标志产品之冬虫夏草技术规范汇录109

标志产品之冬虫夏草技术规范汇录2/2冬虫夏草冬虫夏草技术规范汇录 目录TOC\o"1-2"\h\z11452冬虫夏草采挖作业技术规程 331357冬虫夏草保护采挖技术规程 1426620地理标志产品西藏那曲冬虫夏草 207018冬虫夏草规格等级 3119668北冬虫夏草工厂化生产技术规程 3622311冬虫夏草培植技术规程 465991北冬虫夏草生产技术规程 5518475地理标志产品青海冬虫夏草 7329642实验室冬虫夏草真菌--中国被毛孢真菌分离技术规程 8416349实验室冬虫夏草蝙蝠蛾卵的孵化技术规程 895313实验室冬虫夏草真菌--中国被毛孢真菌保存技术规程 9414571实验室冬虫夏草子囊孢子采集、净化、保存技术规程 10114681实验室冬虫夏草寄主幼虫的人工饲养技术规程 104冬虫夏草采挖作业技术规程来源：DB54/T0164—20191范围本标准主要规定了冬虫夏草采挖准备、采挖技术、环境保护与采挖人员安全、采挖统计、采挖监督检查等具体规定。本标准适用于西藏自治区境内从事冬虫夏草的采挖活动。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。中华人民共和国草原法中华人民共和国野生植物保护条例《西藏自治区实施<中华人民共和国草原法>办法》(西藏自治区第八届人民代表大会常务委员会公告7号)《西藏自治区冬虫夏草采集管理暂行办法》（西藏自治区人民政府令第70号）3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1冬虫夏草冬虫夏草菌侵染青藏高原高山草甸蝙蝠蛾幼虫而形成的菌虫复合体。3.2冬虫夏草子座真菌菌丝聚集形成的组织，形态、大小变化多样，一般呈垫状、棒状和柱状等，在子座内部或上部发育形成有性繁殖结构,与冬虫夏草虫体相连露出地面的部分。3.3回填对采挖冬虫夏草后的土壤及时填平，压实的行为。3.4扎营点冬虫夏草采挖者进入某山区统一住扎的临时居住点。4采挖原则坚持资源保护与合理利用统筹协调，实现资源可持续利用原则：a)实行依法保护、科学规划、合理利用的方针；b)以现有冬虫夏草产区（以下简称产区）为基础，因地制宜，统筹规划，分类指导，科学采挖；c)生态效益、经济效益、社会效益相结合。5采挖基本要求5.1申办采挖许可证5.1.1采挖许可证采挖许可证是采挖者采挖冬虫夏草的合法凭证,由产区县（区）人民政府行政职能部门按照国家和自治区相关规定格式印制,乡（镇）级人民政府统一核发。5.1.2申请采挖许可证持有产区所在县（区）、乡（镇）农牧民有效身份证件，且身体素质符合采挖条件者，可向所在乡（镇）人民政府申请办理采挖许可证。5.1.3采挖许可证发放乡（镇）人民政府对采挖申请人所报材料进行审核后，符合条件的纳入采挖许可名单，进行统一公示，如无异议，则向申请人发放采挖许可证，并造册发放登记。5.2采挖人员扎营点选择相对固定、安全的临时扎营点，统一安排搭建临时扎营帐蓬、饮用水源、公共厕所、垃圾处理等设施。严格控制搭建扎营设施对周围环境造成破坏。5.3培训教育县、乡（镇）政府相关部门应对采挖人员进行培训教育，主要内容包括：a）生态环境保护知识教育；b）采挖标准及监督验收；c）遵纪守法及社会治安教育；d）安全知识教育。6采挖技术6.1采挖时间根据海拔高度和气候变化，各产区的采挖时间有所不同。按照规定应对采挖期进行严格控制，一般每个采挖区域的采挖期限定为40天-45天左右，最长不应超过50天。具体请参照表1。表1冬虫夏草采挖时间表采挖地域采挖时段采挖天数昌都市5月上旬-6月下旬45-50那曲市5月中旬-6月下旬45-50林芝市4月下旬-6月上旬40-50拉萨市5月中旬-6月下旬40山南市5月上旬-6月下旬40日喀则市5月上旬-6月下旬406.2采挖标准当冬虫夏草子座露出地面2cm-3cm后即可采挖，严禁采挖子座伸长变褐和膨大后长度超过8厘米的冬虫夏草。6.3采挖方式采挖工具在距离草头7cm左右，连草皮挖9cm2左右，取出冬虫夏草后，回填，恢复原貌。采挖产生的裸露面积不得超过30—50cm2。6.4采挖工具采挖工具由木质手把和金属锄头组成，切面宽度不得超过3cm，体积较小，重量较轻，便于携带，为采挖冬虫夏草专用工具。7环境保护7.1环境保护主管单位产区县（区）、乡（镇）人民政府行政管理部门依据国家及自治区相关规定，具体落实产区环境保护工作。7.2采挖区域的环境保护要求严禁在冬虫夏草生长区域采伐灌木林、捕猎野生动物、乱扔垃圾。禁止机动、非机动车辆离开公路开进冬虫夏草生长区域。7.3采挖扎营点的环境恢复由乡（镇）政府部门负责，随时清运处理扎营点生活垃圾。采挖人员撤出临时扎营点时，应恢复扎营点搭建之前的环境原貌。7.4产地生境保护严禁在冬虫夏草生长区域及周围随意采挖土壤及草皮。7.5产地寄主昆虫保护7.5.1禁止在西藏蝠蛾属昆虫成虫、羽化、产卵期进行过度放牧等人为活动。7.5.2未经相关部门批准，严禁采集蝠蛾属昆虫成虫、蛹、幼虫、卵。8采挖人员安全产区乡（镇）人民政府建立采挖人员人身安全防范及疫情疫病防治制度，主要内容包括：a）遇到雷雨天气时做好人员的避雷防护措施，避免造成人身伤亡；b）未成年和年满60周岁以上的老年人员不得单独上山进行采挖活动，以防迷失或出现意外事故；c）建立医疗服务站，负责处理采挖区发生的疫病疫情或意外伤害；d）对帐篷、厕所、垃圾堆放点进行定期或不定期的消毒处理。9冬虫夏草采挖统计9.1统计制度各级政府行政职能部门会同统计部门建立冬虫夏草采挖统计制度，对冬虫夏草采挖活动中的采挖时间、地点、人数、户数、数量等进行分级统计。按照附录A《冬虫夏草采挖统计表》统计。9.2统计方式9.2.1采挖扎营点统计以扎营点为单位，由乡镇人民政府专职人员进行统计，统计周期为每周3次-5次。9.2.2乡（镇）级统计以产区乡（镇）为单位，对本乡（镇）所辖扎营点汇总统计。统计周期为每采挖期一次（每年一次），并在采挖结束后5个工作日内，将统计数据报县级草原监理和统计部门。9.2.3县（区）级统计由县（区）级草原监理部门会同同级统计部门汇总统计后，分别报上一级相关部门。上报时间为每年采挖期结束后10个工作日之内。9.2.4地、市级统计由地、市级草原监理部门会同同级统计部门汇总统计后，分别报自治区相关部门，上报时间为每年采挖期结束后的15个工作日之内。10监督与验收10.1监督主管单位县、乡（镇）人民政府对整个采挖活动进行监督检查（以下简称督查），并在采挖结束后及时验收。10.2督查产区县（区）、乡（镇）政府行政主管部门建立采挖作业督查制度，成立督查组，实施督查工作。主要督查工作如下：a）产区县（区）级人民政府组织人员，到冬虫夏草采挖一线进行督查，并会同采挖所在乡（镇）政府组织乡（镇）督查组。b）督查组的主要职能是指导和督查乡镇所辖各扎营点的采挖作业活动，督查面应达到60%以上，并填入附录B《冬虫夏草采挖督查表》。c）督查组对本规程执行不到位甚至存在严重问题的，依据国家及自治区相关规定进行处理。10.3验收10.3.1验收方式县（区）所辖各乡（镇）督察组负责冬虫夏草采挖作业验收工作，并进行交叉验收。10.3.2抽查验收督查组对扎营点、采挖作业区域进行现场抽查，抽查扎营点不少于50%，抽查采挖作业区域应不少于总采挖点的30%。根据现场抽查情况及附录B《冬虫夏草采挖作业督查表》的记录，对照附录C《冬虫夏草采挖验收标准表》进行评分。10.3.3验收标准验收总分为100分，达到80分以上为合格，由县（区）级人民政府行政主管部门颁发采挖作业合格证。合格证由自治区行政主管部门统一印制核发。10.3.4奖惩根据督查验收结果，县（区）、乡（镇）人民政府应当按照当地政府部门制定的冬虫夏草采挖管理办法予以奖惩。