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文档简介

第二十二章

免疫组织化学检验技术知识目标1.掌握：免疫组化技术的定义、基本过程、抗原的修复方法（重难点），抗体的选择和保存；酶标记抗体的免疫组化染色（直接、间接法）的原理，荧光免疫组化标本类型和保存。2.熟悉：免疫组化标本来源、固定于保存，结果判断；非标记酶免疫组化的常见类型及原理、亲和组织化学技术的定义及分类（重点）。3.了解：常见亲和组织化学技术的原理、优缺点及应用。能力目标掌握抗原的修复方法，免疫组化标本的采集、固定于保存、结果判断。思政-素质目标责任心、质控、生物安全意识、临床免疫学思维教学目标目录概述一免疫组化技术基本知识二酶免疫组织化学检验技术三荧光免疫组织化学检验技术四亲和组织化学检验技术五其他免疫组织化检验技术六

利用抗原抗体特异性结合的原理，先用荧光素标记已知抗体并以此作为探针，检查细胞或组织内的相应抗原，在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后，即会发出一定波长的荧光，进而对组织中的某种抗原进行定性、定位和定量分析。荧光免疫组织化学检验技术四一、标本制作

常见的临床标本材料主要有组织、细胞和细菌三大类，按不同标本性质可制作涂片、印片或组织切片等。（一）载玻片和盖玻片的处理载玻片和盖玻片要厚薄均匀、洁净及透光性好

（二）制片1．组织切片组织材料可制备成冰冻切片或石蜡切片。

2．印片组织材料也可制成印片。3．涂片细胞或细菌要制成涂片，涂片应薄且均匀。（三）标本的固定主要目的是：

1.防止细胞或切片从玻片上脱落

2.去除妨碍抗原抗体结合的类脂

3.便于保存。除活细胞外，其他标本应在染色前以适当的方式固定。

（四）标本片的保存固定好的标本片应尽快荧光染色检查，如需保存，置-20℃下低温干燥保存。二、荧光抗体标记及染色荧光抗体是荧光免疫技术的关键试剂，是将荧光素与特异性抗体通过共价键的方式结合而成。其制备过程通常包括抗体的标记、纯化和鉴定三步。在已固定的标本上滴加经适当稀释的荧光抗体，置于带盖的湿盒内，37℃温育30min。检测不耐热抗原以4℃过夜为宜。温育后充分洗涤、干燥、镜检。三、临床应用

1.在自身免疫性疾病中的应用

2.各种病原微生物的快速检查和鉴定

3.寄生虫感染的诊断

4.白细胞

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