广东引种厚叶沉香规范化种植技术及化学分析研究

广东引种厚叶沉香规范化种植技术及化学分析研究沉香来源于瑞香科沉香属植物的多个树种带香脂的心材,野生沉香已经日渐稀少,现多为人工栽培并诱导结香。沉香中具有一些特殊的芳香物质,能够作用于中枢神经系统,镇静安神,故而既可应用于医药,又可作为一种名贵的香料。沉香是时间和化学作用的产物,优质的沉香更是需要时间的沉淀,被称为“奇楠”,是人们“孜孜以求”的上品。白木香Aquilariasinensis(Lour.)Gilg是2015年版《中国药典》中规定的唯一品种,主要分布于我国南部地区,自然状态下难以结香,一般采用火烧、钻洞等方式诱导加速结香。而厚叶沉香AquilariacrassnaPierreexLecomte是我国进口沉香品种中较大量的一种,主要为野生资源,分布于老挝、泰国、缅甸、越南、柬埔寨等地,其在自然环境下较白木香更容易结香,随着市场上对沉香的需求量不断增加,厚叶沉香以其优质的香脂闻名而迅速占领市场,故从上世纪90年代末,我国南部沿海地区对厚叶沉香进行了引种并逐渐发展形成了大规模的种植基地。目前在我国广东、福建、浙江等沿海地区引种面积达10000多亩。然而,在引种A.crassna的过程中出现诸如种源不清、种植基地苗木管理混乱,产香质量参差不齐等一系列的问题,优质沉香的供应得不到保证。为了有效控制厚叶沉香的产香数量及质量,探索其发挥药效的物质基础,为厚叶沉香在国内的推广种植提供依据,对目前广东省的沉香种植技术成果进行验证并归纳总结,以建立一套适用于厚叶沉香的规范化生产标准,具有重要意义。目的:研究引种厚叶沉香在广东省的生长特性及厚叶沉香A.crassna的生物学特征以正本清源;对种植技术进行整理归纳,形成规范化栽培技术规程(SOP),以基地现有的厚叶沉香为对象,对幼苗多个指标进行测量和统计分析整理出其种苗质量分级参考标准;通过现代化学分析手段,对厚叶沉香的化学组成进行初步的研究,与白木香所产沉香的有效成分组成进行对比,探索其药用物质基础。方法:1.查阅大量国内外文献及与本研究相关的资料,总结前人研究成果与存在的问题,针对厚叶沉香种植管理方面研究不足及薄弱环节提出本论文的研究内容与目标。2.对汕头鹏华科技有限公司的15年以上的厚叶沉香树和沉香育苗基地进行了定点观察,厚叶沉香的生长表现、物候期观察,并运用性状、显微鉴别及薄层色谱法(TLC)对厚叶沉香植物及香脂进行鉴别。3.对种植基地实地调查并采访,了解种植中的关键技术并形成文字。运用主成分分析法对厚叶沉香种苗质量进行分级。4.参考2015年版《中国药典》及相关文献研究,利用高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱/质谱联用法(GC-MS)对收集到的13批厚叶沉香香脂样品进行化学成分的分析,并横向比较。结果:1.2016年汕头地区厚叶沉香花开放期(月.日)5.10-6.10,果期6.20-9.15,果实成熟期8.10-8.20。在性状特征上厚叶沉香每朵花序上的小花数为4-7朵,总花梗上有1片苞片,小花花梗长8.0~9.6mm,果实圆润而短。显微结构中,叶的栅栏组织厚55~82μm,偶见草酸钙柱晶镶嵌其中,茎粉末中仅含有单细胞非腺毛,纤维上具三角形及圆形纤维纹孔。2.形成了厚叶沉香规范化种植技术规程(SOP)。对2016厚叶沉香基地四月龄和一年生苗木分级结果:四月龄苗木:Ⅰ级苗:H≥12.83cm,D≥0.26cm;Ⅱ级:12.83cm﹥H≥11.22cm,0.26cm﹥D≥0.21cm;Ⅲ级苗:H﹤11.22cm,D﹤0.21cm。一年生苗木:Ⅰ级:H≥71.45cm,D≥1.06cm;Ⅱ级:71.45cm﹥H≥61.73cm,1.06cm﹥D≥0.81cm;H﹤61.73cm,D﹤0.81cm。3.厚叶沉香中总灰分含量在1.30%~4.54%之间,酸不溶性灰分含量在0.14%~1.16之间;醇溶性浸出物含量范围为3.31%~10.36%;醚溶性浸出物含量范围为0.95%~3.40%;沉香四醇含量范围在0.20%~3.71%,得到13批厚叶沉香的HPLC指纹共有模式图,GC-MS总离子流图共鉴定了43个化学成分,大部分为倍半萜类成分。结论:1.厚叶沉香植物物候期、生长期及性状、显微、香脂的薄层色谱等特征可以用来方便地区分厚叶沉香与其他沉香属植物。2.沉香的生产是个复杂的过程,种植是其中的关键技术之一,将引种厚叶沉香基地行之有效的种植技术进行整理总结,形成SOP,可以对生产沉香的源头进行统一的标准化管理。一年生厚叶沉香的分级标