黄酮类化合物2

关于黄酮类化合物2一、定义：

以前，黄酮类化合物(flavonoids)主要是指基本母核2-苯基色原酮(2-phenyl-chromone)类化合物，

黄酮类化合物是泛指两个苯环通过三碳相互连接而成的一系列化合物。第一节概述二、生物合成途径及分类：第2页,共105页，2024年2月25日，星期天第一节概述桂皮酸－莽草酸途径第3页,共105页，2024年2月25日，星期天查耳酮第4页,共105页，2024年2月25日，星期天分类依据：母核中三碳链的氧化程度，三碳链是否成环以及B环的连接位置C3-位：有OH

黄酮醇

无OH

黄酮C2－3饱和：二氢黄酮（醇）C3与B环相连：异黄酮、二氢异黄酮C环开环：查耳酮、二氢查尔酮C环还原：黄烷类其它类型：花色素类、橙酮类（奥弄类）、高异黄酮、山酮类（双苯吡酮类）第一节概述第5页,共105页，2024年2月25日，星期天双黄酮类：由两分子黄酮或两分子二氢黄酮或一分子黄酮及一份子二氢黄酮以C-C或C-O-C键连接而成。另外，还有黄酮木脂类、生物碱黄酮类第一节概述第6页,共105页，2024年2月25日，星期天例第一节绪论(+)-儿茶素

R1=R2=H，大豆素

OHOOHOHOHOHHH第7页,共105页，2024年2月25日，星期天多以苷的形式存在：O-苷和C-苷苷中常见糖的种类：

单糖：D-葡萄糖，D-半乳糖，D-木糖，L-鼠李糖，L-阿拉伯糖，D-葡萄糖醛酸

双糖：槐糖，龙胆二糖，芸香糖（Rha1—6Glc），新橙皮糖（Rha1—2Glc）等

三糖：龙胆三糖，槐三糖

酰化糖：2-乙酰葡萄糖，咖啡酰基葡萄糖第一节绪论三、存在形式第8页,共105页，2024年2月25日，星期天

1.对心血管系统的作用

(1)扩张冠脉：芦丁、葛根素黄酮片临床用于心绞痛、高血压。

(2)Vip样作用：橙皮苷可降低血管脆性及异常通透性，用作高血压辅助治疗剂。

(3)抑制血小板聚集作用：抑制ADP、胶原或凝血酶诱导的血小板聚集，从而防止血栓形成。

(4)降低血胆甾醇作用：山楂总黄酮

2.抗肝脏毒性作用

水飞蓟素为二氢黄酮醇与苯丙素衍生物缩合而成，对肝细胞膜有稳定作用，能保护肝脏，改善肝功能，适用于急慢性肝炎、肝硬化、中毒性肝损伤。第一节绪论三、黄酮类化合物的药理作用第9页,共105页，2024年2月25日，星期天

3.抗炎作用

黄酮类化合物可抑制脂氧化酶，从而抑制前列腺素的生物合成，达到抗炎目的。

4.雌性激素样作用大豆素己烯雌酚

5.抗菌及抗病毒作用黄芩苷：抗菌山奈酚：抗病毒

6.止咳平喘驱痰作用

7.泻下作用

8.解痉作用第一节绪论三、黄酮类化合物的药理作用第10页,共105页，2024年2月25日，星期天第一节绪论第二节理化性质与颜色反应第三节提取分离方法第四节黄酮类化合物的检识与结构测定第五节结构研究实例

本章内容第11页,共105页，2024年2月25日，星期天一、一般性状形态：多为结晶，少数为无定形粉末。颜色：结构存在交叉共轭体系，因此化合物多有颜色。

黄酮（醇）及其苷：呈黄色-灰黄色

查耳酮：黄-橙色

二氢黄酮（醇）：无色

异黄酮：微黄色

花色素可随着pH值的变化颜色有所不同：

红色（pH<7），紫色(pH8.5)，蓝色(pH>8.5)第二节理化性质与颜色反应第12页,共105页，2024年2月25日，星期天溶解度黄酮(醇),查耳酮：平面型分子二氢黄酮(醇)：非平面型分子花色素：离子

