药物分析课件

第一章药典概况与药检工作返回主目录基本要求一、中国药典的内容与进展二、主要国外药典简介三、药品检验工作的机构和基本程序练习与思考基本要求

一、掌握中国药典的基本内容。二、熟悉药品检验工作的基本程序。三、了解常用的国外药典。返回

一、中国药典的内容与进展《中国药典》2000年版；1月出版；7月1日执行中药材一部中药成方制剂本版药典分为化学药品抗生素二部生化药品放射性药品生物制品中国药典的内容凡例:解释和使用药典的指导原则正文:具体品种的质量标准附录：共16部分索引：中文、英文中国药典配套使用的相关书籍：①《临床用药须知》②《药品红外光谱集》③《中药彩色图集》④《中药薄层彩色图集》⑤《中国药品通用名》

名称及编排;标准规定;

生物制品;

检验方法和限度;残留溶剂;

标准品、对照品；试药；试液；共28条款

计量；指示剂；动物实验；

精确度；包装、标签(一)凡例

中文药名：照《中国药品通用名称》命名

名称及编排

英文药名：采用国际非专利药品命名原则(INN)

有机药物化学名：采用《有机化学命名原则》检验方法和限度

检验方法:

采用其他方法时，应与药典方法作比较试验，在仲裁时，应以药典方法为准。

限度：原料药含量(%)，一般按重量计；如规定上限为100%时，是指药典方法可达到的数值，其上限<101.1%。

标准品、对照品与试药的区别

标准品：是指用于生物鉴定、抗生素或生化药品中含量测定或效价测定的标准物质，按效价单位计，以国家标准品进行标定。

对照品：是指用于检测时，按干燥品计算后使用的标准品。计量单位：长度(m,cm,mm,nm);体积(L,ml);重量(kg,g…);压力(Pa,kPa,Mpa);黏度；波数

精确度：

称取：0.1g,指0.06-014g;2g,指1.5-2.5g;2.0g指1.95-2.05g

取样精密度与准确度称定：指所称取重量的百分之一精密称定：指所称取重量的千分之一精密量取：指量体积移液管的精密度

“约”若干：指不超过规定量的±10%（二）正文

为所收载药品或制剂的质量标准

基本内容有：品名；结构式；分子式与分子量；来源或化学名;含量或效价规定；处方；制法；

[形状][鉴别][检查][含量测定][类别][贮藏][制剂]

请看教科书苯巴比妥的示例P7

（三）附录

制剂通则；生物制剂通则；

1.主要内容

通用检测方法；生物检测法；

试药和试纸；溶液配制；原子量表制剂通则有：片剂；注射剂等21种，均有规定检查项目。

2.内容举例

通用检测方法有：一般鉴别方法；分光光度法色谱法；一般杂质检查等。试液、指示剂、标准溶液的配制与标定等。（四）索引

中文索引：按汉语拼音顺序排列

英文索引：按英文字母顺序排列1.药典凡例和正文部分的增修订2.药典附录的增修订3.系列标准及配套丛书：《中国药典》英文和电子版；《中国药品通用名称》《药品红外光谱集》《临床用药须知》《药典增补本》（五）2000年版中国药典进展返回

二、主要国外药典简介

（一）美国药典

(TheUnitesStatesPharmacopoeia,USP)

美国国家处方集(TheNationalFormulary,

NF)

现行的美国药典为USP(25)-NF(20),自USP(24)-NF(19)合一

1.凡例

分为十九项

（1）法定名称和法定品种：药典收载的药品名称均为法定名称

（2）有效数字和允许偏差

有效数字：药典中规定的限度，最后一位是有效的。如用数字表示，应包括上限------所有中间数值------下限。

允许偏差：得到的分析结果，必须与药典规定的限度比较后，才能判断是否符合规定。

具体规则：只考虑结果小数最后一位右边的一个数字，如这个数小于5，则舍去，前一位不变；如这个数大于5或等于5，则舍去，前一位数加1。

例如某杂质限量“≤0.0002%”,测得结果为“0.00025%”则判为不符合规定;再如某含量限度为“≥98.0%”,测得结果为“97.96%”,按上述规则舍入后得98.0%,则符合。(3)药典论坛:有药典预览;对药典修订的建议;术语;临时修订通告;法定参考标准等栏目.增补本:凡例新增项目,是指定期出版的药品质量标准原文等对照试剂:凡例新增项目,是指供USP某些检查和鉴定专用试剂USP参比标准品:作为药典检查和鉴定用的参比标准品;为

