山东省德州市2022-2023学年高二下学期期中生物试题（解析版）

高级中学名校试卷PAGEPAGE1山东省德州市2022-2023学年高二下学期期中试题一、选择题1.《齐良要术》中有关发酵的记载有“作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内（纳）瓮中。其洗菜盐水，澄取清者，泻著瓮中，令没菜把即止”。下列叙述错误的是（）A.“令极咸”可以抑制杂菌的繁殖B.“洗菜盐水”中可能含有乳酸菌C.“令没菜把即止”更有利于乳酸菌的发酵D.发酵过程中乳酸菌的数量始终占据优势〖答案〗D〖祥解〗泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。在泡菜制作的过程中，要注意控制腌制的时间、温度和食盐用量。温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。【详析】A、在制作泡菜时，食盐用量过低，容易造成细菌大量繁殖，由此推测可知，“极咸”盐水可减少杂菌繁殖，A正确；B、由于蔬菜上原本就有可能附着有乳酸菌，用盐水清洗泡菜时，可以将原来附着在蔬菜上的乳酸菌一并洗到盐水中，故再倒入菜坛中的“洗菜盐水”也可能含有泡菜发酵的乳酸菌，B正确；C、“令没菜把即止”的意思是将盐水加到淹没蔬菜为止，这是因为乳酸菌是厌氧微生物，这样操作的主要目的是为乳酸菌的发酵提供无氧条件，让乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸，C正确；D、发酵初期其他杂菌的代谢也较旺盛，如酵母菌，乳酸菌的数量不占据优势，D错误。故选D2.辣椒酱是由乳酸菌发酵得到的产品，制作时将辣椒洗净、去蒂、加盐﹑发酵、破碎。发酵可以分为自然发酵和纯菌种发酵。研究人员对自然发酵和纯菌种发酵条件下所得辣椒酱中亚硝酸盐的含量进行了测定，结果如下图。下列有关叙述错误的是（）A.将辣椒洗净后去蒂可防止杂菌的污染B.不同季节制作辣椒酱的周期可能不同C.自然发酵时，亚硝酸盐含量较高可能与杂菌有关D.纯菌种发酵后期，乳酸菌数量下降导致亚硝酸盐含量降低〖答案〗D〖祥解〗泡菜的制作及亚硝酸盐含量的测定：（1）泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。（2）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量。【详析】A、先用清水清洗辣椒然后去蒂，可防止因辣椒破损而引起的杂菌污染，A正确；B、不同季节的温度不同，温度影响了发酵过程，则不同季节制作辣椒酱的周期可能不同，B正确；C、据图可知，纯种发酵亚硝酸盐的含量低于自然发酵，则自然发酵时，亚硝酸盐含量较高可能与杂菌有关，C正确；D、纯菌种发酵后期，随着腌制时间的延长，乳酸菌产生的大量乳酸对硝酸盐还原菌产生一定的抑制作用，使其生长繁殖受到影响，造成泡菜中亚硝酸盐的含量有所下降，D错误。故选D。3.沙保氏培养基含4.0%的葡萄糖、1.0%的蛋白胨，pH为4.0～6.0，常用于真菌的培养。某同学利用沙保氏培养基培养红酵母，结果如图所示。下列有关叙述错误的是（）A.培养细菌时也需要将培养基调至酸性B.该同学利用了平板划线法接种红酵母C.葡萄糖为红酵母提供碳源，蛋白胨提供碳源和氮源D.制备培养基时，应先调节pH再进行高压蒸汽灭菌〖答案〗A〖祥解〗1、微生物培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子。培养基按物理性质分为固体、半固体、液体培养基；按用途分为选择培养基和鉴别培养基。培养基的配制过程中，操作顺序如下：称量、溶化、调节pH、分装、加棉塞、包扎，灭菌等。2、微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。无菌操作包括灭菌和消毒两种方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌。3、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。4、大多数微生物最适生长pH值为5～9。大多数细菌的最适生长pH值为6.5～7.5；霉菌最适生长pH值为4.8～5.8；酵母菌最适生长pH值为3.5～6.0。