苷元：难溶于水，易溶于乙酸乙酯，乙醚等有机溶剂中

苷：易溶于水、乙醇、甲醇中，糖链越长水溶性越大。第二节理化性质与颜色反应水中溶解度增加第13页,共105页，2024年2月25日，星期天二、酸碱性酸性：来源分子中的酚羟基；可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺。酸性强弱的比较：取决于羟基的数目和位置：

7,4′-OH>7-或4′-OH>一般Ar-OH>5-OH第二节理化性质与颜色反应（可用于提取、分离及鉴定工作）第14页,共105页，2024年2月25日，星期天来源：1-位氧原子的未共用电子对，显微弱的碱性；可与强酸（如：浓硫酸，盐酸等）生成（）盐而溶于酸水中。第二节理化性质与颜色反应

碱性：二、酸碱性第15页,共105页，2024年2月25日，星期天三、显色反应（一）还原反应（可用于各类化合物的鉴别）HCl-Mg

反应:

多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显橙红~紫红色，少数显紫~蓝色。查耳酮、橙酮、儿茶素类不显色。异黄酮类一般不显色。(2)HCl－Zn:

（同HCl-Mg

反应）(3)四氢硼钠（NaBH4)反应：NaBH4是对二氢黄酮（醇）类化合物专属性较高的一种还原剂。

为（+）的反应，颜色多为橙红-紫红

其它黄酮类化合物均不显色。第二节理化性质与颜色反应第16页,共105页，2024年2月25日，星期天第二节理化性质与颜色反应三、显色反应（二）金属盐类试剂的络合反应黄酮类化合物分子结构中多具有下列结构：可与金属盐类试剂产生络合反应（1）锆盐（4）镁盐（2）铝盐（5）氯化锶（3）铅盐（6）三氯化铁反应第17页,共105页，2024年2月25日，星期天（1）锆盐（ZrOCl2）-枸橼酸反应：区分C3-OH和C5-OH第二节理化性质与颜色反应3-OH，4-酮基络合物的稳定性

5-OH，4-酮基络合物（仅二氢黄酮醇除外）第18页,共105页，2024年2月25日，星期天（2）铝盐（3）铅盐第二节理化性质与颜色反应可用于定性或定量分析*醋酸铅（中性）：邻二酚、3-OH和4-酮基好或5-OH和4-酮碱式醋酸铅：一般酚羟基均可第19页,共105页，2024年2月25日，星期天（4）镁盐

二氢黄酮(醇),显天蓝色荧光,有5-OH更明显黄酮(醇)、异黄酮，显黄~橙、黄~褐色第二节理化性质与颜色反应（5）氯化锶（SrCl2）第20页,共105页，2024年2月25日，星期天（三）硼酸显色反应第二节理化性质与颜色反应三、显色反应——鉴别5-OH黄酮和2

-羟基查耳酮

在无机酸或有机酸存在下，反应生成

亮黄色。第21页,共105页，2024年2月25日，星期天（四）碱性试剂

NH3蒸气：颜色加深，可逆；

Na2CO3反应不可逆。

1)二氢黄酮遇碱开环：生成查耳酮，显橙黄色。

2)黄酮醇：在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色，据此可与其他黄酮区别。

3)黄酮类有邻二酚羟基或3，4′-二羟基：在OH-中易氧化，生成由黄色深红色绿棕色沉淀。第二节理化性质与颜色反应三、显色反应第22页,共105页，2024年2月25日，星期天(五)Wessely-Moser重排黄酮类6-及8-C-糖苷在常规酸水解条件下不被水解，但可发生互变，成为6-和8-C-糖苷的混合物。第二节理化性质与颜色反应三、显色反应第23页,共105页，2024年2月25日，星期天

