UF-1000i尿沉渣浅析仪参数RBC-INFORMATION值浅析及应用

UF-1000i尿沉渣浅析仪参数RBC-INFORMATION值浅析及应用

姜志凤李慧菊杨一斐周军【摘要】目的本文旨在通过对UF-1000i尿沉渣分析仪红细胞形态(RBC-INFORMATION)这一参数与镜检结果的比对分析，研究探讨UF-1000i尿沉渣分析仪RBC-INFO的干扰因素以及该参数临床应用价值。方法对1000例住院病人的晨尿用UF-1000i尿沉渣分析仪测定得出RBC-INFO结果，同时在显微镜下进行红细胞形态分析，再进行两者之间的比对。结果两者在均一型结果符合率为76.7%，出现假阳性为27.1%;在非均一型结果符合率为72.4%，出现假阳性为38.2%;在混合型结果符合率为72.3%，出现假阳性为38.2%;阴性结果符合率为98.3%，出现假阳性为1.7%。结论当尿液中有非晶形尿酸盐、小圆上皮细胞、大量破碎上皮细胞、大量酵母菌和滴虫存在时，会大大增加假阳性的几率，当尿液中有影红细胞、红细胞碎片、酵母菌、红细胞高度异形性或聚集、荧光染料时则增加了假阴性的几率。总而言之，由于RBC-INFO在阴性结果有着较高的符合率和较低的假阳性率和假阴性率，因此在临床上可作为初筛实验。若RBC-INFO结果为阳性(均一型、非均一型、混合型)，则必须通过镜检来分析细胞形态。【关键词】UF-1000i尿沉渣分析仪;红细胞形态(RBC-INFORMATION)[Abstract]ObjectiveOurstudyaimsbasedontocomparetheresultsofRBC-INFORMATIONwithUF-1000iurinarysedimentanalyzertothecheckbythemicroscope.StudytheinterferencefactorsofUF-1000iurinedreganalyzerRBC-INFORMATIONandtheparametervalueofclinicalapplications.MethodsAccordingtotheresultsof1000hospitalizedpatients'morningurineanalyzationanddeterminatedresultsofRBC-INFORMATION，atthesametimeanalyzedunderamicroscopeonredbloodcells，thencarriesonthecomparisonbetweenthetwomatheds.ResultsBothinsametyperesultsaccuracywas76.7%，falsepositiveratewas27.1%;Ininhomogeneoustyperesultsaccuracywas72.3%，falsepositiveratewas38.2%，inmixedresultsaccuracyratewas72.3%，falsepositiveratewas38.2%，negatieresultaccuracyratewas98.3%，falsepositivefor1.7%.ConclusionWhenurinehaveamorphousurate，smallgardenepithelialcells，largecrushingepithelialcells，alargenumberofyeastandtrichomonadexists，willgreatlyincreasethechancesoffalsepositiveswhenurinehasitsshadowred，redchips，yeast，highlyspecial-shapedsexorredbloodcellsaregathered，fluorescentincreasedfalsenegatieprobability.Inshort，becauseRBC-results-relatedareasinnegatieresultwithahighaccuracyandlowerfalse-positiverateandthefalsenegativerate，thereforeintheearlyclinicalcanbeusedasscreeningexperiment.IftheRBC'sresultispositive(results-relatedareasareunifalandinhomogeneoustypeandmixed)，thenmustthroughthemicroscpetoanalyzeredcellsform.[Keywords]UF-1000iurinarysedimentanalyzer;RBC-INFORMATIONUF-1000i尿沉渣分析仪是日本Sysmex公司近年推出的最新的尿液定量分析系统，它运用红色半导体激光束照射经过核酸荧光染色后在鞘流贯流分析池中形成的鞘流样本，并通过对从各粒子产生的前方散射光、侧向散射光以及侧向萤光信号转换成的光电信号进行分析，从而对各个粒子进行识别。UF-1000i报告12项定量检测参数及3项研究参数信息：其中红细胞形态学信息(RBC-INFORMATION)这一参数可以判断血尿的来源，但尿液成分的多样性、复杂性、干扰因素多以及仪器本身检测的局限性，常导致参数的假阳性或假阴性。