RS(7)检查及检定：药典“凡例”此次增加“其他杂质”内容2.正文

USP(25)-NF(20)收载药物品种数居世界第一

原料标准内容为：英文名、结构式、分子式、分子量、化学名与CA登记号、含量限度、包装与贮藏、USP参考标准、鉴别、物理常数、检查、含量测定。

制剂标准内容：英文名、含量限度、包装与贮藏、USP参考标准、鉴别、检查、含量测定。3.附录:

检查和含量测定的一般要求

所用仪器

一般检查和检定微生物试验共六类生物试验和含量测定化学试验和含量测定物理试验和测定以及一般信息

每一类中有包含数项，各不相等。（二）英国药典（BritishPharmacopoeiaBP)BP(2000)

本版分为

一卷：有凡例、正文；正文品种多为原料药

二卷：有凡例、正文、附录；正文品种为药物制剂血液制品、免疫制品、放射性药物制剂和糖类药物；欧洲药典品种；附有红外参考光谱；增补内容和索引。

一部分：说明本版与欧洲药典品种

1.凡例二部分：适用于BP正文和附录，共有31条，与Ch.P类同。三部分：为欧洲药典凡例，内容较第二部分丰富。

2.正文收载品种为2663个，1361个来源与欧洲药典（第3版），其他与USP、Ch.P类同。

3.附录共分24类，每类按内容分,分别分类，如第2类为光谱法有：UV/Vi、IR、FLu、NMR、Mss、AAs、X-射线衍射法；第3类为色谱法有：TLC、PC、GC、HPLC及电泳法。

（二）日本药局方（目前为第十四改正版，缩写为JP）

第一部有：通则、制剂总则、一般试验方法和各医药品。

本版分其中列出27种剂型；一般试验方法类同Ch.P.第二部有：通则、生药总则、制剂总则、一般试验方法和各医药品；原子量表、附录和索引。原料药及其制剂的正文内容类同《中国药典》、USP与BP。

第一部和第二部后面都附有红外光谱图

返回

国家级药品检验所-中检所

药品检验工作机构设置省级药品检验所市、县级级药品检验所

药品检验工作的基本内容三、药品检验工作的机构和基本程序

取样性状-外观检查药检工作的基本程序鉴别-真伪鉴别检查-纯度检查含量测定-有效成分测定写出检验报告

原料药的检验药物制剂的检验药品检验工作的基本内容中药制剂的检验生化药物的检验医院药房制剂的检验

1.原料药的检验

（1）取样科学性

要求三性代表性真实性

Ｘ≤３时，逐件取样具体做法：（Ｘ为总件数）3＜Ｘ≤３Ｘ1/2+1件Ｘ＞3001/2Ｘ1/2+1件（2）性状外观形状-晶形、色泽、味道等检查内容在空气中的稳定性物理常数-溶解度、熔点和沸点、比旋度（3）鉴别化学反应：产生颜色、生成沉淀等常用的方法光谱法：UV、IR

色普法：TLC、HPLC、GC（4）检查有效性检查均一性检查一般杂质检查检查内容纯度检查---

安全性检查特殊杂质检查（5）含量测定化学分析常用的测定方法仪器分析生物测定法（6）检验报告药品名称,规格,批号,数量,来源检验报告的内容检验的目的、检验的依据取样(送检)日期,报告日期原始记录应有试验者、复核者和负责人的签名检验报告对外单位还需加盖检验单位的公章2.药物制剂的检验（1）性状制剂的剂型、外观形状、色泽、内部状态（2）鉴别注意附加成分的干扰，要求采用专属性强、选择性好的鉴别方法，首选为色谱法。（3）检查药品均一度检查：片重差异，均匀度常规性检查有效性检查：溶出度、释放度检查安全性检查：注射液无菌、热源检查（4）含量测定1)含量的表示方法:相当于标示量%=2)含量限度:大剂量为标示量的95～105%小剂量为标示量的90～110%3)含量测定方法:多采用UV、HPLC法测的每片量标示量×100%

3.中药制剂的检验中药制剂的样品一般需经过提取、纯化预处理（1）鉴别试验中药制剂一般不要求对所有药味鉴别，应遵循处方原则先鉴别君药与臣药、贵重药与毒药显微鉴别法常用的鉴别方法化学鉴别法色谱鉴别法、光谱鉴别法

