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本文格式为Word版下载后可任意编辑和复制第第页简单生物实验设计方案生物学是一门以试验为基础的学科,生物学课程的核心任务是培育同学的科学素养。下面是有简洁生物试验设计方案,欢迎参阅。
简洁生物试验设计方案范文1土壤中分别产生α-淀粉酶的菌种
一.试验目的
1、学习从土壤中分别、纯化微生物的原理与方法。
2、学习、把握微生物的鉴定方法。
3、对提取的土样进行微生物的分别、纯化培育,并进行简洁的形态鉴定
二.试验原理
α-淀粉酶是一种液化型淀粉酶,它的产生菌芽孢杆菌,广泛分布于自然界,尤其是在含有淀粉类物质的土壤等样品中。
从自然界筛选菌种的详细做法,大致可以分成以下四个步骤:采样、增殖培育、纯种分别和性能测定。
1、采样:即采集含菌的样品
采集含菌样品前应调查讨论一下自己准备筛选的微生物在哪些地方分布最多,然后才可着手做各项详细工作。在土壤中几乎各种微生物都可以找到,因而土壤可说是微生物的大本营。在土壤中,数量最多的当推细菌,其次是放线菌,第三霉菌,酵母菌最少。除土壤以外,其他各类物体上都有相应的占优势生长的微生物。例如枯枝、烂叶、腐土和朽木中纤维素分解菌较多,厨房土壤、面粉加工厂和菜园土壤中淀粉的分解菌较多,果实、蜜饯表面酵母菌较多;蔬菜牛奶中乳酸菌较多,油田、炼油厂四周的土壤中石油分解菌较多等。
2、增殖培育(又称丰富培育)
增殖培育就是在所采集的土壤等含菌样品中加入某些物质,并制造一些有利于待分别微生物生长的其他条件,使能分解利用这类物质的微生物大量繁殖,从而便于我们从其中分别到这类微生物。因此,增殖培育事实上是选择性培育基的一种实际应用。
3、纯种分别
在生产实践中,一般都应用纯种微生物进行生产。通过上述的增殖培育只能说我们要分别的微生物从数量上的劣势转变为优势,从而提高了筛选的效率,但是要得到纯种微生物就必需进行纯种分别。纯种分别的方法许多,主要有:平板划线分别法、稀释分别法、单孢子或单细胞分别法、菌丝尖端切割法等。
三.试验材料
1、器材:
小铁铲和无菌纸或袋(可省)、培育皿8个、载玻片、盖玻片、一般光学显微镜、量筒、滴管、吸水纸、无菌水试管5支(每支4.5mL水)、烧杯3个、三角瓶5个、电炉、玻璃棒、接种环、镊子、恒温培育箱、高温灭菌锅、移液枪(枪头10个)、天平、滤纸、pH试纸等。
2、试剂:
配制牛肉膏蛋白胨培育基的原料(牛肉膏0.9g、NaCl1.5g、琼脂4.5g、蛋白胨3.0g)、Lugol氏碘液、可溶性淀粉0.6g、结晶紫染液、番红染液、95%乙醇、无菌水等。
3、土样:取自桂林师专甲山校区药用植物园面的土壤,地下10cm左右。
四.试验方法步骤
1、采集土样带上小铁铲和无菌袋到土豆地采集较细碎土壤
2、样品稀释在无菌纸上称取样品1g,放入100mL无菌水的三角瓶中,手摇10分钟使土和水充分混合。用1mL无菌吸管吸取0.5mL注入4.5mL无菌水试管中,梯度稀释至10-6。
3、分别用稀释样品的同支吸管分别依次从10-6、10-5、10-4样品稀释液中,吸取lmL,注入无菌培育皿中,然后倒入灭菌并溶化冷至50℃左右的固体培育基,当心摇动冷凝后,倒置于37℃温箱中培育48小时。培育基的配制—称取蛋白胨1.0g;NaCl0.5g;牛肉膏0.3g;琼脂1.5g;pH6.4左右;100ml水定容。