11档案管理乡（镇）以上政府行政主管部门应分级建立冬虫夏草采挖作业档案。乡（镇）级政府部门对冬虫夏草申请采集人员、发放采集证件、建立采挖扎营点、采挖作业督查、统计、验收等资料进行分类归档管理。附录A（资料性附录）冬虫夏草采挖统计表表A.1xxxx-xx-xx冬虫夏草采挖统计表（扎营点）表A.2xxxx-xx-xx冬虫夏草采挖统计表（乡、镇）表A.3xxxx-xx-xx冬虫夏草采挖统计表（县、区）表A.4xxxx-xx-xx冬虫夏草采挖统计表（地、市）表A.5xxxx-xx-xx冬虫夏草采挖统计表（西藏自治区）附录B（资料性附录）冬虫夏草采挖督查表表B.1冬虫夏草采挖督查表扎营点名称：xxxx-xx-xx附录C（资料性附录）冬虫夏草采挖验收标准表表C.1冬虫夏草采挖验收标准冬虫夏草保护采挖技术规程来源：DB63/T701—20231范围本文件规定了冬虫夏草的保护采挖的术语和定义、原则和要求、采挖技术、环境保护及监督等内容。本文件适用于从事冬虫夏草的保护采挖活动。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1冬虫夏草冬虫夏草菌侵染蝙蝠蛾幼虫而形成的虫菌复合体。3.2产区适合冬虫夏草生长的区域。3.3回填对采挖冬虫夏草后翘起的草皮层及时复位填平、压实的行为。3.4保护采挖在主管部门的统一规划下有计划开展的冬虫夏草采挖。4原则遵循“依法保护、合理利用、分类指导、科学采挖”原则。5要求5.1人员5.1.1采挖人员应持证采挖。应对采挖人员进行培训教育，内容包括但不限于：——生态环境保护相关法律法规、部门规章及政策等；——安全知识；——采挖技术。5.2居住点采挖期间：临时居住点应相对固定、安全，统一设置帐蓬、饮用水源、公共厕所及垃圾处理等设施，且不应对周边环境造成破坏。采挖结束：临时居住点的环境应恢复原貌。5.3采挖对象子座伸长变褐及膨大的冬虫夏草不准许采挖。6采挖技术6.1采挖地区及时间根据冬虫夏草的生长情况，不同地区应按照以下规定进行采挖。——海南州：4月下旬～6月上旬；——黄南州：5月上旬～6月中旬；——玉树州、果洛州：5月中旬～6月下旬；——其它产区：4月下旬～5月中旬。6.2采挖工具采挖用工具切面宽度不超过3cm。6.3采挖方式采挖工具在距离草头7cm左右，连草皮挖9cm左右，采挖产生的裸露面积不超过50cm2，取出冬虫夏草后回填，坑应填平、踩实。7生态保护7.1植被不应在冬虫夏草生长区域及周围采挖灌草植被。7.2土壤不应在冬虫夏草生长区域及周围采挖土壤。7.3寄主昆虫7～8月份为寄主昆虫蝙蝠蛾羽化、产卵期，每天15:00后不宜放牧。未经批准，不准许采集寄主昆虫蝙蝠蛾卵、幼虫、蛹及成虫。7.4交通工具各类交通工具不应驶入冬虫夏草生长区域。8监督检查宜对整个采挖活动进行监督检查，监督检查内容包括但不限于附录A。附录A（资料性）冬虫夏草采挖监督检查表表A.1给出了监督检查的内容。表A.1冬虫夏草采挖监督检查表参考文献[1]中华人民共和国青藏高原生态保护法，2023[2]中华人民共和国草原法，2013年修订[3]中华人民共和国野生植物保护条例，2017年修订[4]青海省实施<中华人民共和国草原法>办法，2007[5]甘草和麻黄草采集管理办法，第四章、第七章，2001[6]青海省人民政府办公厅关于加强冬虫夏草资源保护与管理工作指导意见，2014[7]关于加强冬虫夏草采集管理的通知，2023[8]中华人民共和国药典一部，2020年版地理标志产品西藏那曲冬虫夏草来源：DB54/T0060—20211范围本标准规定了地理标志产品西藏那曲冬虫夏草的保护范围、术语和定义、技术要求、检验方法、检验规则、标志、标签、包装、运输、贮存的基本要求。本标准适用于国家质量监督检验检疫行政主管部门根据《地理标志产品保护规定》批准保护的西藏那曲冬虫夏草。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定GB5009.4食品安全国家标准食品中灰分的测定GB5009.11食品安全国家标准食品中总砷及无机砷的测定GB5009.12食品安全国家标准食品中铅的测定GB5009.15食品安全国家标准食品中镉的测定GB5009.17食品安全国家标准食品中总汞及有机汞的测定GB/T191包装贮运图示标志JJF1070定量包装商品净含量计量检验规则国家质检总局令[2005]第75号《定量包装商品计量监督管理办法》国家知识产权局公告[2020]354号《关于发布地理标志专用标志使用管理办法（试行）的公告》《中华人民共和国药典》2020年版3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1冬虫夏草cordycepssinensis为麦角菌科植物冬虫夏草真菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫蝙蝠蛾越冬幼虫体上的子座及幼虫尸体上的复合体。它主要产于中国西藏、青海、四川等省及自治区的高寒地带和雪山草原。3.2西藏那曲冬虫夏草TibetNaqucordycepssinensis在第4章规定的地理标志产品保护范围内独特的自然地理环境条件下，天然生长，符合本标准质量要求的冬虫夏草。4地理标志产品保护范围西藏那曲冬虫夏草的地理标志产品保护范围限于国家质量监督检验检疫行政主管部门根据《地理标志产品保护规定》批准的保护范围，即地理位置介于东经92。04，～94。10，，北纬38。40，～31。58，之间的西藏自治区那曲地区那曲、嘉黎、比如、索县、巴青、聂荣六县现辖行政区域，见附录A。5技术要求5.1分级分级要求见表1。表1分级要求5.2感官指标感官指标应符合表2的规定。表2感官要求5.3理化指标表3理化指标5.4微生物指标微生物指标应符合表4的规定。表4微生物指标5.5净含量及允差应符合国家质量技术监督检验总局令[2005]第75号《定量包装商品计量监督管理办法》的规定。6检验方法6.1感官指标取样品于洁净的白色瓷皿中，在自然光下，用肉眼或放大镜（5倍～10倍）观察其色泽、形态，以及有无外来异物，有无腐烂、霉变和虫蛀。6.2虫草素腺苷按《中华人民共和国药典》2020年版一部高效液相色谱法测定。6.3虫草酸（D-甘露醇）按附录C测定。6.4水分按GB5009.3规定测定。6.5灰分按GB5009.4的规定测定。6.6铅按GB5009.12的规定测定。6.7镉按GB5009.15的规定测定。6.8总汞按GB5009.17的规定测定。6.9沙门菌按《中华人民共和国药典》2020年版测定。6.10耐胆盐革兰阴性菌按《中华人民共和国药典》2020年版测定。6.11净含量差异按JJF1070规定执行。7标志、标签、包装、运输、贮存7.1标志、标签7.1.1地理标志产品标签所标注的内容除应符合国家有关规定外，还应标注地理标志产品名称、产地和其他需要标注的内容。7.1.2地理标志产品专用标志的使用应符合国家知识产权局公告[2020]354号《关于发布地理标志专用标志使用管理办法（试行）的公告》的规定。7.1.3不符合本标准的产品，其产品名称不得使用含有西藏那曲冬虫夏草（包括连续或断开及内容类似的名称）7.2包装包装图示按GB/T191的规定执行。包装物材料应符合国家关于包装材料和卫生要求。7.3运输在运输过程中应严禁日晒、雨淋，防潮、防压，运输工具应清洁卫生，不得与有毒有害物品混装混运。7.4贮存在低温、干燥、弱光及通风良好条件下存放，应防潮隔湿，严禁与地面直接接触。不得与易燃易爆、有毒有害、腐蚀物品共同存放。