（2）检查

中药制剂检查项目不同于化学药品及其制剂水分、灰分、酸不溶性灰分中药制剂常规检查项目砷盐、重金属农药残留量（有机氯和磷）

（3）含量测定

化学成分众多中药制剂的特点药效多为多种化学成分的协同作用测定有活性的主要化学成分的含量首选的方法是HPLC法

含量测定方法测定成分具有光谱特性可用光谱法测定成分具有化学特性可用化学法（4）指纹图谱是指同时记录中药制剂中所含各类化学成分的图谱，一般是HPLC图谱。具体要求：具有稳定的指纹图谱，其含量在一定百分数以上的各类化学成分均应有相对稳定的色谱信号。返回练习与思考[A型题]1．我国药典名称的正确写法应该是

A．中国药典B．中国药品标准（2000年版）C．中华人民共和国药典

D．中华人民共和国药典（2000年版）E．药典2．我国药典的英文缩写

A．BPB．CPC．JPD．ChPE．NF3．英国国家处方集的缩写是A．USPB．PDGC．BNFD．CAE．USN4．药品的鉴别是证明A．未知药物的真伪B．已知药物的真伪C．已知药物的疗效D．药物的纯度E．药物的稳定性5．测定土霉素的效价时，需要

A．化学试剂（CP）B．分析试剂（AR）C．对照品D．标准物质E．标准品6．中国药典（2000年版）规定称取2.0g药物时，系指称取

A．2.0gB．2.1gC．1.9gD．1.95g～2.05gE．1.9g～2.1g7．中国药典（2000年版）规定称取0.1g药物时，系指称取

A．0.15gB．0.095gC．0.11gD．0.095g～0.15gE．0.06g～0.14g[B型题]1～4

A．ChPB．USPC．JPD．BPE．NF1．美国药典2．英国药典3．日本药局方4．美国国家处方集BDCE5～8

A．附录B．正文C．凡例D．通则E．一般信息5．药品的质量标准应处在药典的6．对溶解度的解释应处在药典的7．通用检测方法应处在药典的8．制剂通则BCAA[X型题]1．检验报告应有以下内容

A．供试品名称B．外观性状C．检验结果、结论

D．送检人盖章E．报告的日期基本要求

一、掌握一般鉴别试验的原理。二、熟悉一般鉴别试验的基本方法。三、了解一般鉴别试验的条件和灵敏度。返回

它是药检工作的首药检工作中的首先项任务，只有在药物鉴别无误的情况下，才能进行药物的杂质检查、含量测定。药物鉴别试验是用来证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所表示的药物，而不是对未知物进行定性分析，因为这些鉴别试验虽有一定的专属性，但不具备进行未知无确证的条件，故不能鉴别未知物。

一、药物鉴别试验的意义与目的返回二、药物鉴别的项目药物的鉴别试验包括：性状和鉴别（一）性状（definition)聚集状态、晶形

外观色泽臭、味:、

极易溶：1份溶质在不到1份溶剂中溶解易溶：1份溶质在1份~不到10份溶剂中溶解溶解:1份溶质在10份~不到30份溶剂中溶解

溶解度略溶:1份溶质在30份~不到100份溶剂中溶解微溶:…..在100份~不到1000份溶剂中溶解极微溶解:在1000份~不到10000份溶剂中溶解几乎不溶或不溶：…10000份溶剂中不完全溶

物理常数:

相对密度、馏程、熔点、比旋度、吸收系数、折光率、黏度、酸值、碘值、皂化值、羟值

第一法：测定易碎的固体药品熔点第二法：测定不易碎的固体药品（脂肪酸、石蜡等）

第三法：测定凡士林或其他类似的物质比旋度：指在一定波长下，偏振光透过1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度。可用于鉴别药物、检查药物的纯度和含量测定。[n]TD=100α/dL摩尔吸收系数ε=A/CL吸收系数百分吸收系数（Ch.P收载的方法）E1%1cm=A/CL

（二）一般鉴别试验（generalidentificationtest）

是指依据药物的化学结构或理化特性，通过化学反应类鉴别药物的真伪。ChP附录中有：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟类、无机金属类（Na,K,Li,Ca,Ba,Fe.,Al,Zn,Cu,Ag,Hg等）、有机酸盐类（水杨酸盐）、无酸盐类。

