天然药物化学实验省公开课一等奖全国示范课微课金奖课件

天然药品化学试验枣庄学院生命科学系天然药品化学试验枣庄学院生命科学系王占一助教第1页试验一槐米中芦丁提取工艺第2页一、试验目标

①经过芦丁提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物原理及操作。②经过芦丁检识，了解黄酮类化合物定性研究普通程序和方法。

第3页二、试验原理

对酸性、碱性或两性化合物，可加入酸或碱以调整溶液PH值，改变分子存在状态（游离型或离解型），从而改变溶解度而实现分离。包含酸/碱法、碱/酸法。第4页一些酚酸性类物质如黄酮、蒽醌类等用碱性水从药材中提出后，加酸调至酸性，酚酸性成份能够从水中析出。（碱/酸法）第5页三、试验仪器与试验材料

1、试验仪器玻璃棒布氏漏斗滤纸

电子天平电热套烧杯2、试验材料槐花米石灰乳硼砂盐酸水PH试纸第6页四、试验方法1.槐米药材判定与前处理2.槐米中黄酮类化合物提取（见下列图）第7页芦丁提取与分离流程图第8页五、试验指导

1．本试验讲解关键点及注意事项①芦丁提取方法，重点介绍碱-酸法原理及注意事项。②调温电热套使用说明：使用方法：接通电源，电源指示灯亮，然后打开调压旋钮开关，调整使用中，加热套功率伴随调整方位变动，产生不一样功率，工作电压表也伴随显示不一样示数。顺时针调整会逐步增大功率，增加使用温度，不然反之。第9页③调温电热套使用注意事项：1）第一次使用时，电热套内芯会出现烟雾，那是玻璃丝外表油脂在挥发。通电数次后就不会出现这种现象，即可正常使用。2）本产品遇潮后要迟缓升温，使其干燥后即可恢复良好绝缘性能。3）如长时间不用请放于干燥通风处。第10页2．试验汇报要求①槐米药材判定和前处理方法。②碱-酸法提取芦丁原理及提取工艺流程。第11页3．思索题①中药材前处理普通分为哪几个程序？②在芦丁提取工艺中，为何加石灰水而不是加氢氧化钾？③在芦丁提取工艺中，为何要加入硼砂水溶液？第12页六、参考书1.吴立军主编《天然药品化学》（第五版），人民卫生出版社，年2.梁敬钰主编《天然药品化学试验与指导》，中国医药科技出版社，年3.蔡少青主编《生药学》（第五版），人民卫生出版社，年4.崔福德主编《药剂学》（第六版），人民卫生出版社，年第13页试验二槐米水提物浓缩和干燥工艺第14页一、试验目标

①学习应用旋转蒸发仪浓缩提取液原理及操作。②学习应用水域锅干燥药品浓缩液基本操作。第15页二、试验原理

1.蒸发浓缩可在沸点或低于沸点时进行，又可在减压或常压下进行，为提升蒸发效率，生产上蒸发浓缩均采取沸腾蒸发。2.干燥过程分成两阶段，恒速阶段和降速阶段。在恒速阶段，干燥速率与物料湿含量无关；而在降速阶段，干燥速率近似地与物料湿含量成正比。第16页三、试验仪器与试验材料

1、试验仪器旋转蒸发器恒温水浴锅烧杯坩埚玻璃棒试剂瓶2、试验材料槐米水提液盐酸PH试纸滤纸滑石粉第17页四、试验方法1、槐米药材提取液减压浓缩工艺流程，采取旋转蒸发仪对提取液进行浓缩。2、槐米药材浓缩液常压干燥工艺流程，选取水浴锅对浓缩液进行干燥。第18页五、试验指导

1．本试验讲解关键点及注意事项①旋转蒸发仪基本操作方法：1）用胶管与冷凝水龙头连接，用真空胶管与真空泵相联。

2）先将水注入加热槽。最好用纯水，自来水要放置1-2天再用。

3）调正主机角度：只要松开主机和立柱连结螺钉。主机即可在0-45度之间任意倾斜。

第19页4）接通冷凝水，接通电源220V/50Hz，与主机连接上蒸发瓶（不要放手），打开真空泵使之达一定真空度松开手。

5）调正主机高度：按压下位于加热槽底部压杆，左右调整弧度使之到达适当位置后手离压杆即可到达所需高度。

第20页6）打开调速开关，绿灯亮，调整其左侧旁转速旋钮，蒸发瓶开始转动。打开调温开关，绿灯亮，调整其左侧旁调温旋钮，加热槽开始自动温控加热，仪器进入试运行。温度与真空度一到所要求范围，即能蒸发溶剂到接收瓶。