HCl-Mg反应HCl-Zn反应NaBH4反应锆-枸橼酸反应SrCl2反应硼酸+草酸反应Molish反应（+）（+）（-）黄色，加枸橼酸,褪色（+）（+）黄色（+）第二节理化性质与颜色反应练习：下面的一个化合物可能发生的反应第24页,共105页，2024年2月25日，星期天第一节绪论第二节理化性质与颜色反应第三节提取分离方法第四节黄酮类化合物的检识与结构测定第五节结构研究实例

本章内容第25页,共105页，2024年2月25日，星期天

一、提取精制

根据化合物的性质，可采取以下提取方法

化合物：极性——溶剂萃取

酸性——碱提酸沉

解离性—离子交换碳粉吸附法第三节提取分离方法溶剂萃取法：

被分离物质与混入的杂质性质不同，选用不同极性溶剂萃取达到去杂质目的。例如：醇提液用石油醚萃取可除去油脂、蜡、叶绿素；

水提液加醇沉淀可去除蛋白、多糖等水溶性杂质。

第26页,共105页，2024年2月25日，星期天第三节提取分离方法

药材甲醇或乙醇提取，回收醇第27页,共105页，2024年2月25日，星期天第三节提取分离方法2.碱提酸沉法第28页,共105页，2024年2月25日，星期天原理：酚羟基与碱成盐，溶于水；加酸后析出。碱：常用饱和Ca(OH)2水溶液，石灰乳，

5%NaCO3溶液，稀NaOH水溶液等。优点：可使含酚羟基化合物成盐溶解，另一方面可使含COOH的果胶、粘液质、蛋白质等杂质形成沉淀而除去。注意：碱性不宜过强，以免破坏黄酮母核；酸化时，酸性不宜过强，pH3~4即可，以免形成佯盐而溶解。第三节提取分离方法2.碱提酸沉法第29页,共105页，2024年2月25日，星期天第三节提取分离方法3.离子交换

原理：酚羟基与碱成盐，溶于水；采用阴离子交换树脂交换，加酸后析出，用有机溶剂回流提取。第30页,共105页，2024年2月25日，星期天第三节提取分离方法4.炭粉吸附法（主要适用于苷类的精制）第31页,共105页，2024年2月25日，星期天二、分离

（一）采用各种色谱方法：

1）硅胶色谱：按极性大小分离，主要分离极性小和中等极性的化合物。可用CC（柱色谱），PTLC（制备薄层）主要适于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化（或乙酰化）的黄酮及黄酮醇类。少数情况下，在加水去活化后也可用于分离极性较大的化合物，如多羟基黄酮醇及其甙类等。

第三节提取分离方法第32页,共105页，2024年2月25日，星期天2）聚酰胺色谱：原理：聚酰胺分子中具有酰胺羰基，可与酚羟基形成氢键，主要依据与被分离物质成氢键能力不同进行分离。

吸附强度主要取决于：

①黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置以及溶剂；

②黄酮类化合物酚羟基与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。

（形成氢键主要指酚羟基，糖部分不参与形成氢键）

第三节提取分离方法第33页,共105页，2024年2月25日，星期天其洗脱规律：（顺序先—后）

(1)苷元相同,洗脱先后顺序一般是：

三糖苷>双糖苷>单糖苷>苷元(2)母核上羟基增加，洗脱速度减慢(3)羟基数目相同,有缔合羟基>无缔合羟基(4)不同类型黄酮的洗脱顺序：

异黄酮>二氢黄酮（醇）>查耳酮>黄酮>黄酮醇（芳香核、共轭双键多者吸附力强）第三节提取分离方法第34页,共105页，2024年2月25日，星期天第三节提取分离方法习题：下列黄酮化合物，

（1）用聚酰胺柱色谱，含水甲醇梯度洗脱，（2）用硅胶柱色谱分离，氯仿-甲醇梯度洗脱，分别写出洗脱顺序第35页,共105页，2024年2月25日，星期天第三节提取分离方法答案：聚酰胺柱色谱洗脱顺序：由先到后