1.有机氟化物有机氟氧瓶燃烧无机氟离子pH4.3

茜素氟蓝硝酸亚铈蓝紫色络合物2.有机酸盐(1)水杨酸水杨酸+FeCl3中性条件弱酸性条件红色配位化合物紫色配位化合物(2)酒石酸盐供试品溶液（中性）+氨制硝酸银水浴中

银镜3.芳香第一胺类供试品+稀盐酸亚硝酸钠碱性-萘酚试液红色到猩红色4.托烷生物碱类

此类生物碱中具有莨菪酸结构，有Vitali反应,显紫色。

5.无机金属盐（Na,K,Ca)

焰色反应：Na显鲜黄色；K显紫色；Ca显砖红色

铵盐：

供试品+NaOH

氨臭使湿润的红色石蕊试纸变蓝使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色6.无机酸根氯化物：Cl-+Ag+AgCl乳白色

硫酸盐：SO42-+Ba2+BaSO4

白色（三）专属鉴别试验(specificidentificationtest)

是证实某一种药物的依据，是根据每一种药物的化学结构的差异或理化性质的不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。返回三、鉴别方法（一）化学鉴别法

三氯化铁呈色反应(Ar-OH,Ar-OCOCH3)

异羟戊酸铁反应(Ar-COOH;-COOR)

1.显色反应鉴别法茚三酮呈色反应(脂肪氨基，α－氨基酸）重氮化-偶合呈色反应(Ar-NH2;-NHCOR)氧化还原显色反应及其它颜色反应与金属离子的沉淀反应

2.沉淀生成鉴别法与硫氰化铬铵的沉淀反应其它沉淀反应(如生物碱沉淀剂）

药物本身在可见光下发射荧光药物溶液加硫酸后在可见光下发射荧光3.荧光反应鉴别法药物与溴反应后，在可见光下发出荧光药物与间苯二酚溴反应后，发射出荧光药物其它反应后，发射出荧光

制备衍生物：药物＋试剂具有荧光的衍生物

胺类、酰脲类、酰胺类药物经强碱处理生成氨气(NH3；NH(C2H5)2)含硫药物经强酸处理后，加热，生成硫

4.气体生成反应鉴别法化氢气体(H2S+Pb2+PbS+2H+)含碘有机药物，加热。生成紫色碘蒸汽含醋酸酯和乙酰胺类药物酸水解后，加乙醇可产生乙酸乙酯制备衍生物测定熔点法

药物＋试剂新化合物有一定mp;药物酸化或碱化生成游离酸或碱。操作繁琐费时间，应用较少。（二）光谱鉴别法

测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长规定浓度的供试液在最大吸收波长测定吸收度1.紫外光谱鉴别法规定吸收波长和吸收系数法规定吸收波长和吸收度比值法经化学处理后,测定其反应产物吸收光谱特性

压片法2.红外光谱鉴别法糊法膜法溶液法

TLC法（Rf样＝Rf对）

3.色谱鉴别法

PC法

HPLC法（tR样＝tR对）

GC法

4.生物学法

是利用微生物或实验动物鉴别法仪器鉴别方法增加快（2：1）

UV,IR,HPLC(USP),TLC,PC(BP)

5.药物鉴别方法新动向

制剂广泛采用IR法鉴别

鉴别方法简练，专属性强平均每个品种收载2个鉴别反应返回四、鉴别试验条件（一）溶液的浓度

溶液的浓度主要指被鉴别物质的浓度，其大小影响结果的判断。（如化学法中要观察沉淀、颜色；UV法中λmax,A,E1%1cm)（二）溶液的温度

温度过高可使产物分解，导致颜色变浅，甚至观察不到结果。

（三）溶液的酸碱度

试反应物处于活化状态、反应产物处于稳定和以观察状态。

（四）试验时间

有机化合物的化学反应较慢，需要一定的反应时间和条件。

（五）干扰成分的存在

药物制剂的鉴别，其它成分则会干扰检查结果的现象观察。

返回

（一）反应灵敏度和空白试验

反应灵敏度（sensitivity)

是指在一的条件下，能在尽可能稀的溶液中观察出尽可能少量的供试品，反应对这一要求所能满足的程度。

最低检出量（minimumdetectablequantity)

是指某一反应，在一定的条件下，能观察出的供试品的最小量。

最低检出浓度（minimumdetectableconcentration)

