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文档简介
岗位演练白蛋白溶液透析法浓缩1任务二抗HER2单克隆抗体纯化课前查阅资料,了解白蛋白及其性质。查阅设计《白蛋白溶液透析法浓缩操作记录》,在任务实施过程中同步填写。使用透析浓缩技术,将白蛋白溶液进行10倍体积浓缩。设计实操设计(一)任务描述2(二)实训材料1.材料、试剂白蛋白溶液(采用紫外法测定蛋白浓度)、聚乙二醇(PEG)6000、透析袋(500~1000)2.仪器设备分析天平(感量0.01g)、磁力搅拌器、移液枪等3(三)实训操作4步骤一配制透析液配制35%浓度的聚乙二醇(PEG)6000溶液。步骤二制备浓缩蛋白液(1)透析袋的前处理。戴好PE手套,剪取适当长度的透析袋(确保样品装入1/2体积即可)。先用50%乙醇煮30min,再用2%碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(pH8.0)煮沸10min。用50℃蒸馏水洗冲2~5min,然后置于4℃蒸馏水中待用。若长时间不用,可入20%乙醇中,以防长菌。(三)实训操作5步骤二制备浓缩蛋白液(2)透析组装装置透析组装装置(三)实训操作6步骤二制备浓缩蛋白液(3)透析袋一端用透析袋夹夹紧,或用线绳扎紧。接下来对透析袋扎紧端进行验漏。方法是,由开口端灌满纯化水,封闭开口端,用手指轻压透析袋,检查是否漏水。(4)取白蛋白溶液放入透析袋中,将开口同样夹紧,放入盛有透析液的烧杯中。(5)每30min观察透析袋中溶液减少情况。(6)当透析带内溶液减少到约为原体积1/10时,停止透析,用移液枪小心回收浓缩液。采用紫外法测定蛋白浓度。(7)用后的透析袋用生理盐水浸泡以去掉蛋白,并用蒸馏水清洗干净,然后置20%乙醇中保存。(四)任务分析与总结(1)离子层析和疏水层析有什么不同?(2)透析袋浓缩的原理是什么?(3)透析袋除了可以用作浓缩外,还可以用来脱盐,请依据浓缩原理简单设计一个脱盐方案。(4)
的液流方向与超滤膜方向平行,阻塞物会被液流及时冲走,极大延缓了滤膜阻塞,是目前工业生产中应用最广泛的浓缩方法之一。(5)以下哪种技术可以用来去除溶液中的细菌()?
A.微孔过滤技术B.离心技术C.深层过滤技术7勿以恶小而为之,勿以善小而不为。惟
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