附录A（规范性附录）西藏那曲冬虫夏草地理标志产品保护区域范围西藏那曲冬虫夏草地理标志产品保护区域范围见图A.1附录B（资料性附录）西藏那曲冬虫夏草鉴别那曲冬虫夏草相比其他冬虫夏草具有以下特点：1）西藏那曲冬虫夏草虫体表面色泽黄净，不论虫体大小，色泽均一致。其他产地冬虫夏草色或淡，或泛红而灰白，西藏那曲所产冬虫夏草眼睛颜色为棕色，青海玉树和果洛所产冬虫夏草眼睛颜色为黄色，四川冬虫夏草和其他地区所产的冬虫夏草多为红色，通过色泽的差别很容易就能辨别其产地。2）西藏那曲冬虫夏草无论虫体大小，看上去均显得粗肥匀称，其他产地的冬虫夏草虫体细瘦及尾细短。3）西藏那曲冬虫夏草虫体和尾（子座）皆透亮油润，有股明显特殊的菌菇类腥气味。其他产地的冬虫夏草香味极淡，甚至只有草味，且无油润感。附录C（规范性附录）西藏那曲冬虫夏草D-甘露醇的测定（HPLC法）C.1原理粉碎后的冬虫夏草用纯水超声提取，用滤膜过滤后，液相氨基色谱柱分离后，经示差检测器检测，外标法定量。C.2试剂和材料C.2.1乙腈(色谱纯）。C.2.2超纯水：实验室制备。C.2.3标准物质：D-甘露醇（纯度＞99.0%）。C.2.4D-甘露醇储备溶液：称取D-甘露醇1g，精确至0.0001g，用纯水定容至100ml，该溶液D-甘露醇含量为10000mg/L。C.2.5D-甘露醇标准系列溶液：将D-甘露醇储备溶液用纯水稀释至100mg/L，200mg/L，500mg/L，1000mg/L。C.3仪器C.3.1高效液相色谱仪，配有示差检测器。C.3.2氨基液相分离色谱柱，250mm×4.6mm，5µm。C.3.3超声水浴箱。C.3.4样品粉碎仪。C.4分析步骤C.4.1色谱条件色谱柱：氨基液相分离色谱柱，250mm×4.6mm，5µm。或其他具有同等分析效果的色谱柱。柱温：35℃。流动相：乙腈＋超纯水=75＋25。流速：1.0ml/min。池温：35℃。进样量：20µL。C.4.2试样处理将样品粉碎后，过三号筛，称取0.2g（精确至0.001g）样品于50ml离心管中，加水至45ml左右，于40℃超声（80%功率）60min，加水定容至50ml，过0.22µm滤膜，收集样品液待测。C.4.3测定待系统稳定后，按上述色谱条件依次进样。用D-甘露醇标准系列溶液进样后，以标液浓度对峰面积作标准曲线。将待测样品液进样，根据标准品的保留时间定性样品中D-甘露醇的色谱峰。根据样品的峰面积，以外标法计算样品中D-甘露醇的含量。C.5结果计算样品中D-甘露醇的含量计算按式（C.1）计算：C.6精密度在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。冬虫夏草规格等级SpecificationandgradesofCordyceps来源：DB5133/T23—20191范围本标准规定了冬虫夏草的术语定义、规格等级、包装和标识。本标准适用于甘孜州冬虫夏草产供销过程中的商品规格及等级评价。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。《中华人民共和国药典》(一部)GB/T191包装储运图示标志SB/T11094中药材仓储管理规范SB/T11095中药材仓库技术规范SB/T11173中药材商品规格等级通则《中药材生产质量管理规范（试行）》3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1冬虫夏草Cordyceps麦角菌科真菌冬虫夏草菌CordycepsSinensis（Berk.）Sacc.寄生在鳞翅目蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体。夏初子座出土、孢子未发散时挖取，晒至六七成干，除去似纤维状的附着物及杂质，晒干或低温干燥。3.2子座stroma冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫体内从虫子头部长出来的部分，表面呈深棕色至棕褐色。3.3断草duancao在产供销过程中发生了折断，分成两截或多截的冬虫夏草。3.4瘪草biecao虫体营养被子座吸收过多，或因后期储存不当等因素导致变瘪、变空的冬虫夏草。3.5黑草heicao虫体表面呈浅黑色至暗黑色的冬虫夏草。3.6空心草kongxincao在生长过程受地理自然坏境影响，致使冬虫夏草质地软化、空腔的冬虫夏草。3.7多头草duotoucao虫体头部处的子座出现多个分枝或分叉的冬虫夏草。4要求应符合《中华人民共和国药典》（一部）“冬虫夏草”下相关要求。5规格等级应符合SB/T11173的有关规定。依据重量划分，规格划分见表1。表1规格等级划6包装同一包装内冬虫夏草产品的规格等级应一致。包装内的产品可视部分应具有整个包装产品的代表性。包装应符合GB/T191和《中药材生产质量管理规范（试行）》的有关规定。7标识包装上应有明显标识，标注内容要求字迹清晰、完整、规范。应符合GB/T191及《中药材生产质量管理规范（试行）》的有关规定。8运输冬虫夏草干品应采取防潮措施贮藏运输。应符合《中药材生产质量管理规范（试行）》的有关规定。9贮存应符合SB/T11094、SB/T11095相关规定。北冬虫夏草工厂化生产技术规程ThetechniquerulesofScarletCaterpillarFungusindustrialproduction来源：DB22/T1896—20181范围本标准规定了北冬虫夏草工厂化生产的生产要求、生产投入品管理、技术要求、采收、包装、运输、贮存和记录与档案。本标准适用于北冬虫夏草工厂化生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6543运输包装用单瓦楞纸箱和双瓦楞纸箱GB/T12728食用菌术语NY/T528-2010食用菌菌种生产技术规程NY/T2798.5无公害农产品生产质量安全控制技术规范第5部分:食用菌3术语和定义GB/T12728-2006界定的以及下列术语和定义适用于本文件。为了便于使用，以下重复列出了GB/T12728-2006中的某些术语和定义。3.1子实体fruitbody产生孢子的真菌组织器官。[GB/T12728-2006,定义2.2.16]3.2北冬虫夏草scarletcaterpillarfungus在以大米（麦粒）和蚕蛹粉为主料的培养基上生长的子实体。3.3母种stockculture经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物。也称一级种，试管种。[GB/T12728-2006,定义2.5.7]3.4原种motherspawn由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。也称二级种。[GB/T12728-2006,定义2.5.8]3.5液体菌种liquidspawn由固体原种移植、扩大培养而成的纯菌丝液体培养物，培养容器为玻璃瓶或发酵罐，只用于生产不能用于菌种扩繁。3.6杂菌weedmould食（药）用菌培养中引起污染的微生物。[GB/T12728-2006,定义2.7.1]3.7工厂化生产industrialproduction在可控的环境条件下,利用成套设施和综合技术实现周年性的规模化生产。3.8生物学效率biologicalefficiency单位质量培养料的风干物质所培养产生出的子实体或菌丝体质量（鲜重），常用百分数表示。如风干料100kg产生了新鲜子实体50kg，即为生物学效率50%。4产地环境质量应符合NY/T2798.5的要求，应选在远离污染源(如牲畜养殖场、垃圾场、污水排放区等）和人口密集300m以上，下风口的地方。