空白试验：是指在与供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供试品外，其它试剂均同样加入而进行的试验。

五、鉴别试验的灵敏度（二）提高反应灵敏度方法

1.加入与水不混溶的有机溶剂提取浓集2.改变观测方法返回基本要求一、掌握一般杂质检查的原理、方法和计算。二、熟悉特殊杂质检查的方法和原理。三、了解热分析在药物分析中的应用。返回一、药物的纯度要求1．药物纯度的概念：药物的纯度是指药物的纯洁程度。2.药物纯度的要求是不断提高：

例如：度冷丁1948年收入BP，1970年经GC分离鉴定出两种无效异构体（Ⅱ）和（Ⅲ），有时高达20%～30%。再如：ASA中除了SA外，还存在乙酰水酸酐、乙酰水杨酰水杨酸等SA的衍生物，具有致敏作用。第一节概述

3．药物纯度的评价：

应把药物的性状、理化常数、杂质检查、含量测定等作为一个有联系的整体来评价药物的纯度。二、杂质的来源与种类了解药物中的杂质的来源和种类，可制定出检查的项目和方法杂质的概念药物中存在的无治疗作用，影响药物的疗效和稳定性，甚至对人体健康有害的物质，称为药物的杂质。（一）杂质的来源有两个方面：一是在生产过程中引入；二是在贮藏过程中引入。1.生产过程中引入的杂质主要指药物在合成过程中，未反应的原料、中间体和副产物例如：药用NaCl的Br-、I-、SO42-、K+、Ca2+、Mg2+、Fe3+ASA中的SA；地西泮中的去甲安定；吗啡中的罂粟碱再如制剂中生成的杂质：ASA片、栓剂中SA的检查；盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇的检查。

生产过程中残留有机溶剂、酸性或碱性杂质的检查。

药物中无效、低效异构体或晶型的检查例如：无味氯霉素存在A、B晶型，其中B为有效，A为低效。苯甲咪唑有A，B，C三种晶型；20%；40%～60%；90%

2.贮藏过程引入的杂质主要指外界条件的变化或微生物的作用可能发生的水解、氧化、异构化、晶型转化、聚合等变化，而产生的有关杂质。如：ASA水解生成SA和醋酸；阿托品水解生成莨菪醇和莨菪酸；麻醉乙醚氧化为醛和有毒的过氧化物。（二）杂质的种类与分类

按杂质的来源分为一般杂质和特殊杂质；按性质可分为信号杂质和有害杂质。一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质。特殊杂质是指在个别药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质。信号杂质一般无害，但其含量的多少可以反映出药物的纯度水平，氯化物、硫酸盐等就属于信号杂质。有害杂质，如重金属、砷盐、氰化物等，对人体有害，在药品标准中必须严格控制。

三、杂质的限量检查

1．杂质限量的概念药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。通常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示。

2．杂质限量的计算杂质限量的计算公式：杂质限量=杂质的最大允许量÷供试品的量×100%=标准液浓度×体积÷供试品的量×100%

L（%）=C×V/S×100%例1．对乙酰基酚中的氯化物的检查：已知：S=2.0g×25/100；C=10μg/ml；V=5.0ml

求：L=？

解：L=C×V/S×100%=10×5.0/2.0×106×25/100×100%=0.01%

例2．葡萄糖中重金属的检查：已知：S=4.0g；C=10μg/ml；L=5×10-6

求：V=？

解：V=L×S/C=5×10-6×4.0/10×10-6=2.0(ml)例3．葡萄糖中砷盐的检查：已知：V=2.0ml；C=1μg/ml；L=0.0004%

求：S=？

解：S=C×V/L=1×10-6×2.0/4×10-6=0.5(g)

例4．磷酸可待因中吗啡的检查：已知：V=5.0ml；C=0.02mg/ml；S=0.1g

求：L=？

解：L=C×V/S=5.0×0.02/0.1×1000×100%=0.1%

注意点①单位一致②稀释倍数③表示方法（%，mmp）返回第二节一般杂质的检查方法一、氯化物的检查1．原理：是利用氯化物在硝酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银的白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银混浊液比较，以判断供试品中氯化物是否超过限量。Cl-+Ag+AgCl

