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文档简介
学兔兔www.bzfxw.com标准下载ICS
11.220学兔兔www.bzfxw.com标准下载CCS
41 T/CVMA
129—2023
粒
Competitive
magnetic
particle
based
chemiluminescence
fordetecting
antibodies
against
3ABC
non-structural
protein
foot
andmouth
disease
virus 中国兽医协会 发
布学兔兔www.bzfxw.com标准下载T/CVMA
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《标准化工作导则
部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定冯肖肖。学兔兔www.bzfxw.com标准下载T/CVMA
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检测方法
本文件规定了口蹄疫病毒非结构蛋白抗体竞争磁微粒检测方法的试剂、仪器设备及耗
6682
541
5.1
25
5.2
5.3
5.4
5.5
12.5
50
200
800
1600
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1292023学兔兔www.bzfxw.com标准下载5.6
100U800U
5.7
30
180
300
5.8
;最小称量:100
1.5
——反应杯;——试剂船。
本方法使用磁微粒化学发光免疫分析法,采用竞争原理,将口蹄疫蛋白作为抗原偶联于抗体工作校准品建立校准曲线,将待检样本检测结果代入校准曲线计算非结构蛋白
8.1
样品采集按照
541进行。无菌注射器静脉采血,不少于
,用自然析出法分离血清后,置于无菌血清管中,按照
样品处理的生物安全措施、实验室
生物安全通用要求处理样本,若
℃冷藏。8.2
8.18000
1.5
300
检;若样品中存在沉淀或絮状物等杂质,应离心去除杂质,轻微操作,避免出现泡沫。8.3
25
66828.4
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1292023学兔兔www.bzfxw.com标准下载8.5
9.1
将口蹄疫病毒非结构蛋白抗体工作校准品~工作校准放入样本架,按照9.4进行检测标9.59.2
口蹄病毒结构体产校准产品准品入样架,校准线进 28d 9.3
a)
b) 24
9.4
免疫反应:取50
待测样本,15
磁微粒工作液、15
酶标抗体、60
μL稀释液,分别加入37
20
30s30030s
检测:加入化学发光底物100于清洗后的反应杯中,混匀30s悬浮磁微粒,反应分钟,
9.5
12.5U50
200
800
1600
0.99学兔兔www.bzfxw.com标准下载T/CVMA
1292023学兔兔www.bzfxw.com标准下载10
10.1
30
180
300
10.2
180U180U1.15
8.00
0.50
1.98
225.00
-20
1.15
8.00
0.20
0.50
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A.1
将表中的试剂依次加入烧杯中,加灭菌蒸馏水至600
,溶解,定容至1000
,置于
表A.1 A.2表A.1 将表600
1000
表A.2
A.3表A.2
按表600
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B.1
41~42℃
30~40
10
20%
行抗体检测,血清阻断率
应大于
70%,判为非结构蛋白抗体强阳性;按照
中液相阻
1:90B.2
校准品稀释液梯度稀释B.1
中非结构蛋白阻断方法进行抗体检测,计算检测结果,定义检测
50%时的血清为
100U,若此时稀释比例为
1:128
1:256
稀释血清为
50U。依次类推,最终选择
50
200
800
1600
36
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3ABC
C.1
3ABC
100U800U
36
C.2
3ABC
12.5
200
,用口蹄疫病毒非结构蛋白
管式化学发光免疫分析检测方法检测
次,计算平均值,质控范围为
。质控品36
2523969.55
3546596.17
1245251.68
2989450.90
637722.68
1942262.46
121241.23
278123.34
10564.17
34009.54
925.25
10497.75
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