5生产条件5.1厂房5.1.1应设原料处理室、拌料室、分装室、灭菌室、冷却室、接菌室、发菌室、培养室、烘干室、贮藏室、包装室。5.1.2厂房内部环境分为有菌区和无菌区。无菌区设置空气净化设备和紫外灯，用于每天定时进行物理消毒灭菌。必要时，用消毒液处理。5.2设备、设施5.2.1设备高压灭菌锅、超净工作台、摇床及恒温箱等。高压灭菌锅应符合特种设备要求。5.2.2设施应设置空调、可控光源、喷淋、专用通风等设施。5.3人员应配备经专业培训并获得相关资质的技术人员。6生产投入品管理6.1培养料培养料安全技术应符合NY/T2798.5的要求，配方按附录A执行，具体要求如下：a)主料：大米（麦粒）和蚕蛹粉应新鲜干燥、无杂质、不霉变；b)辅料：1)维生素B：干燥，无霉变，保质期内。2)蔗糖：白色或无色晶体，无潮解。6.2培养瓶应符合NY/T2798.5的要求。7技术要求7.1生产工艺流程生产工艺流程见图1。7.2操作要点7.2.1母种选择应选择生物学效率达到80%以上的母种，质量应符合附录B要求。7.2.2母种无菌条件下，将斜面菌种切割成(6mm～8mm)×(6mm～8mm)小块，转接到PDA斜面培养基（见附录A.1）上，18℃～22℃下暗培养，待菌丝长满试管后4℃保存。7.2.3原种容器应符合NY/T528-2010中4.7.1.2的规定。质量要求应符合附录C的规定。7.2.4液体菌种使用规格一致的耐高温无破损容器。质量要求应符合附录D的规定。7.2.5培养基7.2.5.1装瓶、灭菌每瓶装培养基35g、培养液50mL。配方见附录A.3；高压灭菌温度达到121℃～126℃后，保持1h。7.2.5.2冷却、接种当灭菌锅内培养基温度降至40℃～50℃时出锅，移入接种室内,冷却至25℃以下接种；在无菌条件下，每瓶接种5mL液体菌种。7.3生产管理7.3.1发菌接种后的培养瓶置于发菌室，分层叠放，确保通风。温度控制在20℃～24℃之间，空气相对湿度控制在60%～70%之间，暗光培养，通风换气，保持空气新鲜。7.3.2出草将长满菌丝的培养瓶上架出草，光照强度控制在500Lx～1000Lx，温度控制在18℃～22℃，湿度控制在60%～75%。7.3.3通风保持室内空气新鲜，CO2浓度应低于1000ppm。7.3.4杂菌、虫害防治7.3.4.1物理防治a)生产过程中调节好培养室内温湿度，避免过分干燥或潮湿，加强通风换气。b)通风口安装纱网及紫灯外灭菌装置，防止螨类、虫类及杂菌进入。c)生产车间内发现污染源后立即清除并高压灭菌，防治二次污染。d)在无培养物的条件下采用紫外光对整个培养室内进行消毒。7.3.4.2化学防治在无培养物的条件下采用高效、低毒化学药剂对车间内部进行彻底消毒。8采收8.1标准子实体长5cm以上，顶部形成孢子囊且无孢子飞散时采收。8.2方法用手按住子实体基部采下，盛器以小盘为宜，以免挤压。8.3采后处理8.3.1产品烘干采收后的北冬虫夏草可在烘干箱内50℃烘干，含水量低于10%。8.3.2菌渣将采收后的菌渣集中收集，用于食品、饲料、肥料等加工的原料。8.3.3培养瓶清洗后重复利用。9包装、运输及贮存9.1包装产品外包装应符合GB/T6543的要求。9.2运输运输时避免日晒、雨淋，防止摔撞、重压，严禁与有毒、有害、有异味物品混运。9.3贮存贮存场所应满足防雨、防鼠、防虫、通风、干燥、清洁、阴凉、无阳光直射的要求，严禁与有毒、有害、有腐蚀性、有异味、易污染的物品混放。常温下可保存12个月。10记录与档案整个生产过程应有及时、详尽的记录，记录档案保存3年以上。附录A（规范性附录）培养基配方A.1母种及原种培养基配方（马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基）马铃薯200g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾7.0g，硫酸镁3.5g，维生素B10.1g，琼脂粉20g，水1000mL，pH6.0～7.0。A.2液体栽培种培养基配方（马铃薯、葡萄糖培养液）马铃薯200g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾7.0g，硫酸镁3.5g，维生素B10.1g，水1000mL，pH6.0～7.0。A.3用于生产的培养基(每个培养瓶的标准)麦粒35g，培养液（见附录A.2）50mL，pH6.0～7.0。蚕蛹粉20g。附录B（规范性附录）母种质量要求母种质量要求见表B.1。表B.1母种质量要求附录C（规范性附录）原种质量要求原种质量要求见表C.1。表C.1原种质量要求附录D（规范性附录）液体菌种质量要求液体菌种质量要求见表D.1。表D.1液体菌种质量要求冬虫夏草培植技术规程TechnicalregulationsforcultivationofCordycepssinensis（报批稿）来源：DB42/T1272—20171范围本标准规定了冬虫夏草培植的术语和定义、环境与设施、工艺流程及技术要求、生产管理及病虫害防治等。本标准适用于冬虫夏草的培植。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB2762食品安全国家标准食品中污染物限量GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB5749生活饮用水卫生标准GB50073洁净厂房设计规范3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1冬虫夏草Cordycepssinensis冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordycepssinensis(Berk.)Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的复合体。待子座出土约3cm～7cm，子实体未成熟时挖取，除去似纤维状的附着物及杂质。冬虫夏草繁育品为模拟原生态条件下抚育而成的冬虫夏草。3.2虫种hostinsectspecies冬虫夏草的虫种蝙蝠蛾科昆虫属于鳞翅目Lepidoptera，有喙亚目Glossata，外孔次亚目Exoporia，蝙蝠蛾总科Hepialoidae。目前研究发现虫草蝠蛾Hepialusarmoricanus、小金蝠蛾Hepialusxiaojincusis、比如蝠蛾Hepialusbiruensis、蒲氏蝠蛾HepialusPui、玉树蝠蛾Hepialusyushuensis等60种（邱乙等2015）。3.3菌种strain冬虫夏草菌种为中国被毛孢HirsutellssinensisLiu，Guo，Yu-etZeng（1989），隶属于子囊菌门Ascomycota粪壳菌纲Sordariomycetes肉座菌目Hypocreales线虫草科Ophiocordycipitaceae（Sungetal.2007）。4环境与设施4.1场地环境选择人力资源充足，交通便利，生态环境良好，水资源丰富，空气和水环境良好的场地。4.2培植厂房设施厂房须符合GB50073的洁净厂房要求。其中100万级洁净区面积占总面积的35%，10万级洁净区面积占总面积的34%，一般区间占总面积的31%。洁净区与周围的空间维持一定的压差，按工艺要求决定正压与负压差，气流分布均匀，高效过滤器的检漏大于99.97%，辅助车间采取通风措施，室内的静压值低于洁净区。温度调节范围可-10℃～25℃，相对空气湿度范围30%～99%，光照强度范围0lx～100000lx。4.3土壤a)土壤要求土壤有机质含量在3%～16%，pH5.0～8.0之间，土壤粒径集中在0.05mm～0.25mm之间，壤质砂土，有少量的石砾，具强度生草腐殖质累积与弱度氧化还原特征。