2．条件：

[Cl-]0.05mg～0.08mg/50ml,即相当于标准氯化钠溶液5ml～8ml。

酸度稀硝酸10ml/50ml。

温度30～40℃

3．干扰的排除

（1）供试品液混浊：可用含硝酸的蒸馏水洗净氯纸中氯化物后过滤来消除混浊对氯化物检查的干扰。

（2）供试品有色：可采用内消色法，按中国药典附录规定的方法处理。供试品+AgNO3放置10min澄清溶液+标准NaCl+水对照溶液供试品+AgNO3+水供试品溶液暗处放置5min后比较。二、硫酸盐检查法

1．原理

是利用SO42-在盐酸酸性溶液中与氯化钡试液作用，生成硫酸钡的白色浑浊液，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下生成的硫酸钡浑浊液比较，以判断供试品中硫酸盐是否超过限量。

2．条件：[SO42-]0.1mg～0.5mg/50ml,即相当于标准硫酸钾溶液1～5ml。

酸度稀盐酸2ml/50ml。3．干扰的排除供试品有色：可采用内消色法。

三、铁盐检查法（一）硫氰酸盐法1．原理

Fe3++6SCN-{Fe(SCN)6-]3-

红色2．条件：[Fe3+]0.01mg～0.05mg/50ml,即相当于标准铁溶液1～5ml。酸度稀盐酸4ml/50ml。

HCl

3．干扰的排除（1）当有Fe2+存在时，加氧化剂过硫酸铵氧化Fe2+成Fe3+。（2）当供试液管与对照溶液管色调不一致，或所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中，加正丁醇或异戊醇提取，分别取提取液比色。(二）巯基醋酸法

1.原理巯基醋酸还原Fe3+为Fe2+，在氨碱性试液中与Fe2

+

作用生成红色配位离子。2Fe3++2HSCH2COOH2Fe2++SCH2COOH+2H+

SCH2COOHFe2++2HSCH2COOHFe(SCH2COOH)2+H+Fe(SCH2COOH)2[Fe(SCH2COOH)2]2-+2H2O

2OH-2.说明

在加巯基醋酸溶液前，先加枸橼酸溶液，使其与铁离形成配位离子，以免在氨碱性溶液中产生氢氧化铁沉淀。（此法灵敏度比较高，但试剂较贵）四、重金属检查法重金属是指在实验室条件下与S2-作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品生产过程中遇到铅的机会比较多，铅在体内友易积蓄中毒，故检查时以铅作为代表。

中国药典（2000年版）重金属的检查法一共收载了四种方法

第一法为硫代乙酰胺法；第二法是将供试品在500~600℃在500炽灼破坏后，再按第一法检查；第三法是检查能溶入碱溶液，而不溶于酸溶液的药物，在碱性条件下用硫化钠作显色剂；第四法为微孔滤膜法，比较供试溶液和对照溶液铅斑的颜色，来判断供试品种的重金属是否超过限量。重点讨论第一法。

1．原理

CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2S合格＜H2S+Pb2+PbS+2H+

2．条件：[Pb2+]10µg～20µg/27ml,相当于标准铅溶液1～2ml。

酸度pH3.0～3.5.合格＜

pH3.53．干扰的排除

(1)供试品有色：可采用外消色法消除干扰。(2)供试品有微量Fe3+:在弱酸性溶液中氧化硫化氢析出硫，产生混浊影响比色，可加Vc或盐酸羟胺使Fe3+氧化成Fe2+离子再检查。

五、砷盐检查法

《中国药典》采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC）检查药物中的微量的砷盐。（一）古蔡法Gutzeit)(BP也采用此法）

1.原理As3++3Zn+3H+3Zn++AsH3

AsO33-+3Zn+9H+3Zn++3H2O+AsH3

AsO43-+4Zn+11H+4Zn++4H2O+AsH3AsH3+3HgBr23HBr+As(HgBr)3(棕色)2As(HgBr)3+AsH33AsH(HgBr)2(黄色)

As(HgBr)3+AsH33HBr+As2Hg3(棕黑色)2.装置与试剂作用

(1)验砷仪砷化氢发生瓶;中空磨口塞;导气管(2)试剂的作用合格＜①KI-SnCl2的作用：交替还原作用；首先将AsO43-还原成AsO33-，生成的碘再被还原成碘离子。