D，E，C，B，A2.用硅胶柱色谱洗脱顺序：由先到后

A，B，C，D，E第36页,共105页，2024年2月25日，星期天常用型号：

Sephadex-G（适用于水溶性成分分离）

Sephadex-LH20（可用于亲脂性成分分离

）机理：

分离游离黄酮（苷元）－－靠吸附作用。吸附程度取决于游离酚羟基数目，苷元的羟基数越多,越难洗脱。

分离黄酮苷（苷）－－分子筛起主导作用。在洗脱时，黄酮苷类按分子量由大到小的顺序流出柱体。3）葡聚糖凝胶色谱第三节提取分离方法第37页,共105页，2024年2月25日，星期天例：下列化合物，用凝胶柱色谱，含水甲醇洗脱，写出出柱顺序。第三节提取分离方法1）2）先后顺序：A>B>C先后顺序：C>A>B第38页,共105页，2024年2月25日，星期天应用：分离酸性强弱不同的黄酮苷元酸性比较：7,4’-OH>7-或4’-OH>一般OH>5-OH溶于NaHCO3Na2CO3

不同浓度的NaOH样品乙醚乙醚液依次萃取5%NaHCO35%Na2CO30.2%NaOH4%NaOH分别酸化各部分黄酮第三节提取分离方法（二）梯度pH萃取法第39页,共105页，2024年2月25日，星期天醋酸铅沉淀法：邻二酚羟基黄酮＋醋酸铅沉淀不具有邻二酚羟基＋碱式醋酸铅沉淀硼酸沉淀法：邻二酚羟基＋硼酸络合物溶于水，与其它黄酮分离。第三节提取分离方法（三）利用分子中的特定基团第40页,共105页，2024年2月25日，星期天习题：从某植物中分离出四种化合物，其结构如下：试比较四种化合物的酸性，极性大小比较它们的Rf值大小顺序：

1）硅胶TLC2）聚酰胺TLCAR1=R2=HBR1=H,R2=RhaCR1=Glc,R2=HDR1=Glc,R2=Rha酸性A>C>B>D极性D>C>B>ARf：A>B>C>DD>B>C>A第三节提取分离方法第41页,共105页，2024年2月25日，星期天第一节绪论第二节理化性质与颜色反应第三节提取分离方法第四节黄酮类化合物的检识与结构测定第五节结构研究实例

本章内容第42页,共105页，2024年2月25日，星期天（一）色谱在黄酮类鉴定中的应用

第四节黄酮类化合物的检识与结构测定1.纸色谱

苷元（花色苷元除外）：分配层析。流动相：BAW系统。

苷：双向纸层析。第一向：醇性溶剂展开，例如BAW系统，化合物极性大，吸附强。(分配作用原理)

第二向：水类溶剂展开，例如2-6%HOAC、3%NaCl

等，化合物极性大，吸附弱。（吸附作用原理）第43页,共105页，2024年2月25日，星期天第四节黄酮类化合物的检识与结构测定Rf与结构的关系：

（1）水类溶剂展开时，平面型分子（黄酮、黄酮醇、查耳酮）几乎停留原点不动，非平面型分子（二氢黄酮、二氢查耳酮）Rf较大。

（2）醇性溶剂展开时，同一类型苷元，羟基越多，Rf越小。（3）醇性溶剂展开时，苷元相同时，Rf值大小通常为：苷元>单糖苷>双糖苷（4）醇性溶剂展开时，羟基被甲氧基取代，Rf增大。

（5）醇性溶剂展开时，羟基糖苷化，极性增大，Rf下降。

（2）（3）（4）（5）用酸水展开时，上述顺序颠倒。第44页,共105页，2024年2月25日，星期天第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（2）醇性溶剂展开时，同一类型苷元，羟基越多，Rf越小。（3）醇性溶剂展开时，苷元相同时，Rf值大小通常为：苷元>单糖苷>双糖苷（4）醇性溶剂展开时，羟基被甲氧基取代，Rf