b)土壤处理经过定点取样检测采集合格的土壤。土壤经流水线消毒后，调节至25%～55%之间的合适湿度，呈具一定的凝聚性但不粘黏，透气良好的松散物理结构状态。采用规定的消毒检测流程可将土壤重复循环使用。4.4植物饲料a)植物饲料来源所用的饲料应为冬虫夏草产区天然或种植的蓼科、蔷薇科、伞形科、百合科、毛茛科、桔梗科、豆科等科属植物的地下根茎部分（张泽锦等2009；李文佳等2016）；主要为蓼科的珠芽蓼、小大黄、圆穗蓼等，一般主根肥厚有时多须根（张泽锦等2009；李文佳等2016）。b)植物饲料要求品质新鲜、无腐烂、无异味及杂质，有效利用率90%以上；重金属含量符合GB2762；农药残留符合GB2763。4.5水冬虫夏草的培植用水需要符合GB5749。4.6土壤、饲料和水混合仿照青藏高原冬虫夏草产地土壤及天然植物根茎空间分配结构，铺设培植土壤和饲料植物。土层厚度10cm～30cm。根据具体土壤质地与植物饲料根茎质量密度差别，单位范围内土壤与饲料重量比为1:0.5～1:2。5工艺流程及技术要求5.1培植工艺流程图5.2虫种繁育5.2.1建立野生蝙蝠蛾成虫繁育基地模拟野生生长环境植入卵幼虫+植入菌僵虫冬虫夏草在冬虫夏草产区建立成虫繁育基地。根据实际的气候状况，调整基地内土壤水分含量，增加可食植物的物种多样性与数量。5.2.2获得蝙蝠蛾卵收集野生蝙蝠蛾成虫，使其集中交配产卵，收集蝙蝠蛾卵，在完全自然的生长状态下，完成卵、幼虫、蛹阶段的生长发育，蛹羽化为成虫，所产大量卵作为冬虫夏草培植的虫源。5.3菌种培育5.3.1采集原始菌5、6月份，于冬虫夏草产区西藏、青海、四川采集优质冬虫夏草。从采集的冬虫夏草中分离菌种，经过菌种鉴定，确定为冬虫夏草菌Cordycepssinensis(Berk.)Sacc.，应用于生产。5.3.2培养基的组成加富PDA培养基：20%去皮马铃薯煮沸30min后过滤取滤液，葡萄糖2%～3%，酵母粉1%，蛋白胨0.5%，磷酸二氢钾0.1%，无水硫酸镁0.02%～0.025%，水，pH6.5～6.8。培养基的所有材料应符合相应标准和国家相关规定的要求。5.3.31级培养用接种针纵横切割斜面菌种为块状，挑取3mm×3mm的菌块按装量250mL的量接种于500mL容量的1级摇瓶中，匀浆机捣碎，摇床培养。通过生物量测定及微生物检测的结果剔除生长过慢及被污染的摇瓶。5.3.42级培养将1级培养的菌液按10%～20%的量扩至装量于500mL的1000mL容量的2级摇瓶中，如上培养，设置温度14℃～20℃，转速100r/min～150r/min，剔除生长过慢及被污染的摇瓶。5.3.53～8级培养与5.3.4同样方法扩至3～8级摇瓶，培养，通过生物量测定及微生物检测的结果剔除生长过慢及被污染的摇瓶。5.3.6发酵培养将摇瓶菌液按体积比15%～20%接种量接入发酵罐中，再逐级发酵放大，进行生物量测定及微生物检测。取样检查是否污染，无污染则可用于生产。5.3.7侵染菌体调配a)菌丝的获得洁净环境下，发酵菌液用离心机（1000r/min,15min）获得菌丝。b)分生孢子的收集与计数用接种针直接挑取不同部位的固体发酵菌丝块，并记下重量，用吐温80液洗下分生孢子，离心（1000r/min,15min）收集，再用血球计数板在显微镜下计数，可计算平均每克固体培养基所含的冬虫夏草分生孢子量。c)高效侵染菌源的配制按照子囊孢子50000个/L～80000个/L、分生孢子20000个/L～50000个/L、菌丝300mg/L～600mg/L的比例混合调配成高效侵染菌体。5.4冬虫夏草培植5.4.1寄主幼虫饲育将蝙蝠蛾卵按照不同批次均匀投放于按4.6的规定备好的培植生态环境中，护理至90%以上寄主幼虫发育至4～6龄适宜侵染的龄期。龄期与幼虫的种类以及所用菌种的浓度与侵染力状态相关。5.4.2接种冬虫夏草菌对蝠蛾幼虫的接种采用针刺、喂食、涂抹、浸泡及喷雾等方法，根据幼虫大小和菌的状态，采用一种或几种组合的接种方式。5.4.3接种后管理接种后幼虫，待其状态恢复后，重新植入其培植环境中继续发育为僵虫，并长出子座，形成冬虫夏草。5.5冬虫夏草采收及采后处理5.5.1冬虫夏草的采收待冬虫夏草子座出土3cm～7cm，子实体未成熟时，用特制的冬虫夏草采收工具小心拨开土层，将冬虫夏草连同其纤维状附着物一同取出，用特制的刷子轻柔刷去虫体表面的泥土、菌膜和虫卵，即获得冬虫夏草。5.5.2采收检验剔除断草、瘪草、腐烂草。5.5.3冬虫夏草储存运输保存和运输在低温环境下，温度控制在0℃以下，密封包装以防止虫害和鼠害，同时做好防撞措施。6生产管理及病虫害防治6.1环境维护定期巡视检查，观察记录环境状况和幼虫、僵虫、鲜草生长发育状况，维持土壤和空气的温湿度，调整光照，定期进行空间消毒、除菌，维持环境洁净度。6.2严格检疫采取预防为主，综合防治的方针。每一批冬虫夏草培植前均须将所使用的厂房区域进行彻底消毒除菌，进入生产培植厂区的原材料、器具等均需灭菌，有害病原菌白僵菌、绿僵菌、拟青霉菌不得于原材料及环境中检出（方法见附录A）。6.3防止病害传播各饲育单位相对隔离，禁止不同饲育空间的器具、物品等在未经消毒情况下交叉使用，严格防范幼虫传染病的发生和流行。及时清除发现的病、弱虫及病草等不健康个体，带离饲育区，作灭活处理（方法见附录A）。如发现病弱异常个体超过一定比例控制限，整个饲育单位灭活，清空，彻底消毒后，再次启用。附录A（规范性附录）冬虫夏草培植的消毒除菌方法A.1培植区域使用前消毒灭菌采用二氧化氯消毒机进行空间消毒，二氧化氯浓度为10mg/m3～15mg/m3，消毒3h～4h，通风换气。检测沉降菌，合格后方可启用洁净区。A.2培植区域日常消毒灭菌每周进行地面、墙壁和工作台的灭菌。用75%酒精纱布擦洗培养架、工作台。部分区域采用紫外照射20min～30min。A.3进入培植区域器物消毒除菌布制品、小件玻璃、金属器物，高压蒸汽灭菌（121℃，20min）。大件机械设备用75%酒精喷雾，擦拭表面或在厂房缓冲区紫外消毒，臭氧熏蒸1h。A.4病、弱个体灭活处理发现的病、弱个体须将其投入专用的封闭灭菌筒中，及时带离培植区域，用专用蒸汽灭菌锅，湿热灭菌法将其灭活，尸体远离厂区深埋处理。北冬虫夏草生产技术规程PoductionforCordycepsmilitaris(L.)Linkcultivation来源：DB33/T748—20161范围本标准规定了北冬虫夏草[Cordycepsmilitaris（L.）Link]生产技术规程的栽培基质、菌种制作、栽培瓶制作、灭菌和接种、菌丝培养、出草管理、采收和栽培管理、档案建立与管理等技术要求。本标准适用于北冬虫夏草的室内容器生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB5749生活饮用水卫生标准GB/T12728食用菌术语GB14881食品安全国家标准食品生产通用卫生规范GB15569农业植物调运检疫规程NY5099无公害食品食用菌栽培基质安全技术要求3术语和定义GB/T12728界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1栽培容器装有混合培养料的透光的玻璃容器或聚丙烯塑料容器。3.2子座由菌丝分化而成的垫状结构，由菌丝体单独形成或由菌丝体和寄生组织共同形成。3.3促进子座形成采用控温、调湿、光线刺激及增氧等方法促使北冬虫夏草子座形成的过程。3.4出草子实体（子座）形成并逐渐发育成熟的过程。3.5豆天蛾蛹粉豆天蛾(一种属鳞翅目、天蛾科的天蛾)蛹进行干燥精细粉碎后的粉末。