【详析】A、大多数细菌的最适生长pH值为6.5～7.5，因此在培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性，A错误；B、稀释涂布平板法是将菌液稀释成不同浓度进行涂布，而平板划线法是挑取单个菌落在平板上划线，据此可判断该实验中该同学利用了平板划线法接种红酵母，B正确；C、微生物培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子。葡萄糖是含碳有机物，能为红酵母提供碳源，蛋白胨是含碳和含氮的有机物，能提供碳源和氮源，C正确；D、制备培养基时，先调节pH再灭菌，若先灭菌后调节pH又可能对培养基造成污染，D正确。故选A。4.王家园子醋以优质小麦、小米、高粱和金丝小枣为原料，采用了传统菌曲发酵工艺，其生产工艺流程如图。下列叙述错误的是（）A.糖化阶段需要淀粉酶的催化作用B.酒精发酵和醋酸发酵的最适温度不同C.酒精发酵和醋酸发酵过程中pH均降低D.酒精发酵和醋酸发酵过程中均需先通气后密闭〖答案〗D〖祥解〗1、果酒制作利用酵母菌，其为兼性厌氧型生物，原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酒精发酵最适温度为18～25℃，前期需氧，后期不需氧；2、果醋制作利用醋酸菌，其为好氧菌，原理是：(1)O2、糖源充足：糖→醋酸；(2)有O2、缺少糖源：乙醇→乙醛→醋酸，最适温度为30～35℃，需充足的氧气。【详析】A、糖化阶段淀粉分解成葡萄糖需要淀粉酶的催化，A正确；B、酵母菌发酵产生酒精的适宜温度是18～25℃，醋酸菌发酵产生醋酸的适宜温度是30～35℃，即二者的最适温度不同，B正确；C、酵母菌酒精发酵产生酒精的同时会产生CO2，醋酸菌发酵产生醋酸，二者的pH均降低，C正确；D、酒精发酵用的酵母菌是兼性厌氧型生物，因酵母菌的繁殖需要空气，所以在果酒制作的前期需氧，因酵母菌产生酒精是在无氧条件下进行的，所以后期需要密闭；醋酸菌是好氧菌，当氧气和糖源都充足时，能将苹果汁中的糖分解为醋酸，需要始终通氧气，D错误。故选D。5.下图表示利用胡萝卜植株进行植物组织培养的两种不同途径，有关叙述错误的是（）A.外植体经过程Ⅰ形成不定形的薄壁组织块B.过程Ⅱ所使用的培养基也是固体培养基C.过程Ⅲ中诱导生芽和生根所需的培养基不同D.两种途径均体现了植物细胞具有全能性〖答案〗B〖祥解〗植物组织培养过程中分化成的幼苗需要移栽，移栽时，应先将培养瓶的封口膜打开一段时间，让试管苗在培养间生长几日；移栽时需用流水清洗根部的培养基；最后幼苗需移植到消过毒的新环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中。【详析】A、外植体经过程Ⅰ脱分化形成的是不定形的薄壁组织块，称为愈伤组织，A正确；B、过程Ⅱ愈伤组织悬浮培养使用的是液体培养基，B错误；C、过程Ⅲ中诱导生芽使用生芽培养基，细胞分裂素含量较高，诱导生根使用生根培养基，生长素含量较高，C正确；D、两种途径都是离体的细胞最终培育成了完整的植株，均体现了植物细胞具有全能性，D正确。故选B。6.用拟南芥根尖进行植物组织培养诱导生芽的过程中，细胞分裂素（CK）通过ARRs（A）基因和WUS（W）基因起作用。为探讨A基因与W基因的关系，研究者将A基因功能缺失突变体（突变体a）和野生型的愈伤组织均置于高CK培养基中诱导生芽，测定W基因的表达量与愈伤组织分化生芽的比例，结果如图。下列叙述错误的是（）A.该实验的自变量为植株类型与高CK诱导时间B.CK通过诱导A基因表达来促进W基因的表达C.w基因的相对表达量越高，愈伤组织分化生芽的比例越大D.A基因功能缺失时W基因的表达产物不能促进愈伤组织分化生芽〖答案〗C〖祥解〗离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株体。