4、初步鉴定对多种菌进行形态特征的观看,简洁染色、革兰氏染色以及芽孢染色观看,记录结果。
5、α-淀粉酶鉴定
1)试验原理:
细菌能否产生α-淀粉酶主要依据是鉴定有能否分解淀粉。α-淀粉酶该酶可以把淀粉分解,因淀粉遇碘变蓝色,如菌落四周有无色圈,说明该菌能分解淀粉
2)步骤:
将培育的的各种待测菌种接种在含有2%淀粉液的牛肉膏蛋白胨培育基中,培育基的配制—称取蛋白胨1.0g;NaCl0.5g;牛肉膏0.3g;可溶性淀粉0.2g;琼脂1.5g;pH6.4左右;100ml水定容(注:先将可溶性淀粉加少量蒸馏水调成糊状,再加到溶化好的培育基中,调匀),倒置于37℃温箱中培育18-24小时后,取出平板,向皿中注入l滴Lugol氏碘液,因淀粉遇碘变蓝色,如菌落四周有无色圈,说明该菌能分解淀粉。
6、纯化从平板上选取淀粉水解圈直径与菌落直径之比较大的菌落,用接种环沾取少量培育物至斜面上,并进行2-3次划线分别,挑取单菌落至斜面上,培育后观看菌苔生长状况并镜检验证为纯培育。
简洁生物试验设计方案范文2试验名称:土壤中分别产生α-淀粉酶的菌种
一.试验目的
1、学习从土壤中分别、纯化微生物的原理与方法。
2、学习、把握微生物的鉴定方法。
3、对提取的土样进行微生物的分别、纯化培育,并进行简洁的形态鉴定
4、对简洁鉴定后的微生物进行生理生化鉴定并由鉴定结果查伯杰氏手册以确定分别出微生物的品种。
二.试验原理
α-淀粉酶是一种液化型淀粉酶,它的产生菌芽孢杆菌,广泛分布于自然界,尤其是在含有淀粉类物质的土壤等样品中。
从自然界筛选菌种的详细做法,大致可以分成以下四个步骤:采样、增殖培育、纯种分别和性能测定。
1、采样:即采集含菌的样品
采集含菌样品前应调查讨论一下自己准备筛选的微生物在哪些地方分布最多,然后才可着手做各项详细工作。在土壤中几乎各种微生物都可以找到,因而土壤可说是微生物的大本营。在土壤中,数量最多的当推细菌,其次是放线菌,第三霉菌,酵母菌最少。除土壤以外,其他各类物体上都有相应的占优势生长的微生物。例如枯枝、烂叶、腐土和朽木中纤维素分解菌较多,厨房土壤、面粉加工厂和菜园土壤中淀粉的分解菌较多,果实、蜜饯表面酵母菌较多;蔬菜牛奶中乳酸菌较多,油田、炼油厂四周的土壤中石油分解菌较多等。
2、增殖培育(又称丰富培育)
增殖培育就是在所采集的土壤等含菌样品中加入某些物质,并制造一些有利于待分别微生物生长的其他条件,使能分解利用这类物质的微生物大量繁殖,从而便于我们从其中分别到这类微生物。因此,增殖培育事实上是选择性培育基的一种实际应用。
3、纯种分别
在生产实践中,一般都应用纯种微生物进行生产。通过上述的增殖培育只能说我们要分别的微生物从数量上的劣势转变为优势,从而提高了筛选的效率,但是要得到纯种微生物就必需进行纯种分别。
纯种分别的方法许多,主要有:平板划线分别法、稀释分别法、单孢子或单细胞分别法、菌丝尖端切割法等。
三.试验材料
1、器材:
小铁铲和无菌纸或袋、培育皿、载玻片、盖玻片、一般光学显微镜、量筒、滴管、吸水纸、无菌水试管(每支4.5mL水)、烧杯、三角瓶、电炉、玻璃棒、接种环、镊子、搪瓷杯、恒温培育箱、高温灭菌锅、移液枪(枪头)、天平、滤纸、pH试纸等。2、试剂:
配制牛肉膏蛋白胨培育基的原料(牛肉膏、NaCl、琼脂、蛋白胨)、Lugol氏碘液、0.2%可溶性淀粉液、结晶紫染液、番红染液、碘液、95%乙醇、0.5%番红水染液、无菌水等。3、土样:取自桂林师专1栋宿舍楼后面土壤,地下10cm左右。
四.试验方法步骤
1、采集土样带上小铁铲和无菌袋到土豆地采集较细碎土壤
2、样品稀释在无菌纸上称取样品1g,放入100mL无菌水的三角瓶中,手摇10分钟使土和水充分混合。用1mL无菌吸管吸取0.5mL注入4.5mL无菌水试管中,梯度稀释至10。
3、分别用稀释样品的同支吸管分别依次从10、10、10样品稀释液中,吸取lmL,注入无菌培育皿中,然后倒入灭菌并溶化冷至50℃左右的固体培育基,当心摇动冷凝后,倒置于37℃温箱中培育48小时。培育基的配制—称取蛋白胨1.0g;NaCl0.5g;牛肉膏0.3g;琼脂1.5g;pH6.4左右;100ml水定容。
4、初步鉴定对多种菌进行形态特征的观看、简洁染色、革兰氏染色以及芽孢染色观看,记录结果。
5、α-淀粉酶鉴定
6、1)试验原理:
细菌能否产生α-淀粉酶主要依据是鉴定有能否分解淀粉。α-淀粉酶该酶可以把淀粉分解,因淀粉遇碘变蓝色,如菌落四周有无色圈,说明该菌能分解淀粉
2)步骤:
将培育的的各种待测菌种接种在含有0.2%淀粉液的牛肉膏蛋白胨培育基中,培育基的配制—称取蛋白胨1.0g;NaCl0.5g;牛肉膏0.3g;可溶性淀粉0.2g;琼脂1.5g;pH6.4左右;100ml水定容(注:先将可溶性淀粉加少量蒸馏水调成糊状,再加到溶化好的培育基中,调匀),倒置于37℃温箱中培育18-24小时后,取出平板,向皿中注入l滴Lugol氏碘液,因淀粉遇碘变蓝色,如菌落四周有无色圈,说明该菌能分解淀粉。
8、纯化从平板上选取淀粉水解圈直径与菌落直径之比较大的菌落,用接种环沾取少量培育物至斜
面上,并进行2-3次划线分别,挑取单菌落至斜面上,培育后观看菌苔生长状况并镜检验证为纯培育。
四.试验结果
五.个人总结
1、在分别试验中,原土样的10-3g/mL浓度中得到5种不同的能够分解淀粉的菌落,经初步淀粉酶试验,1号菌的淀粉分解圈大,2号、3号、4号次之,5号最小。
2、在淀粉酶试验中,3号培育基感染杂菌,消失不同菌落,故后面不再对其处理;其它菌种均得到较纯的单菌落,淀粉酶试验结果不变,与上面相同。
3、各种菌落的革兰氏染色中大部分为阳性,菌体形态多为椭圆形趋于杆状,只有4号菌为阴性;5号菌菌落难以挑故过没能进行染色。
4、1号、2号、4号经划线纯化均得到单菌落,5号菌没能划出单菌落;综合分析可以判定,1号菌即为优良的淀粉酶产生菌,即为枯草芽孢杆菌。
5、本次试验遇到一件让人颇为尴尬的事情,那就是试验所用酒精灯的酒精被煤油替换,连消毒棉也是煤油的,由于使用煤油产生大量的黑烟,导致大量颗粒吸附在试验器具上,其气味也难以忍受,故在实际操作中削减了使用,引起带来的影响尚不明确。
简洁生物试验设计方案范文3一、试验名称:临时装片、切片、涂片的制作、观看和指导