3.6柞蚕蛹粉柞蚕（一种鳞翅目、大蚕蛾科的蚕）蛹进行干燥精细粉碎后的粉末。3.7蚕蛹粉蚕（一种鳞翅目、蚕蛾科的蚕）蛹进行干燥精细粉碎后的粉末。4要求4.1栽培基质4.1.1技术要求应符合NY5099的规定。4.1.2主料小麦、大米。要求新鲜、洁净、干燥、无虫、无霉、无异味。4.1.3辅料麦麸、玉米粉、大豆粉、豆天蛾蛹粉、柞蚕蛹粉、蚕蛹粉等。要求新鲜、洁净、干燥、无虫、无霉、无异味。4.1.4营养添加剂营养添加剂符合附录A中的A.1规定。4.1.5栽培基质处理基质中不应加入任何农药及抗生素，不得使用植物生长调节剂和含有植物生长调节剂或成分不清的混合型基质添加剂。4.2水应符合GB5749的规定。4.3环境要求300m方圆之内无禽兽舍，无垃圾（粪便）场，无污水和其他污染源（如石灰厂、水泥厂等）。4.4场地布局设施4.4.1场地设施宜选择通风良好、水源清洁的区域。生产区布局合理，应与原料仓库、成品仓库、生活区分开，灭菌室、冷却室、接种室、培养室应各自独立、方便操作。管理制度明示上墙。4.4.2初加工场地北冬虫夏草初加工的厂址、环境卫生和原料采购、加工、包装、贮存及运输等环节的场所、设施、人员等应符合GB14881中的相关规定。4.5菌种制作4.5.1种源选用选用北冬虫夏草[Cordycepsmilitaris（L.）Link]经过品种审定或鉴定确认，种性好、抗逆性强，对当地自然环境适应的种源。4.5.2母种制作4.5.2.1培养基4.5.2.1.1PDA培养基配方马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g～20g、水1000mL。4.5.2.1.2改良PDA培养基配方马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1.5g、琼脂18g～20g、水1000mL。4.5.2.1.3制作方法将去皮马铃薯切片置容器内加水1000mL，煮沸15min，过滤，加入葡萄糖和琼脂，补足水至1000mL，加热溶解；琼脂溶解后，用分装器装入试管中，装量为试管长的1/5，塞上棉塞。置灭菌锅中，在0.1MPa压力下灭菌0.5h，自然落磅；将试管趁热排放在斜面板上冷却。4.5.2.2转管扩繁经过出草鉴定合格的母种。以1:20～1:30进行转管，在22℃～25℃环境中培养，菌丝长满试管斜面即可使用。4.5.2.3贮存母种一般在冰箱中保藏，保藏温度为4℃～5℃。4.5.3原种、栽培种制作4.5.3.1培养基4.5.3.1.1配方一：玉米粉2g、葡萄糖2g、蛋白胨1g、酵母粉0.5g、KH2PO40.1g、MgSO40.05g，加水至100ml。4.5.3.1.2配方二：马铃薯20g、玉米粉3g、葡萄糖2g、蛋白胨0.3g、KH2PO40.15g、MgSO40.05g，加水至100ml。4.5.3.2装瓶、装罐4.5.3.2.1原种按比例将培养料均匀装入三角瓶中，500mL三角瓶装液量为100mL～200mL，用透气硅胶塞封口。4.5.3.2.2栽培种按比例将培养料均匀装入发酵罐中，60L发酵罐装料50L培养液。4.5.3.3灭菌4.5.3.3.1原种在0.11MPa压力下热力灭菌0.5h。4.5.3.3.2栽培种在0.11MPa压力下热力灭菌2h。4.5.3.4接种4.5.3.4.1原种培养料冷却到24℃以下，在无菌条件下接种，每支母种接1瓶原种；每300mL原种接10L栽培种。4.5.3.4.2栽培种培养料冷却到24℃以下，在无菌条件下接种，进行发酵罐接种，每个发酵罐接1000ml～1500ml原种。4.5.3.5培养4.5.3.5.1原种22℃～25℃静置培养48h后，置于摇床上进行振荡培养，140r/min～160r/min，培养90h～120h。4.5.3.5.2栽培种22℃～25℃60L发酵罐按70L/min通气量进行通气搅拌，培养24h。4.5.3.6贮存原种、栽培种应在培养结束后及时使用，不能及时使用时应在适温4℃～16℃、干燥（相对湿度60%～70%）、通风、清洁、避光的室内整罐保藏，可保藏24h。4.6栽培技术4.6.1栽培季节在自然条件下，一般2月中下旬栽培接种，5月中下旬采收；8月中下旬栽培接种，11月采收，条件允许可周年栽培。4.6.2推荐配方4.6.2.1小麦68%，豆天蛾蛹粉26%，蔗糖5%，蛋白胨1%，维生素B10.001%。4.6.2.2大米68%，柞蚕蛹粉26%，蔗糖5%，蛋白胨1%，维生素B10.001%。4.6.2.3大米68%，蚕蛹粉26%，蔗糖5%，蛋白胨1%，维生素B10.001%。4.6.3装料先将小麦或大米等主料和辅料配比混合，按料水比为1:1装入栽培容器中，透气盖封口或聚丙烯膜封口。4.6.4灭菌将装好培养基栽培容器移入灭菌锅内高压灭菌（压力为0.10MPa～0.14MPa，温度为121℃～126℃）保持1.5h～2.0h，或常压灭菌(温度为100℃)保持10h～12h。4.6.5冷却灭菌后移入冷却室内，冷却至24℃以下移入接种室内。4.6.6接种接种环境要求清洁、干燥，用消毒剂对地面、墙壁进行消毒，消毒剂符合附录A中的A.2规定；栽培瓶在接种室内用消毒剂密闭熏蒸1.5h～2h后接种，消毒剂符合附录A中的A.2规定；每瓶栽培瓶约接5mL液体菌种或固体菌种10g。4.6.7菌丝培养4.6.7.1培养室环境要求培养室应经消毒，要求清洁、干燥、通风、遮光。4.6.7.2培养方法采用容器栽培，立体架式，层架6层～7层，层距为40cm～50cm。4.6.7.3培养管理发菌室温度宜为18℃～23℃，空气相对湿度65%～70%;遮光，使发菌室基本黑暗。适时开门窗进行通风换气，保持发菌室空气新鲜；接种后每个星期至少检查一次，及时剔除感染杂菌的栽培容器。4.6.7.4培养时间室内培养20d～25d，至菌丝长满。4.7增氧用聚丙烯薄膜封口的容器，菌丝长满菌瓶后，刺孔增氧，刺孔数为每瓶8个～10个。4.8出草管理4.8.1栽培室要求培养室应消毒处理，达到清洁、通风、有散射光（100lx～200lx）。4.8.2促进子座形成（促草）促座时期为菌丝体长满料面时，保持培养室温度为16℃～18℃，空气相对湿度90%，应有散射光（100lx～200lx）诱导原基形成。4.8.3育草温度保持18℃～22℃；保持培养室空气相对湿度85%，应有散射光（100lx～200lx）；保持培养室空气新鲜；子座生长阶段，保持空气相对湿度85%。4.9采收与场地初加工4.9.1采收当北冬虫夏草形成子座后，未弹射孢子前采收。采收时，操作人员应戴帽子、口罩，洗净双手，戴上手套，用镊子取出子座，除去杂质后，按规格分类。4.9.2干制即采即烘，可采用热风循环烘干机、专用烘干机等烘干。烘干温度控制在40℃～60℃。4.9.3品质特征按北冬虫夏草干草的感官指标分为特级、一级、二级、等外品四个级别。其感官指标和理化指标参见附录B。4.10包装4.10.1包装容器接触北冬虫夏草的包装材料应符合食品卫生要求。箱内小包装应选用无毒、透明聚丙烯塑料瓶。包装箱可采用瓦楞纸箱，箱内衬垫应选用清洁干燥、无毒、无异味的瓦楞纸。4.10.2包装规格每箱净重10kg～30kg或可根据用户需要确定包装规格。4.11运输储藏向外调运北冬虫夏草按GB15569规定执行。干北冬虫夏草应贮存在阴凉、干燥、通风、无鼠的仓库内，产品离地，不靠墙、不得与有毒、有害、有异味的物品共贮。室温保存。鲜北冬虫夏草采收后应及时加工、包装，并进入1℃～4℃冷库储藏。不得与有毒物质或其他气味重的物质混放。产品在本标准规定的条件下，自生产之日起，干草保质期为24个月，鲜草在1℃～4℃下保质期为40天。4.12病虫害防治4.12.1防治原则坚持以预防为主，综合防治为辅的原则。