7）蒸发完成，首先关闭调速开关及调温开关，按压下压杆使主机上升，然后关闭真空泵，并打开冷凝器上方放空阀，使之与大气相通，取下蒸发瓶，蒸发过程结束。

第21页

②旋转蒸发仪操作注意事项：

1）玻璃件应轻拿轻放，洗净烘干。

2）加热槽应先注水后通电，不许无水干烧。

3）所用磨口仪器安装前需均匀涂少许真空脂。

4）珍贵溶液应先做模拟试验。确认本仪器适用后再转入正常使用。

5）准确水温用温度计直接测量。

6）工作结束，关闭开关，拔下电源插头。第22页③水浴锅基本操作方法：1）往锅内注入洁净水，水位最少达电热管上方1cm处；2）接通电源，打开开关开始加热；3）旋转温度调整旋钮，使旋钮上刻度线指向工作所需温度刻度；4）工作完成将水放干。第23页④水浴锅使用注意事项：1）用前必须先注入水，最低水位不得低于电热管以上1cm，水位过低会造成电热管表面温度过高而烧毁；使用过程要随时注意水位；2）假如需用沸水浴，加水量不宜过多，以免沸腾时溅出；第24页3）未加水到适当位置前，切勿接通电源；4）温度控制器不可随意拆卸；5）外壳必须接地；6）控制箱内部应保持干燥，以防因受潮而造成漏电；应随时注意水箱是否有渗漏现象。第25页2．试验汇报要求

①旋转蒸发仪基本操作方法及注意事项。

②水浴锅基本操作方法及注意事项。第26页3．思索题①中药材提取液浓缩普通有那些方法，采取减压浓缩有什么好处？②中药材浓缩液干燥普通有那些方法，对于受热易分解或变质化合物应采取那些办法？第27页六、参考书1.吴立军主编《天然药品化学》（第五版），人民卫生出版社，年2.梁敬钰主编《天然药品化学试验与指导》，中国医药科技出版社，年3.崔福德主编《药剂学》（第六版），人民卫生出版社，年第28页试验三芦丁粗提物显色反应和PC判别第29页一、试验目标

①学习黄酮类化合物理化性质和惯用显色方法。

②学习用纸色谱法分离和判定黄酮类化合物混合液。第30页二、试验原理

黄酮类化合物颜色反应多与分子中酚－OH及γ－吡喃酮环相关。色原酮2-苯基色原酮第31页纸色谱法可视为溶质在固定相和流动相之间连续分配(萃取)过程。因为组分在两相间分配系数不一样，因而随展开剂迁移速度不一样而到达分离目标。第32页三、试验仪器与试验材料

1、试验仪器滴管试管比色管紫外分辨仪玻璃棒2、试验材料乙醇0.1%NAOH10%NAOHFeCl3新华1号层析滤纸25%醋酸水溶液硫酸铝试剂锌粒氨水滤纸第33页四、试验方法1.HCl-Zn粉反应：在样品乙醇或甲醇溶液中加入少许镁粉振摇，再滴加几滴浓盐酸。（必要时在水浴上加热）2.铝盐反应：在样品乙醇或甲醇溶液中加入几滴AL2（SO4）3试剂，观察颜色改变，并在紫外灯下观察有没有荧光现象。

第34页3.FeCl3反应：在样品乙醇或甲醇溶液中加入几滴FeCl3试剂，观察颜色改变。

4.性试剂显色反应：在样品乙醇或甲醇溶液中加入几滴NAOH试剂，观察颜色改变。

5.纸色谱（PC）:支持剂为新华1号层析滤纸；流动相为25%醋酸水溶液；显色剂为氨水。第35页五、试验指导

1．本试验讲解关键点及注意事项①试管及滴定管常规操作方法。

②紫外灯下观察荧光现象基本操作方法及注意事项。

③层析纸条应预防污染，其工作部分不能用手触及。

④点样毛细管不要弄错。先在碎滤纸上进行点样练习，样点与样点和边缘与样点之间应有同等宽度间隙。第36页⑤纸层析纸条和层析管均要垂直安放，层析管可置于试管架上或自由夹固定，纸条不能触及管壁。样点与展开剂液面最少相距0.5cm。