二、试验目标:让同学通过独立自主的制作临时装片、切片、涂片的方法来感知细胞的形态和结构,从而使同学对细胞达到肯定的熟悉,为以后的教学作下铺垫。制作临时装片的胜利,对提高同学的生物学爱好和生物科学素养都起着重要的作用。同时,这样熬炼了同学的动手力量,也培育了同学的自己动脑思索的力量。
三、试验方法及步骤:
(一)试验材料:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、解剖针、毛笔、滴管、擦镜纸;清水、碘酒溶液;西红柿、空心莲子草、洋葱;创可贴(切片时可能会有人受伤)
(二)试验步骤:
1、临时装片的制作
⑴预备
擦用擦镜纸把载玻片和盖玻片擦拭洁净
改进:将干净的纱布改为擦镜纸,擦拭玻片时要留意用左手的拇指和食指夹住玻片的两端,右手的拇指和食指衬垫上干净的纱布后,夹在玻片两面,同时擦拭,以防将玻片损坏,滴用滴管在载玻片中央滴1-2滴清水
改进:在制片时至少滴2滴清水,这样加盖玻片时,盖玻片下的空间中水较充盈,气泡就少,细胞的活性也较好取用刀片在洋葱表面上划“井”字(大约0.5cm2),用镊子撕取外表皮
问题:由于叶表皮皱缩、同学不娴熟等,导致撕下的表皮薄膜过厚,在显微镜视野中难以找到抱负的观看对象,致使试验效果较差。
改进:首先将洋葱鳞片叶切成宽1.0-1.5cm的纵向窄条,再用刀片将洋葱鳞片叶内侧表皮划成小块(切忌划透),然后用镊子夹住宅划表皮的边缘,将其轻轻取下(洋葱鳞片叶内侧表皮易与叶肉分别,操作简便)即可。这一改进降低了试验操作难度,提高了制片质量。放把撕取的表皮浸入载玻片上的水滴中,并展平
⑵盖盖玻片
盖用镊子夹起盖玻片,使它的一边先接触载玻片上的水滴,然后缓缓地放下,盖在要观看的材料上
⑶染色
染:将玻片倾斜10度左右,从高的一侧滴入碘液,让其自己流入玻片。问题:染色时书中要求是把1-2滴碘液滴在盖玻片的一侧,然后用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引,使染液浸润标本的全部。然而,部分同学可能将盖玻片下全部水全部吸干,做出的装片会有许多的大气泡,且气泡将细胞掩盖了,或者有人将气泡误认为细胞。
改进:染色时不用吸水纸吸水,而是将玻片倾斜10度左右,这个角度肯定不能太大,太大水就会流出盖玻片下的小空间,然后从较高一侧的盖玻片与载玻片的缝隙往里滴碘液,让碘液自己流进盖玻片下,假如有液体流到盖玻片外,用吸水纸擦拭,但肯定要强调不能从盖玻片边缘吸水,盖玻片四周肯定要有充盈的液体,这样才不会消失大气泡。
⑷镜检
用显微镜观看
2、临时切片的制作
⑴选材
选择软硬适度的材料,先截成适当长度,一般以20-30mm为宜(便于手持即可),材料太软,可用马铃薯块茎、胡萝卜根或肥皂将欲切取的材料夹住一起进行切片,本试验用空心莲子草,可直接用于切片。
⑵切片
用三只手指夹住空心莲子草,(使其高于手指,右手持刀片(刀片用水润湿),将空心莲子草削去一层,形成平面,刀口向内,与断面平行,以匀称的动作,自左前方向右后方快速拉刀,滑行切片(留意要整个臂部用力,而不要腕部用力)。
⑶镜检
如此连续动作,切下一些薄片,然后用毛笔将最薄的几片材料移至滴有一滴清水的干净的载
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