【详析】A、由柱状图可知，该实验的自变量是植株类型与高CK诱导时间，A正确；B、由图1分析可知，野生型的W基因表达量与高CK诱导时间的关系是随着处理时间的延长，W基因的表达量显著升高，突变体的W基因的表达量明显少于对照组，说明在高CK诱导下A基因促进W基因表达，B正确；C、结合两图可知，当诱导时间大于8d后，随着W基因的表达量升高，愈伤组织分化生芽的比例越大，C错误；D、右图中突变体a愈伤组织不能分化出芽，突变体a中A基因缺失，则W基因的表达产物不能促进愈伤组织分化生芽，D正确。故选C。7.HL-1细胞是一种可连续培养的小鼠心肌细胞系，具有贴壁生长的特点。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，需将一瓶细胞分到几瓶中进行培养，这个瓶数称为分瓶比。下列叙述正确的是（）A.分瓶比越大，分瓶培养更换培养液的周期相对越长B.分瓶时胰蛋白酶处理时间越长，细胞分离效果越好C.HL-1细胞的培养过程能体现动物细胞的全能性D.培养HL-1细胞需提供95%O2和5%CO2的气体环境〖答案〗A〖祥解〗1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。2、动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：细胞体外培养时，培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质，除外，通常还需加入血清等天然成分。（3）温度：哺乳动物多是36.5℃+0.5°C；pH：7.2~7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。【详析】A、分瓶时，一瓶细胞可分到几瓶中培养，这个瓶数称为分瓶比，分瓶数越多，分瓶比越大，因此分瓶培养更换培养液的周期相对越长，A正确；B、分瓶时需要用胰蛋白酶处理，消化细胞间相联系的蛋白质，但是如果处理时间过长，会破坏细胞膜，影响细胞的完整性，B错误；C、HL-1细胞的培养过程利用的是细胞增殖的原理，不能体现动物细胞的全能性，C错误；D、培养HL-1细胞需提供95%空气和5%CO2的气体环境，D错误。故选A。8.某些化学小分子物质可诱导人成体细胞转化为类似于胚胎干细胞的多潜能干细胞（CiPSC）。下列有关叙述错误的是（）A.CiPSC具有组织特异性，能够自我更新B.诱导形成CiPSC过程中，细胞中遗传物质未发生改变C.小分子物质可能会激活只在胚胎干细胞中才表达的基因D.CiPSC的应用前景优于胚胎干细胞〖答案〗A〖祥解〗细胞的分裂程度与分化程度成反比，分化程度越低，分裂能力越强。高度分化的细胞不能再分裂。【详析】A、某些化学小分子物质可诱导人成体细胞转化为类似于胚胎干细胞的CiPSC，则CiPSC没有组织特异性，能够自我更新，A错误；B、诱导形成CiPSC过程中，只是影响了相关基因的表达，细胞中遗传物质未发生改变，B正确；C、小分子物质可诱导人成体细胞转化为类似于胚胎干细胞的CiPSC，则小分子物质可能会激活只在胚胎干细胞中才表达的基因，C正确；D、CiPSC的诱导过程无须破坏胚胎，而且CiPSC细胞可来源于病人自身的体细胞，因此CiPSC细胞的应用前景优于胚胎干细胞，D正确。故选A。9.动物体细胞杂交技术可用于基因定位。科学家发现人体细胞和小鼠体细胞融合时，人的染色体会随机丢失。不同类型的人鼠杂交细胞中所含人类染色体及2种基因的情况如表所示，下列有关叙述错误的是（）杂交细胞类型甲乙丙丁所含人类染色体编号1、2、7、122、7、9、112、8、4、218、11、15、22人胰高血糖素基因+++-人胰岛素基因-+-+注：“+”表示存在，“-”表示不存在A.可用灭活病毒诱导人鼠体细胞融合B.人胰高血糖素基因位于7号染色体上C.人胰岛素基因位于11号染色体上D.可用PCR检测两种基因是否存在〖答案〗B〖祥解〗动物细胞融合的方法有：物理法—电融合法，化学法—聚乙二醇（PEG)，生物法—灭活病毒诱导法。