27.3 单克隆丙种球蛋白病的检测方法讲解

第二十七章

免疫增殖病及检验教学目标知识目标掌握：免疫增殖病的概念，常见的单克隆丙种球蛋白病的临床免疫学特征、单克隆丙种球蛋白病的检测方法；熟悉：免疫增殖病的免疫损伤机制；了解：免疫增殖病的分类。能力目标学会Ig定量检测和分类鉴定方法；免疫电泳技术的原理和方法。思政素质目标责任心、耐心、质控意识、生物安全意识、诚信观念。免疫增殖病的概念和分类单克隆丙种球蛋白病的概念常见的单克隆丙种球蛋白病本周蛋白、M蛋白的概念单克隆丙种球蛋白病的检测本章要点概述一单克隆丙种球蛋白病的临床免疫学特征二单克隆丙种球蛋白病的检测方法三目录

血清蛋白区带电泳免疫球蛋白定量检测免疫球蛋白的分类鉴定本周蛋白检测冷球蛋白检测单克隆丙种球蛋白病的检测方法三一、血清蛋白区带电泳血清区带电泳是测定M蛋白的一种定性实验，常采用醋酸纤维素膜和琼脂糖电泳两种方法。

M蛋白在电泳时出现于

～

区代中，不同类型的M蛋白的电泳后所处位置。常采用醋酸纤维素膜和琼脂糖凝胶电泳两种方法：多克隆增殖血清区带电泳单克隆增殖血清区带电泳正常血清区带电泳肾病综合征血清区带电泳肝硬化血清区带电泳二、免疫球蛋白定量检测免疫球蛋白定量测定较常用的方法有单向扩散法与免疫比浊法，前者较为简便，后者更为准确迅速。恶性单克隆丙种球蛋白病常呈现某一类丙种球蛋白的显著增高。在良性丙种球蛋白病的血清标本中，M蛋白的升高幅度一般不象恶性丙种球蛋白病那么高三、免疫球蛋白的分类鉴定

免疫电泳免疫选择电泳免疫固定电泳免疫电泳：

免疫电泳是将琼脂糖电泳和免疫双向扩散相结合的一项技术。血清标本先行区带电泳分成区带，继而用特定的抗血清进行免疫扩散，阳性样本的M蛋白将在适当的部位形成异常沉淀弧，根据抗血清的种类、电泳位置及沉淀弧的形状可以对M蛋白作出判定。正常及某些患者免疫电泳图谱

上孔中为血清，下孔中为尿液，槽中为抗血清，箭头所指为骨髓瘤蛋白a：抗正常人血清；b：抗IgG血清；c：抗IgA血清；d：抗IgM血清e：抗κ血清；f：抗λ血清A：IgA/λ型骨髓瘤；B：IgG/κ型骨髓瘤；C：IgG重链病免疫选择电泳：

制备含抗κ或λ血清的薄层琼脂板，打孔并加入待测标本进行火箭电泳，待形成相应的火箭样沉淀峰后，于孔的两侧各挖一槽，加入抗某类免疫球蛋白血清或另一型抗轻链血清，温育扩散后，根据沉淀弧形成的情况，进行分析鉴定。免疫选择电泳图谱示意图

琼脂中含抗κ及抗λ抗血清，示例孔中为血清标本，槽中为抗IgA重链抗血清A：正常人；B：α重链病；C：IgA骨髓瘤免疫固定电泳：

免疫固定电泳是血清区带电泳与免疫沉淀反应相结合的定性实验。与免疫电泳比较免疫固定电泳具有更高的灵敏性，M蛋白在免疫固定电泳中显示狭窄而界限明确的区带，而多克隆增殖或正常血清

球蛋白区带则比较弥散。IgG/λ型多发性骨髓瘤的免疫固定电泳图谱IgG/

型和IgG/

型MM的免疫固定电泳图谱IgA/

型和IgA/

型MM的免疫固定电泳图谱根据免疫固定电泳不同泳道出现的异常条带，可对多发性骨髓瘤进一步鉴定和分型：四、本周蛋白检测3.直接定量分析尿液透析浓缩50倍后进行2.免疫固定电泳1.本周蛋白定性检查(筛查)溶解(+)90℃沉淀标本50℃~60℃五、冷球蛋白检测冷球蛋白是血清中的一种特殊蛋白质，在4℃时自发沉淀，加温至37℃时又可溶解，故常利用这种可逆性冷沉淀的特性对其进行测定。取患者外周血，分离出血清置4℃冰箱中，一般在24h～72h出现沉淀，若1周仍不出现沉淀者方可判断为阴性。如形成沉淀，再置37℃温育使其复溶，也可将冷沉淀物离心洗涤后做定性与定量分析异常免疫球蛋白检测的应用原则

凡检出无法解释的免疫球蛋白异常增高，都应建议做进一步的检查。初筛实验：区带电泳分析、免疫球蛋白定量检测或尿本-周蛋白定性。确证实验：免疫电泳、免疫固定电泳、免疫球蛋白亚型定量和血清及尿中轻链等检测。免疫增殖性疾病是指由于淋巴细胞发生恶性转化所导致的一组疾病。免疫球蛋白的多克隆增殖多为良性；单克隆增殖多呈恶性发展趋势。浆细胞异常增殖产生大量无正常功能及完整