4.12.2主要病害预防4.12.2.1主要病害霉菌(毛霉、脉孢霉、木霉、黄曲霉)和细菌性基腐病。4.12.2.2预防方法检查种源；保持环境清洁；发现病害及时清除，移出培养室，并进行无害化处理；子座形成到采收期间禁止使用化学农药。4.12.3主要虫害防治4.12.3.1主要虫害菇蝇、菇蚊、螨类。4.12.3.2防治方法阻隔法防害虫，在场地周围控沟，在培养室安装纱门、纱窗防止害虫飞入。用物理驱蚊方法驱虫，按附录A中的A.3进行操作。发现螨类等虫害及时清除，移出培养室，并进行无害化处理。4.12.4生产记录在生产过程中应做好生产记录。5档案建立与管理生产单位应保存完整、真实的产地环境质量资料，生产栽培管理和销售记录。生产栽培管理和销售记录包括投入物品的品种、来源、数量、购买时间与地点、用法、使用时间，种植管理操作的时间、方法，收获与产地初加工的时间、方法、操作人员，产品销售等。档案保存不少于3年。6标准化生产模式图北冬虫夏草生产技术规程模式图参见附录C图C.1附录A（规范性附录）常用药剂的配制及使用A.1常用营养添加剂种类、功效、用量和使用方法常用营养添加剂种类、功效、用量和使用方法见表A.1。表A.1常用营养添加剂种类、功效、用量和使用方法A.2常用消毒剂种类、使用浓度、使用对象和使用方法常用消毒剂种类、使用浓度、使用对象和使用方法见表A.2。表A.2常用消毒剂种类、使用浓度、使用对象和使用方法A.3害虫防治方法菇蝇、菇蚊等害虫可在培养室内安装杀虫灯进行防治。附录B（资料性附录）北冬虫夏草干鲜草品质特征B.1分级指标B.1.1鲜草分级指标见表B.1。表B.1鲜草分级指标表B.1.2干草分级指标见表B.2。表B.2干草分级指标B.2感官指标B.2.1鲜草感官指标见表B.3。表B.3鲜草感官要求B.2.2干草感官指标见表B.4。表B.4干草感官指标B.3质量安全要求B.3.1理化指标理化指标应符合表B.5规定。表B.5理化指标B.3.2安全卫生指标应符合NY/T749的规定，具体见表B.6。表B.6安全卫生指标B.4试验方法B.4.1分级指标采用直尺和卡尺测定。B.4.2感官要求B.4.2.1色泽、外观、采用目测检验。B.4.2.2气味采用嗅闻检验。B.4.2.3杂质判定按GB/T12533规定执行。B.4.3理化指标B.4.3.1水份按GB/T12531规定执行。B.4.3.2SOD按GB/T5009.171活性的测定规定执行。B.4.3.3粗多糖按中华人民共和国卫生部保健食品检验与评价技术规范规定执行。B.4.3.4虫草酸按中华人民共和国卫生部保健食品检验与评价技术规范规定执行。B.4.3.5虫草素按中华人民共和国卫生部保健食品检验与评价技术规范规定执行。B.4.4安全卫生指标B.4.4.1砷按GB/T5009.11规定执行。B.4.4.2汞按GB/T5009.17规定执行。B.4.4.3铅按GB/T5009.12规定执行。B.4.4.4镉按GB/T5009.15规定执行。B.4.4.5亚硫酸盐按GB/T5009.34规定执行。B.4.4.6六六六、滴滴涕按GB/T5009.19规定执行。B.4.4.7氯氰菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯按GB/T5009.110规定执行。B.4.4.8乙酰甲胺磷、乐果、毒死蜱按GB/T5009.20规定执行。B.4.4.9百菌清按GB/T5009.105规定执行。B.4.4.10多菌灵按GB/T5009.188规定执行。B.5检验规则B.5.1组批同一单位生产、同一生产日期、同一生产条件或同时调进销售的同级子实体（子座）为一组批。B.5.2抽样从一组批的不同部位，按随机方法进行取样，抽取样品数量见表B.7。表B.7抽样数量附录C（资料性附录）北冬虫夏草生产技术规程模式图地理标志产品青海冬虫夏草Productofgeographicalindication—Qinghacordycepssinensis来源：DB63/T890—20101范围本标准规定了地理标志产品青海冬虫夏草的保护范围、术语和定义、技术要求、试验方法、判定规则和标志、包装、运输、贮存。本标准适用于国家质量监督检验检疫行政主管部门根据《地理标志产品保护规定》批准保护的青海冬虫夏草。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T5009.3食品中水分的测定GB/T5009.34食品中亚硫酸盐的测定DB63/670—2007冬虫夏草JJF1070定量包装商品净含量计量检验规则《定量包装商品计量监督管理办法》（国家质量监督检验检疫总局令第75号）《中国药典》2005版一部3地理标志产品保护范围青海冬虫夏草地理标志产品保护范围限于国家质量技术监督检验检疫总局根据《地理标志产品保护规定》批准的范围，即地理位置介于东经89°35′～103°04′，北纬31°39′～39°19′之间的青海省现辖行政区域，见附录C。4术语和定义下列术语和定义适用于本标准。4.1青海冬虫夏草Qinghacordycepssinensis是指在青海地区采挖的，由中华被毛孢侵染鳞翅目玉树蝠蛾、门源蝠蛾、斜脉蝠蛾、暗色蝠蛾、循化蝠蛾、碌曲蝠蛾、拉脊蝠蛾及贵德蝠蛾等幼虫后，发育而成的真菌子座和充满菌丝体的僵死幼虫的复合体。5技术要求5.1原料要求应选用在青海地区采挖，符合4.1条的冬虫夏草，且外型完整、干燥，虫体饱满，无明显可见外来杂质，气味正常，无腐烂、霉变或虫蛀。5.2工艺过程采挖→除杂→分级→干燥→计量→包装→成品5.3工艺要求5.3.1采挖要求5.3.1.1采挖范围青海冬虫夏草地理标志保护产品采挖范围限于国家质量监督检验检疫行政主管部门根据《地理标志产品保护规定》批准的范围，即青海省现辖区域：玉树藏族自治州的玉树县、杂多县、称多县、治多县、囊谦县、曲麻莱县；果洛藏族自治州的玛沁县、甘德县、达日县、久治县、玛多县；海南藏族自治州的共和县、同德县、贵德县、贵南县、兴海县；海北藏族自治州的门源回族自治县、祁连县、海晏县、刚察县；黄南藏族自治州的同仁县、泽库县、河南蒙古族自治县、尖扎县；海西州的天峻县；海东地区的乐都县、化隆回族自治县、互助土族自治县、循化撒拉族自治县；西宁市的大通回族自治县、湟中县、湟源县。5.3.1.2采挖时间每年的4月至6月。5.3.1.3采挖工具采挖工具切面宽度不超过3cm。5.3.1.4采挖方式采挖应遵循轮挖限采的原则进行。采挖工具在距离草头7cm左右，连草皮挖9cm左右，取出虫草。虫草采挖后，坑要填平、踩实，采挖产生的裸露面积不应该超过50cm2。5.3.2除杂、分级、干燥、计量、包装5.3.2.1除杂用毛刷清理黏附在虫体上的泥土等杂质，并初步干燥。5.3.2.2分级分级要求见表1。表1级别5.3.2.3干燥采用自然干燥或低温干燥的方式进行干燥。5.3.2.4计量单件定量包装产品的净含量，应符合《定量包装商品计量监督管理办法》(国家质量监督检验检疫总局令第75号)的规定。5.3.2.5包装地理标志保护产品青海冬虫夏草定量包装产品内不允许有断根，并符合DB63/670—2007规定。5.4感官要求5.4.1虫体似蚕，表面深黄色至黄，粗糙，质脆；断面类白色；虫体长2.8cm至6.5cm。5.4.2子座为棕色细长圆柱形，长约2cm至5cm。5.4.3有环纹20个至30个；足8对，近头部3对，中部4对，尾部1对，中部4对较明显。5.4.4气微腥，味微苦。5.4.5青海冬草夏草的“虫”和“草”应完整，每500g≤2000根。5.5理化指标理化指标见表1。表2理化指标5.6安全要求产品安全指标必须达到国家对同类产品的相关规定。6试验方法6.1感官要求感官要求按照DB63/670—2007中6.1.1规定的方法进行检验。