增大。

（5）醇性溶剂展开时，羟基糖苷化，极性增大，Rf下降。

（2）（3）（4）（5）用酸水展开时，上述顺序颠倒。

2.TLC：主要指吸附薄层，常用硅胶TLC，聚酰胺TLC。

硅胶TLC：鉴定弱极性黄酮类化合物。

聚酰胺TLC：分离大多数黄酮及苷类，适用范围广，分离效果好。第45页,共105页，2024年2月25日，星期天第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定一、基础知识1、紫外光谱（ultravioletspectra）：外层电子能级跃迁2、红外光谱（infraredspectra）：分子振动与转动能级跃迁3、核磁共振谱（NMRspectroscopy）：核自旋能级跃迁4、质谱（massspectra）：质量裂解第46页,共105页，2024年2月25日，星期天1、紫外光谱（ultravioletspectra）：外层电子能级跃迁肩峰n*第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第47页,共105页，2024年2月25日，星期天2、红外光谱（infraredspectra）：分子振动与转动能级跃迁2、Nujol法（研糊法、矿物油法）1、第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第48页,共105页，2024年2月25日，星期天（二）结构测定GN2-1S5-41H-NMR

500MHz

CD3OD溶剂峰水峰化学位移积分3、核磁共振谱：核自旋能级跃迁第49页,共105页，2024年2月25日，星期天溶剂峰GN2-1S5-413C-NMR

125MHz

CD3OD第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第50页,共105页，2024年2月25日，星期天（二）结构测定4、质谱：质量裂解ESI-MS正离子质谱负离子质谱[M-H]-[2M-H]-[2M+H]+第51页,共105页，2024年2月25日，星期天二、紫外光谱法黄酮存在桂皮酰基及苯甲酰基组成的交叉共轭系统，在200~400nm间，有两个主要的紫外吸收带A环苯甲酰系统峰带II，220~280nmB环桂皮酰基系统峰带I，300~400nm共性：

B环OH增加，峰带I

红移，特别是4

-OH，红移大；

A环OH增加，峰带II红移。（一）第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第52页,共105页，2024年2月25日，星期天1.黄酮、黄酮醇类带I

：黄酮类304~350nm

黄酮醇（3-OH被取代）328~357

黄酮醇（3-OH游离）352~385带II

：240~285nm峰带I和II强度相似nmIII第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第53页,共105页，2024年2月25日，星期天黄酮及黄酮醇类化合物的紫外光谱带（λMeOHmax，nm）第54页,共105页，2024年2月25日，星期天

取代基的影响：

带I：母核上的－OH、-OCH3等供电基，可引起相应吸收带红移。氧取代程度越高，带I红移越大。羟基甲基化或苷化，将引起紫移。

带II：峰位主要受A-环氧取代程度的影响，氧取代程度越高，带II越向红移。B环的取代基只影响峰形。如：只有4′-OR时，为单峰；3′，4′-OR时，为双峰。第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第55页,共105页，2024年2月25日，星期天2.查耳酮、橙酮类nmIII

查耳酮

带I340~390nm(有裂分)带II220~270nm

橙酮370~430nm(3~4个峰)带I强，带II次强峰第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第56页,共105页，2024年2月25日，星期天查耳酮一橙酮---异黄酮一二氢黄酮---第57页,共105页，2024年2月25日，星期天3.异黄酮、二氢黄酮(醇)类nmIII只有A-环苯甲酰系统，带II为主峰带II：异黄酮245~270nm

