30.2免疫学检验质控的特殊性讲解

第三十章

免疫学检验的质量控制

教学目标知识目标掌握：质量保证、室内质量控制、室间质量评价、cutoff值、标准品分类及其基本条件质控品、标准品、准确度、精密度，定量、半定量和定性免疫检验的方法类型；熟悉:室间质评的方式、评分及意义；了解：LIS在免疫学检验质控中的作用。能力目标学会常用免疫学检验统计质控图类型、结果判断及失控处理程序。思政素质目标责任心、质控意识、诚信观念。掌握免疫学检验质量控制的相关概念。掌握标准品的分类及基本条件。掌握定量、半定量和定性免疫检验的方法类型熟悉室间质量评价的方式、评分及意义。学会常用的免疫学质控图类型、结果判断及失控的处理程序。熟练实验室确定人群中Cutoff值的主要方法本章要点一二免疫学实验常用评价指标三四五六目录免疫学检验质量控制的概念免疫学检验质量控制的特殊性室内质量控制室间质量评价实验室质量控制数据的管理和信息系统第二节免疫检验质量控制的特殊性免疫学检验方法的种类较多，其测定方法的灵敏度和特异性要比生化方法高得多，因此进行质量控制的手段不能照搬生化模式。免疫检验质量控制包括定量、半定量和定性免疫检验三种类型。标准品（standard）

指含量明确的处于一定基质中其特性明确的物质，通常用于比较检测未知的物质或成分。标准品质量的优劣

直接影响样品的测定结果。一、标准品（一）标准品的概念和分类根据标准品性质的差异，可分为三级：一级标准品二级标准品

三级标准品为冻干品，内含载体蛋白，数量有限，可使用10~20年。通常为国际标准品，由WHO指定的实验室制备即国家标准品，是由国家的有关权威机构制备，供国家内部使用，其效价单位与国际标准品一致由二级标准品的比对而来的，通常由实验室自己或试剂生产厂家制备。

标准品IU/支建立的年份Mg/IU类风湿关节炎血清10019650.1710抗核抗体血清(均质型)10019700.1860人血清IgG、IgA、IgM10019700.1847人血清IgD10019710.8100人血清IgE1150019730.06562人AFP10000019750.001399人CEA10019750.0236FITC—绵羊抗人Ig10019760.0594FITC—绵羊抗人IgMμ链10019780.0447血清蛋白(白蛋白、α1-抗胰蛋白酶、C3铜蓝蛋白、转铁蛋白)10019781.1140人补体成分(C4、C5、Clq、B因子)10019801.1070FITC—绵羊抗人IgGγ链10019810.0923过氧化物酶标记绵羊抗人Ig10019820.0316抗RNP抗体-1983-平滑肌抗体-1983-线粒体抗体-1983-免疫学检验质控常用国际标准品（二）理想标准品的基本条件在规定保存条件下具有良好的稳定性通常为含蛋白质的缓冲液，对测定结果无明显影响。无已知传染危险性，对已知的血液传播病原体必须做灭活处理。标准品的基本条件标准品浓度在方法的测定范围即可。标准品浓度在方法的测定范围即可。定量免疫检验通常需要使用全自动免疫分析仪，在测定时须用校准品对仪器进行校准。室内质控则应选择特定试剂盒或方法的测定范围内的高、中和低三种浓度的质控品，以监测不同浓度标本测定结果的变化。二、定量、半定量和定性免疫检验（一）定量免疫检验半定量实验在免疫检验中比较少用，此类实验主要有酶免疫试验、荧光免疫试验等，测定结果通常以抗体的滴度、效价等表示。半定量免疫检验质控要点在于在有阴性质控的前提下，采用多个相应滴度或效价的抗体作为室内质控品，与临床标本同时测定。（二）半定量免疫检验定性免疫检验是免疫学检验的重点，其测定方法有很多，常以“有”或“无”也即“阳性”或“阴性”来表达测定结果。定性测定的室内质控要点是控制测定下限，设置临界cutoff值（CO值）的低值弱阳性质控物是定性室内质控的关键。应选择靶抗原或抗体浓度接近试剂盒或方法的测定下限的质控品进行室内质量控制，并与临床标本的测定同时进行，这一点对于使用肉眼判定测定结果的方法尤为重要（三）定性实验三、检测试剂的批间差异利用可靠的定值血清对购入的试剂盒进行性能检测和批间差异评价，只有质量符合实验质量要求的试剂盒方可用于临床实际检测工作。不同厂家

不同批号

产品的质量、技术含量的区别

原料来源、纯度不同以及生产条件变动地区储存、运输条件不同同一批号

引起试剂盒批间变异原因是多方面的：

1、试剂盒的原材料是依靠生物工程技术生产的，生产技术要求难度大，工艺提纯方法不好掌握，质量控制要求较高，产品质量不易稳定，使每批原材料的纯度和活性都有所差别；

2、用不同的提纯方法及不同批号的抗原或抗体所制备的试剂质量不一样；

3、同一批号的原料，不同组装工艺，其结果也不尽一样；

4、组装工艺相同，质量标准控制稍有欠缺，其结果也会有所差异。生产技术难度大

质量控制要求较高每批原材料的纯度和活性都有所差别

引起试剂盒批间变异原因是多方面的提纯方法不好掌握产品质量不易稳定四、检测试剂的稳定性稳定性是体外检测诊断试剂随时间推移保持特性一致性的能力，是试剂必须具有的基本属性，是确保体外检测诊断试剂使用过程中安全有效的重要指标。检测试剂的稳定性研究的类型一般分为保存期稳定性研究、使用期稳定性研究及运输模拟研究。保存期稳定性研究主要用于确定体外诊断试剂在规定的保存条件下最终包装内的有效期，一般至少使用3批产品建立保存期要求。使用期稳定性研究是指产品投入使用后产品保持活性的时间段，可以使用单一产品批号建立此类保存期要求。运输模拟研究是将样本暴露于预先设定的改变的环境条件下用于模拟产品在到达消费者前的过程中所能忍受的最坏的环境条件，此研究结果用于确定检测试剂最适宜的运输和保存条件，要求检测试剂至少有1个产品批号通过这种测试。目前欧盟有关体外检测诊断试剂的法规规定：对于长期稳定性研究，应采用3个批次产品；对于模拟运输条件下的稳定性研究，可采用1个批次产品；

对于延长保存期限的稳定性研究，应采用3个批次产品；对于可能影响稳定性的变更，可采用1个批次的产品。由于所用的仪器种类繁多，试剂盒品牌不一，实验室工作人员业务能力的差异等，造成不同实验室间的测定结果差异较大。临床免疫检验试剂盒保质期一般为6个月以上，有些检验机构为了节约成本，分数次使用试剂盒，势必会