫生控制规范NY/T5038NY/T5038NY/T5339病死及病害动物无害化处理技术规范农医发[2017]25号3术语和定义本文件没有界定的术语和定义。4检测要求样品的收集1.5mL0.5mL磷酸盐缓冲液（PBS，0.01mol/mL，pH7.4）将装有胎粪的离心管在涡旋震荡仪上充分震荡混匀，采用TRIzol法提取粪便样品中的总RNA。在RT-nPCR扩增过程中使用SuperscriptII反转录酶，以5µLcDNA产物作为第1轮PCR扩增的模板。两次PCR均使用TranstaqHighFidelityDNA聚合酶，PCR终产物用1%的琼脂糖凝胶电泳检测。检测后处理14.1.4操作要求在育雏结束前10dGB/T14926.50ORF2ELISAHEVIgGRT-nPCRRT-nPCR检测后处理ELISA用一次性注射器。母鸡的检测用一次性注射器。母鸡的检测开产前2周左右，每栋鸡舍通过统计学计算选取一定数量的鸡只，采样数量见附录A，采集粪便，对其进行RT-nPCR检测，若检测结果为阳性，则判定该母鸡为禽戊型肝炎病毒阳性鸡。公鸡的检测每栋鸡舍通过统计学计算选取一定数量的公鸡，采样数量见附录A，采集粪便，对其进行RT-nPCR检测，若检测结果为阳性，则判定该公鸡为禽戊型肝炎病毒阳性鸡。母鸡的检测检测方法参见4.1.2。公鸡的检测检测方法参见4.1.2。24.4.3检测后的处理引进种鸡时，应要求出具禽戊型肝炎净化证明和其他相关的检疫合格证或按照NY/T5339的要求进RT-nPCR饲养管理饲养方式出雏管理按照同只母鸡后代的全同胞进行装袋落盘。出雏执行严格隔离，品系之间、家系之间不交叉。卫生消毒30min并对出雏器、出雏盘进行清洗和喷雾消毒，再用甲醛熏蒸30min。5.4无害化处理（30min并对出雏器、出雏盘进行清洗和喷雾消毒，再用甲醛熏蒸30min。5.4无害化处理（发[2017]25号）6净化标准病原学检测原种场全部为阴性，祖代场和父母代场阳性率低于1%。血清学检测原种场全部为阴性，祖代场和父母代场阳性率不能高于10%。3附录A（规范性附录）场群内个体监测抽样数量表A.1给出了场群内个体检测抽样数量。表A.1场群内个体监测抽样数量场/群存栏数（只）抽样数量（只）可接受误差5%6%7%8%9%10%503733302624211005949423630261507259484034292008265534336302509070564537313009573584638323501007659473932400103786048393245010680614939335001098162494033550111826350403360011383645040336501158464504133700116856551413375011786655141348001188665514134850119876651413490012087665141349501218866524134100012288665241341100123896752423412001258967524234130012590675242341400126906853423415001279168534234160012891685342341