二氢黄酮（醇）270~295nm带I：肩峰带I弱，带II强峰第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第58页,共105页，2024年2月25日，星期天（二）利用诊断试剂，判断羟基位置1.甲醇钠（NaOMe）黄酮类化合物上所有酚羟基，均可在NaOMe中成盐，引起红移。确定4’-OH黄酮醇类：

a.带I位移40~60nm,强度不降。示有4’-OH.b.带I红移50~60nm,强度下降。示有3-OH,但无

4’-OH。

第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第59页,共105页，2024年2月25日，星期天二氢黄酮（醇）、异黄酮类:a.带II红移35~40nm。示有5,7-OH。

b.带I移至400nm。示无5-OH。c.320~330nm,有峰，7-OH。d.3,4’-OH,3,3’,4’-OH,3’,4’,5’-OH等,随时间延长,

峰衰退.黄酮醇类：第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第60页,共105页，2024年2月25日，星期天2.醋酸钠（NaOAc）

NaOAc碱性较NaOMe弱，只能使7-OH，4’-OH解离。由于未熔融的NaOAc中含微量HOAc，限制4’-OH的解离。（二）利用诊断试剂，判断羟基位置确定7-OH

黄酮（醇）：带II红移5~20nm，示有7-OH，6，8氧取代时影响位移幅度。二氢黄酮（醇）：带II红移60nm，示有7-OH。带II红移35nm，示有5，7-OH。第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第61页,共105页，2024年2月25日，星期天异黄酮：带II红移6~20nm，示有

7-OH，。有5,6,7-三OH，6,7,8-三OH或3,3‘,4’-三OH

时，峰随时间衰退。2.醋酸钠（NaOAc）3.NaOAc/H3BO3

邻二酚羟基在NaOAc碱性下，可与H3BO3螯合，引起红移。黄酮（醇）：带I红移12~30nm；B环具邻二酚羟基。带II红移5~10nmA环具邻二酚羟基

(除5,6-二OH)。确定邻二OH第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第62页,共105页，2024年2月25日，星期天异黄酮，二氢黄酮（醇）：带II红移10~15nm，A环具邻二酚羟基(除5,6-二OH)。3.NaOAc/H3BO34.AlCl3及AlCl3/HClAlCl3与引起络合。第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第63页,共105页，2024年2月25日，星期天生成铝络合物的稳定性顺序：

3-OH(黄酮醇)>5-OH(黄酮)>5-OH(二氢黄酮)>邻二酚OH>3-OH(二氢黄酮醇)第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第64页,共105页，2024年2月25日，星期天邻二酚OH和二氢黄酮醇的3-OH形成的络合物遇酸分解。当3-OH与5-OH共存时，优先生成3-OH-4-酮基络合物。3-OH或5-OH及邻二酚OH同时存在，形成二络合物。应注意以下规律：第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第65页,共105页，2024年2月25日，星期天a.AlCl3/HCl与MeOH中光谱比较

相同时：示无3-OH或5-OH。

不同时：带I红移33~55nm，示只有5-OH，无3-OH时。带I红移17~20nm，示有5-OH，且6-氧代；带I红移50~60nm，示有5-OH、3-OH；带I红移60nm，示只有3-OH时。3-OH,5-OH4.AlCl3及AlCl3/HCl第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第66页,共105页，2024年2月25日，星期天b.AlCl3/HCl与AlCl3中光谱比较

相同时：无邻二酚羟基；

不同时：带I紫移30~40nm，示B环有邻二酚羟基；带I紫移50~60nm，示A，B环同时有邻二酚羟基。4.AlCl3及AlCl3/HCl第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第67页,共105页，2024年2月25日，星期天练习：UVmax,nm:MeOH259,266sh,299sh,359NaOMe272,327,410NaOAc271,325,393NaOAc/H3BO3262,298,387AlCl3275,303sh,433AlCl3/HCl271,300,364sh,402某化合物HCl-Mg反应（+），Molish反应（+），ZrOCl2反应黄色，加入枸橼酸褪色，酸水解检出Glc。紫外谱图数据如下，试推断其结构第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第68页,共105页，2024年2月25日，星期天黄酮或3-O-苷