AsO43-+2I-+2H+

AsO33-+I2+H2O

AsO43-+Sn2++2H+AsO33-+Sn4++H2OI2+Sn2+2I-+Sn4+

4I-+Zn2+[ZnI4]2-

②Zn粒与氯化亚锡作用，在其面上形成Zn-Sn齐，起去极化作用。③Pb(AC)2棉的作用是消除供试品可能含有的少量的硫化物。S2-+2H+H2SH2S+HgBr22HBr+HgS（汞斑）H2S+Pb(AC)2PbS+2HAC

3.干扰的排除（1）供试品为S2-,SO32-,S2O32-等:因在酸中生成H2S,SO2,与HgBr作用生成HgS或Hg，干扰砷斑检查。用硝酸氧化成硫酸盐可消除。（2）供试品为Fe3+能消耗KI，SnCl2

应测定条件，先可加足量KI。

（3）含锑药物

锑盐被还原为SbH3与HgBr2试纸作用，产生灰色锑斑，干扰砷斑的检查，可改用Betterdorff法。（二）Ag-DDC法(二乙基二硫代氨基甲酸银，USP采用此法)

1.原理：是利用砷化氢与Ag-DDC吡啶溶液作用，使Ag-DDC中的银还原为红色胶态银，以Ag-DDC溶液为空白，于510nm的波长处，测定吸收度，供试品溶液的吸收度不得大于标准砷溶液的吸收度。2.试剂的作用：同古蔡法。六、溶液颜色检查法溶液颜色检查法是控制药物中有色杂质量的方法。中国药典（2000年版）收载有三种方法：K2Cr2O7黄、绿1.标准比色液进行比较的方法标准比色液CoCl2橙黄,橙红2.分光光度法CuSO4棕红3.色差计法通过测定供试品与标准比色液或水之间的色差值七、易炭化物检查法是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质。这类杂质多数结构未知，常采用与标准比色液比色的方法进行检查。(标准比色液为CoCl2,K2Cr2O7,CuSO4)

是检查药物中的微量不溶性杂质。常采用与浊度标准液比浊的方法进行检查。浊度标准液制备原理：(CH2)6N4+6H2O6HCHO+4NH3HCHO+H2N-NH2H2C=N-NH2+H2O

甲醛腙白色混浊

不同级号浊度标准液级号0.51234浊度标准原液（ml）2.55.010.030.050.0水（ml）97.595.090.070.050.0八、溶液澄清度检查法九、炽灼残渣检查法(residueonignition)BP称硫酸灰分（sulphatedash)是检查有机药物中混入的各种无机杂质。常采用重量方法进行检查。

残渣及坩埚重—坩埚重

残渣%=×100%

供试品重十、干燥失重检查法主要检查药物中的水分及其他挥发性的物质。常采用重量方法进行检查。常用的方法有四种：（一）常压恒温干燥法

（二）干燥剂干燥法

（三）

减压干燥法热重分析法（四）热分析法（thermoanalysis)

差示热分析差示扫描量热法1.热重分析法（thermogravimetricanalysis,TGA)

在程序升温下，测量物质的质量与温度的关系，研究物质在加热同时失重的情况下，所发生的质的变化，常用于药物稳定性的研究；贵重和易氧化药物的干燥失重测定。(长春碱)2.差示热分析（differentialthermlanalysis,DTA)

是在程序升温下，测量被测物质和参比物之间的温差与温度关系的一种技术。参比物是一种惰性物质，在加热过程中不发生相变和化学变化。因此温差(△T)只与被测物质的量质变化有关。△T=0被测物未发生吸热或放热反应;△T=-为吸热峰;△T=+为放热峰.测药的溶点

DTA在药物分析中应用尖峰为物理变化药物定性分析宽峰为化学变化估测药物的纯度3.差示扫描量热法(differentialscanningcalorimetry,DSC)是在程序升温下，测量维持样品和参比物的温度相同，系统所需供给样品随温差变化的能量的一种技术。DSC与DTA的不同之