目的基因的检测方法：PCR等技术、抗原-抗体杂交技术、抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详析】A、动物细胞融合的方法有：物理法-电融合法，化学法-聚乙二醇（PEG)，生物法-灭活病毒诱导法，用灭活的病毒处理细胞是诱导动物细胞融合常用的方法，A正确；B、由表格可知人胰高血糖素基因位于2号染色体上，因为甲乙丙均含有2号染色体时存在人胰高血糖素基因，B错误；C、人胰岛素基因位于11号染色体，因为乙和丁均含有11号染色体时存在人胰岛素基因，C正确；D、PCR技术可以检测目的基因，提取目的基因，进行PCR扩增，看是否扩增出目的基因即可判断是否存在，D正确。故选B。10.卵胞浆内单精子显微注射（ICST）是借助显微操作系统将单一精子注入卵母细胞的胞浆内使其受精的一种辅助生殖技术。下列叙述错误的是（）A.ICSI所涉及的生殖方式为有性生殖B.ICSI中所用卵母细胞应处于MⅡ期C.受精后所得受精卵应直接移植到受体子宫内发育D.ICSI可用于治疗男性精子数量不足造成的不孕症〖答案〗C〖祥解〗卵胞浆内单精子显微注射技术是用显微操作技术将精子注射到卵母细胞胞浆内，使卵子受精，在体外培养形成早期胚胎，再放回母体子宫内发育着床，该过程应用了体外受精的技术、早期胚胎培养和胚胎移植技术。【详析】A、该技术实际上体外受精技术，故生殖方式是有性生殖，A正确；B、卵母细胞处于MⅡ期才有受精能力，B正确；C、受精后所得受精卵应培养到桑葚胚或囊胚期才能移植到受体子宫内发育，C错误；D、体内受精时精子需要穿越透明带和卵黄膜后才能与卵细胞融合，该技术可将精子注射到卵母细胞胞浆内，使卵子受精，由于ICSI技术能使任意单一精子不经自然选择而完成受精，因此可用于男性配子活力不强造成的不育症的治疗，D正确。故选C。11.利用生物工程技术可培育克隆牛﹑试管牛和转基因牛，培育过程的部分操作如图所示，D为相应个体。下列叙述错误的是（）A.三种动物培育过程的最后一道工序均为胚胎移植B.若D为克隆牛，A为核供体，则D的性状与A完全相同C.若D为试管牛，B为精子，则形成C之前需要对B进行获能处理D.若D为转基因牛，C为基因表达载体，则可通过显微注射法将C导入受精卵〖答案〗B〖祥解〗1、由于动物细胞核具有全能性，因此克隆动物的产生需要通过核移植技术，构建重构胚，经过培养形成早期胚胎，然后经过胚胎移植，在代孕母体内发育成熟产下的即为克隆动物。2、试管动物技术：是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。试管动物的产生需要通过体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等过程。3、转基因动物：需要通过基因工程技术，将构建的基因表达载体导入受精卵内，经过体外培养形成早期胚胎，然后经过胚胎移植移入母体内继续发育成熟，产下的具有新性状的生物即为转基因动物。【详析】A、无论克隆牛﹑试管牛还是转基因牛三种动物都是在体外培养到早期胚胎，因此培育过程的最后一道工序均需要胚胎移植，A正确；B、克隆动物的产生过程需要进行核移植的操作，因此若D为克隆牛，A为核供体，由于生物遗传包括核遗传和质遗传，则D的性状与A大部分相同，还有部分性状与B相同，因为B提供了细胞质，B错误；C、试管动物的产生过程需要体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等过程，若D为试管牛，B为精子，A为卵细胞，则形成C受精卵之前需要对B进行获能处理，C正确；D、转基因动物的形成需要构建基因表达载体，通过显微注射法将基因表达载体导入受精卵内，D正确。故选B。12.磷脂酰丝氨酸（PS）由磷脂酶D催化合成，能够调控细胞膜关键蛋白的功能状态。天然PS含量极少，难以满足人们的需要，科研人员通过蛋白质工程改造磷脂酶D以提高PS的产量。下列叙述正确的是（）A.改造磷脂酶D应从设计磷脂酶D的结构出发B.改造磷脂酶D的过程需要以基因工程为基础C.