I=410-359=51nm，4’-OHII=271-259=12nm,7-OHI=387-359=28nm,B环有邻二OHAlCl3/HCl与AlCl3相比，

I=402-433=-31nm,B环有邻二OHAlCl3/HCl与MeOH相比，

I=402-359=43nm,有5-OH，无3-OH分析：第四节黄酮类化合物的鉴定与结构测定（二）结构测定第69页,共105页，2024年2月25日，星期天1.核磁共振氢谱（1HNMR）A环质子(1).5,7-二OH

H-6,85.7~6.9,d,J=2.5Hz

H-8>H-6三核磁共振法第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第70页,共105页，2024年2月25日，星期天(2).7-OH

H-5：7.7~8.2,d,J=8Hz

H-6：6.4~7.1,dd,J=8and2Hz

H-8：6.3~7.0,d,J=2HzH-5受C环C=O的去屏蔽作用而处于低场，化学位移大。A环质子1.核磁共振氢谱（1HNMR）第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第71页,共105页，2024年2月25日，星期天B环质子4̍-OR

2̍,6̍-H7.1~8.1,d,J=8Hz3̍,5̍

-H6.5~7.1,d,J=8Hz（两组峰，每个峰有两个H，AA’BB’系统）第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第72页,共105页，2024年2月25日，星期天3̍,4̍–二OR

1)黄酮（醇）

H-5’6.7~7.1,d,J=8.5HzH-6’7.9,dd,J=8.5,2.5HzH-2’7.2,d,J=2.5Hz

2)异黄酮，二氢黄酮（醇）

H-2’,5’,6’6.7~7.1m（峰复杂）B环质子第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第73页,共105页，2024年2月25日，星期天3´,4´,5´-三OR

H-2’,6’

：6.5~7.5R=R´´,为一个单峰s(2H);RR´´

，间位偶合为两个二重峰d(J=2Hz)B环质子第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第74页,共105页，2024年2月25日，星期天C环质子

区别各类黄酮的主要依据1)黄酮

H-36.3s(常与A环质子重叠)2)异黄酮

H-27.6~7.8(用DMSO-d6作溶剂时为8.5~8.7)第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第75页,共105页，2024年2月25日，星期天3)二氢黄酮(2位为S构型)

H-25.2,dd,J=11and5Hz

Ha-32.8~3.0,dd,J=17and11HzHe-32.8,dd,J=17and5Hz(

Ha-3>He-3)C环质子第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第76页,共105页，2024年2月25日，星期天4）二氢黄酮醇

H-24.9,d,J=11Hz

H-34.3,d,J=11Hz(绝对构型用CD或ORD测定)5）查耳酮

H-

6.7~7.4,d,J=17Hz

H-7.3~7.7,d,J=17Hz6）橙酮苄基质子

6.5~6.7sαβ第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第77页,共105页，2024年2月25日，星期天1）黄酮苷类化合物上糖的端基质子信号

黄酮醇-3-O-葡萄糖苷

5.70~6.00

黄酮醇-3-O-鼠李糖苷5.00~5.10

黄酮类-7-O-葡萄糖苷4.80~5.20

黄酮类-4’-O-葡萄糖苷黄酮类-5-O-葡萄糖苷黄酮类-6及8-C-糖苷糖上质子第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第78页,共105页，2024年2月25日，星期天2）端基以外的糖上质子:3~4,

鼠李糖C5-CH3:0.8~1.2,d,J=6.5Hz其它取代基

CH3CO-

脂肪族乙酰氧基1.65~2.10(确定糖数)

芳香族乙酰氧基2.30~2.50(确定酚羟基数)

第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第79页,共105页，2024年2月25日，星期天2）端基以外的糖上质子:3~4,

鼠李糖C5-CH3:0.8~1.2,d,J=6.5Hz其它取代基

CH3CO-

脂肪族乙酰氧基1.65~2.10(确定糖数)

芳香族乙酰氧基2.30~2.50(确定酚羟基数)