本文通过对UF-1000i结果与镜检结果的比对分析，进一步探讨RBC-INFOR这一参考值的临床应用价值。本实验方法如下。1材料与方法1.1对象收集2010年2—4月普陀区中心医院1000例住院病人的晨尿，其中男468例，女532例，年龄23～73岁。1.2方法1.2.1样本采集和处理住院病人收集清晨起床后，在未进早餐和做其他运动之前排泄的尿液，在采集前1天提供收集容器和收集书面说明，如外阴、生殖器清洁方法，留中段清洁尿等。若采集后2h内不能进行分析的，要采取适当的防腐措施。尿液混匀后倒入10ml锥形基底管内，留取两管，一管用于镜检，另一管用于仪器分析。1.2.2仪器与试剂1.2.2.1仪器UF-1000i尿沉渣分析仪(希斯-美康)，OlympusCH30显微镜。1.2.2.2原装配套试剂UFIISHEATH(鞘液)、UFIISEARCH-SED(染色液)、UFIIPACK-SED(稀释液)、UFIISEARCH-BAC(染色液)、UFIIPACK-BAC(稀释液)。1.2.2.3质控物UFIICONTROL-H和UFIICONTROL-L;质控品品牌：SYSMEX;代码：UTL-100。1.2.3检测方法参照《全国临床检验操作规程》[1]第3版，在质控符合要求的前提下上机测试。在仪器自动进样器模式下，一管样本被放置在样本架上自动搅拌与抽吸，然后进行分析。镜检均由有经验的2名中级技师完成。UF-1000i与镜检之间、镜检人员之间以双盲方式判读，尿沉渣的显微镜检查留取另一管1500r/min离心5min(离心半径5cm)弃去大部分尿液留取底部0.1ml尿液，吸取20μl滴于载玻片上，盖上盖玻片镜检。1.2.4统计学方法UF-1000i以尿沉渣镜检结果为参照标准。尿UF-1000i结果阳性而尿沉渣镜检结果阴性为假阳性。尿UF-1000i结果阴性而尿沉渣镜检结果阳性为假阴性。2结果在2010年2—4月间，1000例患者的标本中UF-1000i型尿沉渣检测仪测出红细胞形态为均一型者61份，而镜检红细胞为均一型者48份，与UF-1000i检测的符合率为76.7%，见表1、表2。UF-1000i型尿沉渣检测仪测出红细胞形态为非均一型者76份，而镜检红细胞为非均一型者55份，与UF-1000i检测的符合率为72.4%;UF-1000i测出红细胞形态为混合型者47份，而显微镜为阳性者34份，符合率为72.3%;UF-1000i检测红细胞形态为正常者816份，显微镜检查为阴性者802份，符合率为98.3%。表1UF-1000i与镜检红细胞形态结果比较分析表2UF-1000i参数RBC-INFOR值的评价3讨论UF-1000i全自动尿沉渣分析仪是目前测定尿液有形成分的先进仪器，该方法结合流式细胞术和电阻抗原理，通过对细胞进行荧光染色后，测定其荧光强度、荧光脉冲宽度，前向散射光强度及其脉冲宽度，从而对尿液中有形成分进行精确计数及鉴别。但由于尿中有形成分复杂，有时对红细胞难以正确识别。此次对在2010年2—4月期间采集的1000例尿液做了UF-1000i尿沉渣分析和显微镜检查，结果发现在184例阳性标本中有13份尿液UF-1000i提示红细胞异常，而显微镜检查均呈阴性。在UF-1000i检测红细胞异常而显微镜检查为阴性的13份标本中，单纯或混合性草酸钙、非晶形盐结晶阳性5份，酵母菌阳性6份，细菌阳性2份。当Fsc-P70≥100且Fsc-DWSDFsc≤50，告示“均一性红细胞”的信息，提示非肾小球性血尿可能;当Fsc-P70≥70且Fsc-DWSDFsc≥50，告示“混合性红细胞”的信息，提示肾小球或非肾小球性血尿均可。根据本实验所得结果可得出UF-1000i在尿液存在红细胞时有较高的假阳性(27.1%、38.2%、8.2%)和假阴性(22.6%、21.4%、35.8%)。当尿液中没有红细胞时得到较低的假阳性(1.7%)及假阴性(1.6%)。红细胞的形态大小、染色性与草酸钙、非晶形盐等结晶非常相似，在散射图上两者交叉分布，因此草酸钙等结晶对红细胞形态分析结果影响较大;细菌、酵母样菌的散点分布介于红细胞和白细胞之间，在大部分情况下仪器可以区分，但仍有和红细胞发生重叠的情况。而由于草酸钙、非晶形盐、细菌、酵母菌又是尿中常见的有形成分，因此当尿液中出现上述成分而提示红细胞结果异常，同时亦导致RBC-INFOR结果分析错误，出现较高的假阳性[2]。必须镜检复查。这四种因素影响红细胞计数的原因可能是：(1)草酸钙结晶、非晶形盐对荧光染料几乎不着色且大小、形态不均，所以其荧光强度很低，UF-1000i不能将草酸钙结晶、非晶形盐与红细胞区分;(2)细菌为RNA或DNA构成，但UF-1000i对染料菲啶对膜渗透性低，所以染色后其荧光强度低，前向散射光强度也低(但比红细胞稍强)，所以当尿中细菌超过一定量聚集时，仪器将细菌误认为红细胞;(3)酵母菌影响的原因可能是酵母菌的形态大小与红细胞类似，仪器分析时得不到准确信息所致。另外，我们发现UF-1000i对影红细胞、小红细胞的辨认存在误差易导致假阴性。以上结果与文献报道相符[3～5]。总体来说，UF-1000i尿沉渣仪具有操作简便，标本不需要离心，省时省力的优点，但是由于RBC-INFOR这一研究参数在标本阳性情况下存在较高的假阳性和假阴性率，因此阳性标本必须通过显微镜检查来判断红细胞的大小、形态，从而确定其来源。而在阴性标本假阳性和假阴性率较低，我们可以用仪器进行初筛，达到节省劳动力的作用。