⑥层析完成，取出纸条时，不要忘记马上在溶剂前沿处划记号。样点至溶剂前沿距离以7～8cm为宜。

⑦用电吹风显色时，不可太近或过热，以免影响斑点及其颜色观察。第37页2．试验汇报要求①向供试液中加入显色试剂后颜色改变，以及有没有荧光反应。

②纸色谱法分离化合物基本操作方法，以及色谱图分析。第38页3．思索题①黄酮类化合物显色反应有哪些，在物质判定中有何用途？②应用纸色谱分离黄酮类化合物，怎样能做到使斑点清晰？③纸层析时，样点不能接触或浸入到展开剂液面以下，为何？④色谱分离技术中，Rf值计算有何意义，本试验中Rf值大约是多少？第39页六、参考书1.吴立军主编《天然药品化学》（第五版），人民卫生出版社，年2.梁敬钰主编《天然药品化学试验与指导》，中国医药科技出版社，年3.李发美主编《分析化学》（第六版），人民卫生出版社，年第40页试验四六味地黄丸质量标准研究第41页一、试验目标

①学习中药质量控制方法，中药质量标准制订方法。②学习六味地黄丸质量标准制订依据。③学习试验用硅胶板铺板技术。第42页二、试验原理

六味地黄丸

【处方】

熟地黄184g

山茱萸(制)92g

牡丹皮69g

山药92g

茯苓69g

泽泻69g

蜂蜜(炼)550g滑石粉石蜡油---------------------------------------------------------------1000g第43页【质量要求】1）水分2）重量差异3）装量差异4）溶散时限5）微生物程度【判别】取本品乙醚提取液作为供试品溶液，另取丹皮对照药材作成对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典年版一部附录ⅥB)试验，供试品色谱中，在与对照品色谱对应位置上，显相同蓝褐色斑点。

第44页三、试验仪器与试验材料

1、试验仪器索氏提取器旋转蒸发器烧杯漏斗展开缸显色瓶超声波提取器玻璃棒试剂瓶电子天平锥形瓶研钵玻璃板布氏漏斗真空泵抽滤瓶

2、试验材料六味地黄丸牡丹皮乙醚丙酮氯化铁显色剂硅胶滤纸环己烷醋酸乙酯乙醇乙酸CMC-Na玻璃板

第45页四、试验方法（1）取本品20丸，在电子天平下分别称取各丸质量，统计，求出平均值，并计算相对标准偏差。（2）硅胶G薄层板制备1.CMC－Na溶液配置：普通其浓度为0.3～0.5％，依据自己经验而定（我习惯用0.4％）。详细方法以下：先将预用水加热至60~70℃，然后加入CMC－Na，边加边搅拌，使之溶解，即得。

第46页2.与硅胶混合：CMC－Na溶液与硅胶百分比为3：1。详细方法以下：先将CMC－Na溶液倒入自动搅拌器或研钵中，然后加入硅胶，搅匀即可。若是在研钵中研磨，按一个方向研磨，自下而上，然后自上而下，以赶尽气泡为佳。

第47页3.铺板：手动或机械。手动铺出板薄厚与所加混合后硅胶量相关，而机械铺出板薄厚与机械所选取钢板相关，可依据需要来定。此过程中最关键是板子边缘铺得好坏，手动铺板一定要将玻璃板边缘硅胶涂匀（我习惯用两头掂法，即板下方中间垫一物体，两头悬空，两手均匀掂动）。而机械铺板要注意板与板之间平整性，或者由高到低排列。

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4.晾干：自然晾干。

5.活化：将晾干板子在105℃烘箱中干燥30min，取出，放入干燥器中，备用。第49页（3）取本品9g，研碎，加硅藻土4g，研匀。加乙醚120ml，用索氏提取器低温回流提取2小时，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮10g，加乙醚20ml在超声波提取器上震荡提取30分钟，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。照薄层色谱法(中国药典年版一部附录ⅥB)试验，吸收上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷一醋酸乙酯(3∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清楚。供试品色谱中，在与对照品色谱对应位置上，显相同蓝褐色斑点。

第50页五、试验指导

1．本试验讲解关键点及注意事项

①中药质量标准制订及研究方法中各个细节问题。②电子天平常规操作方法。③索氏提取器基本操作方法及注意事项。④硅胶板制作基本步骤和注意事项。第51页⑤薄层板应预防污染，其工作部分不能用手触及。⑥点样毛细管不要弄错。先在废板上进行点样练习。点样

除另有要求外，用点样器点样于薄层板上，普通为圆点，点样基线距底边2.0cm，样点直径及点间距离同纸色谱法,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检