6.2理化指标6.2.1水分按照GB/T5009.3的规定进行检验。6.2.2杂质按照DB63/670—2007中6.2.2规定的方法进行检验。6.2.3腺苷按照附录A的规定进行检验。6.2.4虫草多糖按照附录B的规定进行检验。6.2.5二氧化硫残留按照GB/T5009.34的规定进行检验。6.2.6净含量按照JJF1070的规定进行检验。7检验规则7.1抽样以同等级、同等定量包装的青海冬虫夏草为一检验批次，随机抽取10g—12g检验。7.2出厂检验和型式检验7.2.1出厂检验每批产品均需进行出厂检验，检验合格后方可出厂。检验项目为感官要求、净含量及理化指标中的水份。7.2.2型式检验检验项目为技术要求中的全部项目。有下列情况之一时应进行型式检验：a)当原料、工艺发生重大变化可能影响产品质量时；b)国家质量监督机构提出要求时。7.3判定规则7.3.1检验项目全部检验合格为合格品。如有一项不合格，应从该批产品中加倍抽样对不合格项目进行复检。复检结果仍不合格，则判定该批产品为不合格品。7.3.2当供需双方在产品保质期内对产品质量发生争议时，由法定产品质量检验部门或经质量技术监督部门授权的质检机构进行仲裁检验。8标志、包装、运输和贮存8.1地理标志产品标签所标注的内容除应符合国家有关规定外，还应标注地理标志产品名称、产地以及其他需要标注的内容。8.2地理标志产品专用标志应符合国家质量监督检验总局公告[2006]年第109号的规定，使用应符合《地理标志产品保护规定》。8.3不符合本标准的产品，其产品名称不得使用含有青海冬虫夏草（包括连续或断开及内容类似的名称）。8.4包装要求青海冬虫夏草按不同包装规格定量包装。外包装不得过度包装，并应符合国家相关法律、法规的规定。8.5包装材料包装材料应符合国家相关卫生标准要求，内包装封口严密，外表清洁。8.6包装件的运输成品包装运输时，应有遮盖，避免雨水侵入，轻拿、轻放，不得损坏产品外包装。8.7贮存通风，保持清洁、卫生，不得与潮湿有异味及易生虫的物品混放。贮存环境温度0℃-10℃，贮存环境相对湿度30%-50%。附录A（规范性附录）腺苷的测定方法A.1腺苷含量测定A.1.1依照高效液相色谱法（中国药典2005版一部ⅥD33页）测定。A.1.1.1色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；磷酸盐缓冲液（PH6.5）〔取0.01mol/L磷酸二氢钠68.5ml与0.01mol/L磷酸氢二钠31.5ml，混合（PH6.5)〕-甲醇（17：3）为流动相；检测波长为260nm。理论板数按腺苷峰计算应不低于2000。A.1.1.2对照品溶液的制备精密称取腺苷对照品适量，加90%甲醇制成每1ml含20μg的溶液，摇匀，即得。A.1.1.3供试品溶液的制备取本品粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加90%甲醇10ml，密塞，摇匀，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用90%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。A.1.1.4测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。附录B（规范性附录）青海冬虫夏草多糖的测定方法B.1范围本方法规定了青海冬虫夏草中水溶性粗多糖的测定方法。本方法适用于青海冬虫夏草及其保健品中水溶性粗多糖的测定。本方法检出限为0.2mg/g。B.2原理试样经70%乙醇煎煮，脱去蛋白质、单糖和寡糖，残渣用蒸馏水煎煮，提取水溶性粗多糖；粗多糖在浓硫酸中水解成单糖，单糖在强酸性条件下生成呋喃甲醛的衍生物，这类衍生物与苯酚反应生成有色物质，采用分光光度法检测含量。B.3试剂本方法所用试剂除特殊注明外，均为分析纯；所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。B.3.170%乙醇，精密量取无水乙醇140mL，溶解于60mL蒸馏水中既得。B.3.2浓硫酸。B.3.3苯酚溶液（50g/L）：精密称取5.0g苯酚，溶入少量蒸馏水中，稀释并定容于100ml容量瓶中，摇匀，4℃保存。B.3.4葡萄糖标准储备溶液（10.0mg/ml）：精密称取干燥葡萄糖对照品0.500g溶于少量蒸馏水中，稀释并定容于50ml容量瓶中，摇匀，4℃保存。B.3.5葡萄糖标准使用液（0.1mg/ml）:精密吸取10.0mg/ml葡萄糖标准储备溶液1.0ml于100ml容量瓶中，加蒸馏水稀释并定容至刻度，摇匀。B.4仪器B.4.1紫外分光光度计B.4.2旋转蒸发仪B.4.3离心机B.4.4水浴锅B.5分析步骤B.5.1标准曲线的制备精密吸取0.1mg/ml葡萄糖标准使用液0.10,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00mL于具塞试管中，加水补足2.0mL，加入50g/L苯酚溶液1.0mL，混匀；沿壁加入浓硫酸5.0mL，混匀，置沸水浴中反应15min；冷却至室温后，在490nm处测定吸光值，蒸馏水作空白对照。B.5.2试样制备称取混合均匀的试样约0.20g，置于50mL锥形瓶中，加70%乙醇20mL，于沸水浴中加热30min，取出，滤过；残渣加蒸馏水20mL，于沸水浴中加热30min，取出，冷却至室温，滤过，滤液备用，残渣再用蒸馏水沸水浴提取2次，三次的过滤液合并，减压浓缩并定溶于25mL容量瓶中，摇匀后待测。B.5.3试样测定精密吸取试样测定液1.0mL，加入蒸馏水1.0mL，加入50g/L苯酚溶液1.0mL，混匀；沿壁缓缓加入浓硫酸5.0mL，混匀，置沸水浴中反应15min；冷却至室温后，在490nm处测定吸光值。B.5.4结果计算B.6精密度在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对值差值不得超过算术品均值的20%。实验室冬虫夏草真菌--中国被毛孢真菌分离技术规程来源：DB63/T862—20091范围本规程规定了实验室冬虫夏草（Cordycepssinensis(Berk.)Sacc.）的收集、分离的环境条件、分离的设备、分离技术等冬虫夏草真菌的分离技术措施。本规程适用于实验室冬虫夏草真菌——中国被毛孢的分离。2术语2.1中国被毛孢（HirsutellasinensisLiu,Guo,Yu&Zeng）指冬虫夏草的无性型。2.2分离从冬虫夏草体内分离出中国被毛孢的过程。2.3消毒是指杀死或消除物体表面所有病原微生物的措施。2.4灭菌是指用物理或化学方法将所有致病和非致病的微生物全部杀灭的方法。2.5无菌操作指采用经过一定消毒措施处理之后的环境、器具及人为操作的工作方式。2.6培养基是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素。3分离用培养基的制备3.1牛肉汤的制备先将新鲜牛肉去除筋和脂肪，然后取1kg牛肉加蒸馏水2kg放入容器内煮沸，煮沸约40min后将肉渣滤去，肉水经121℃、0.1MPa高压灭菌30min后备用。注：①煮沸时应边煮边搅动；②煮沸前应在容器壁上划一刻度，煮沸时随时添补蒸馏水。3.2分离用培养基牛肉汤500ml、牛奶200ml、葡萄糖30g、琼脂18g、水解乳蛋白5g、酵母1g、磷酸氢二钾1g、核糖核酸0.5g、硫酸镁0.2g、加水定容至1000ml。3.3培养基的制备3.3.1量取蒸馏水300ml，按上述配方加入水解乳蛋、酵母、葡萄糖、磷酸氢二钾、硫