处是记录方式不同，是记录系统供给的能量，吸热供给能量；放热减少供给的能量。在药物分析中应用与DTA相同。DSC-TG常联合用。十一、有机溶剂残留量测定法[ChP(1995)]主要检查药物在生产过程中引入的有害的有机溶剂(如苯、氯仿、二氯甲烷、吡啶、甲苯、环氧乙烷、二氧六环等）。常采用气相色谱法方法进行检查。常用的方法有二种：①直接进样法和②顶空进样法（试用于挥发性大的样品测定）。色谱系统性试验的要求：(1)N＞1000;(2)用内标法测定时，要求R＞1.5;(3)外标法测定时，待测物的峰面积的RSD＜10%。残留有机溶剂测定的方法和限量有机溶剂柱温（℃）内标物测定方法限量（%）二氧六环170吡啶1法0.038吡啶170二氧六环1法0.02苯170甲苯1法或2法0.0002甲苯170苯1法或2法0.089氯方140二氯甲烷1法或2法0.006二氯甲烷1401法或2法0.06环氧乙烷802法0.001返回第三节特殊杂质的检查方法

一、利用药物和杂质在物理性质上的差异（一）臭味及挥发性质的差异例如：黄凡士林中异性有机物检查：本品2.0g,直火加热无辛味。浓过氧化氢中不挥发性杂质检查：10ml水浴蒸干残渣＜15mg（二）颜色差异例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的检查：取本品2.0g，加NaOH试液10ml，加水25ml，与黄色3号比色液比，

不得更深。（三）溶解行为的差异例如：吡哌酸中碱中不溶物吡哌酸甲酯（I）和（II）检查（四）旋光性质的差异例如：硫酸阿托品中莨菪碱的检查：本品溶液(50mg/ml)α＜-0.4

（五）对光吸收性质的差异1.紫外分光光度法：例如:地蒽酚中二羟基蒽醌的检查再如：苯丙醇中苯丙酮的检查：可利用供试液的吸收度比来控制杂质;纯品苯丙醇A247nm/A258nm=0.59;99.5%时A247nm/A258nm=0.79;

因此规定供试品A247nm/A258nm＜0.79;即所含苯丙酮＜0.5%.2.原子吸收分光光度法：是通过测定药物中所含待测元素原子蒸气，吸收发自光源的该元素特定波长的程度，以求出药物中待测元素的含量。限量检查时：对照品液=供试品+限量-----a

供试品液=------------------

b

符合规定时b＜(a-b);b＞(a-b)不合格。3。红外分光光度法：

主要用于药物中无效或低效晶型检查，如甲苯咪唑中A晶型检查

A晶型C晶型在640cm-1有强吸收吸收很弱在662cm-1吸收很弱有强吸收662cm-1640cm-1662cm-1640cm-1供试品+10%A晶型D2D1

供试品D2D1＜10%

R=D1/D2＞R’=D’1/D’2

4.荧光分析法

3,4-二去氢利血平利血平中氧化产物检查：利血平(无荧光)(I)(黄绿色荧光)3,4,5,6-四去氢利血平(II)(蓝色荧光)(六)吸附或分配性的差异

1.薄层色谱法(TLC)(1)杂质对照品法例如:盐酸左旋咪唑中检查硅胶G2,3-二氢-6-苯基咪唑[2,1-b]噻唑盐苯:甲醇:冰HAC

样品

对招品。·····

(2)高低浓度对比品法例如:盐酸异丙嗪中有关物质的检查硅胶G有多个杂质而且结构不清样品10mg/ml;对照品(1)0.15mg/ml己烷:丙酮:乙胺(2)0.05mg/ml

样品液对(1)(2)

供试液杂质斑点不多于3个;杂质斑点与对照(2)的主斑点比较,不得更深;如有一点超过,应不深于对照液(2)的主斑点.......

....

...2.纸层析法(PC)

常用于极性大的药物的分离、分析，如地高辛中的有关杂质的检查。3.高效液相色谱法(HPLC)（1）峰面积归一化法：L%=∑Ai/(∑Ai+A主）×100%例如：利巴韦林中有关杂质的检查：对照品液(5μg/ml)进样10μl,调灵敏度，使主峰达满量程的20%～25%样品液(0.4mg/ml)进样10μl,杂质∑Ai＜(∑Ai+A主）的1.0%（2）不加校正因子主成分对照法

对照品液为供试品的稀释液进样测得A主

供试品液进样测得∑Ai

其∑Ai＜A主即为合格.

例如:甲硝唑中2-甲基-5-硝基咪唑:对照品液(0.01mg/ml)进样20μl,调灵敏度，使主峰达10%～30%样品液(0.14mg/ml)进样20μl,杂质∑Ai＜A主的1.0%.（3）内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量

对照品+内标进样求校正因子（f)=(As/Cs)/(AR/CR)

供试品+内标进样求A