第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第80页,共105页，2024年2月25日，星期天CH3O-

甲氧基质子信号一般在：

3.50~4.10

可通过NOE核磁共振技术及二维技术确定基位置。

－OH溶剂一般采用DMSO-d6(无水)作测试溶剂

5-OH12.40；7-OH10.9；3-OH9.7；4’-OH>10(这些信号加D2O后消失)其它取代基第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第81页,共105页，2024年2月25日，星期天三核磁共振法2.核磁共振碳谱（13CNMR）

根据C＝O的化学位移确定黄酮骨架

a.174~184黄酮(醇),异黄酮,橙酮

b.188~197查耳酮,二氢黄酮(醇)第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第82页,共105页，2024年2月25日，星期天黄酮104~112异黄酮122~126黄酮醇136橙酮111~112查耳酮116~130二氢黄酮42~45二氢黄酮醇712.核磁共振碳谱（13CNMR）

根据C-3的化学位移细分第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第83页,共105页，2024年2月25日，星期天

取代基位移2.核磁共振碳谱（13CNMR）第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第84页,共105页，2024年2月25日，星期天B环上含氧取代基2.核磁共振碳谱（13CNMR）~155~155146-148~135~145~145第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第85页,共105页，2024年2月25日，星期天例：下列一个化合物的碳信号归属第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第86页,共105页，2024年2月25日，星期天四、质谱（MS）1.电子轰击质谱（EI-MS）苷元：可得到M+，且为基峰；苷：得不到M+，可得苷元碎片，可制备衍生物。2.场解析质谱（FD-MS）和快原子轰击质谱（FAB-MS）用于测定极性较强的苷类化合物，可得到M+

，M++1，M++Na，M++K峰，且给出糖基碎片峰。第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第87页,共105页，2024年2月25日，星期天3.黄酮类化合物苷元的EI-MS裂解途径途径I

（RDA裂解）第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第88页,共105页，2024年2月25日，星期天利用A1+和B1+可确定A环和B环的取代情况

A1+.B1+.5,7-二羟基黄酮1521025,7,4̍՛-三羟基黄酮(芹菜素)1521185,7-二羟基,4՛-甲氧基黄酮(刺槐素)152132第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第89页,共105页，2024年2月25日，星期天途径-II：

黄酮类:途径-I为主

M+常为基峰,还有[M-28]+,A1+(s),B1+(s),及[A1+H]+,[A1-28]+,B2+,[B2-28]+等。黄酮醇类:主要按途径-II进行

M+常为基峰,碎片离子主要有B2+和[B2-28]+及[A1+H]+,此外还有[M-H]+,[M-15]+等。第四节黄酮类化合物的检识与结构测定（二）结构测定第90页,共105页，2024年2月25日，星期天第一节绪论第二节理化性质与颜色反应第三节提取分离方法第四节结构鉴定第五节结构研究实例

本章内容第91页,共105页，2024年2月25日，星期天

例1：某黄色结晶I，盐酸镁粉反应(＋)，Molish反应(＋)，FeCl3反应(＋)，ZrOCl2反应呈黄色，但加入枸橼酸后黄色褪去。

I的UV

nm如下:MeOH252267(sh)346NaOMe261399AlCl3272426AlCl3/HCl260274357385NaOAc254400NaOAc/H3BO3256378I的1H-NMR(DMSO-d6,TMS)

：7.41(1H,dd,J=8,3Hz),6.92(1H,d,J=8Hz),6.70(1H,d,J=3Hz),6.62(1H,d,J=2Hz),6.43(1H,d,J=2Hz),6.38(1H,s),5.05(1H,d,J=7Hz)，其余略。FAB-MS示分子中含一分子葡萄糖,苷元的分子式为C15H10O6,推断化合物的结构，并写出推导过程。第92页,共105页，2024年2月25日，星期天

化学反应显示该化合物为5－羟基黄酮苷，结合紫外谱II的吸