通过氨基酸的增添、替换来实现对磷脂酶D的改造D.改造后的磷脂酶D提高PS产量这一性状不能够遗传〖答案〗B〖祥解〗蛋白质工程概念及基本原理（1）蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。（2）蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质。（3）蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。（4）基本途径：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。【详析】A、改造磷脂酶D应从预期磷脂酶D的功能出发，A错误；B、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，故改造磷脂酶D的过程需要以基因工程为基础，B正确；C、对磷脂酶D进行改造是通过对磷脂酶D基因的脱氧核苷酸序列进行改造而实现的，C错误；D、由于磷脂酶D基因发生了改变，故改造后的磷脂酶D提高PS产量这一性状能够遗传，D错误。故选B。13.大肠杆菌pSC101质粒中含有四环素抗性基因，金黄色葡萄球菌p1258质粒中含有氨苄青霉素抗性基因。用限制酶EcoRI分别处理pSC101和p1258，产物经琼脂糖凝胶电泳后分别得到1个和4个条带。将酶切产物混合后用DNA连接酶处理，然后转化到大肠杆菌中。下列叙述错误的是（）A.pSC101中至少含有1个EcoRI识别位点，p1258中至少含有4个EcoRI识别位点B.进行琼脂糖凝胶电泳时，分子大小相同的DNA片段所形成的条带可能会重叠在一起C.DNA连接酶处理酶切产物后，若仅考虑两种不同DNA片段连接，可得到10种不同序列的DNA片段D.能在含有四环素和氨苄青霉素的培养基中存活的大肠杆菌含有p1258的部分基因〖答案〗C〖祥解〗根据题意，大肠杆菌pSC101质粒中含有四环素抗性基因，金黄色葡萄球菌p1258质粒中含有氨苄青霉素抗性基因。质粒是小型的环状DNA分子，用限制酶EcoRI分别处理pSC101和p1258，产物经琼脂糖凝胶电泳后分别得到1个和4个条带，说明pSC101质粒上有1个限制酶EcoRI识别位点，p1258质粒上有4个EcoRI识别位点。【详析】A、质粒是一种小型的环状DNA分子，用限制酶EcoRI分别处理pSC101和p1258，产物经琼脂糖凝胶电泳后分别得到1个和4个条带，因此pSC101中至少含有1个EcoRI识别位点，p1258中至少含有4个EcoRI识别位点，A正确；B、DNA分子在琼脂糖凝胶中的迁移速率与凝胶浓度、DNA分子大小和构象等有关，因此分子大小相同的DNA片段所形成的条带可能会重叠在一起，B正确；C、根据题意，由于酶切位点相同，产生的末端相同，因此两个不同DNA片段之间连接时存在正向和反向连接，得到不同序列的DNA片段不止10种，C错误；D、根据题意，将酶切产物混合后用DNA连接酶处理，然后转化到大肠杆菌中，大肠杆菌pSC101质粒中含有四环素抗性基因，而金黄色葡萄球菌p1258质粒中含有氨苄青霉素抗性基因，因此能在含有四环素和氨苄青霉素的培养基中存活的大肠杆菌含有p1258的氨苄青霉素抗性基因，D正确。故选C。14.胚胎工程在畜牧业养殖方面具有重要的应用价值，可利用胚胎移植技术繁殖具有高产奶性状的优良个体。下列叙述正确的是（）A.繁殖所得子代的高产奶性状与供受体母牛均有关B.应使用性激素对供体母牛进行超数排卵处理C.为保证移植后的胚胎正常发育需对供受体母牛进行同期发情处理D.为使移入受体子宫的外来胚胎存活需给受体母牛注射免疫抑制剂〖答案〗C〖祥解〗胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到种的、生理状况相同的另一个雌性动物体内，使之继续发育成新个体的技术。【详析】A、繁殖所得子代的高产奶性状与供体的优良性状有关，与受体无关，A错误；B、对供体母牛进行超数排卵处理的方法是用促性腺激素处理，B错误；C、为保证移植后的胚胎正常发育需对供受体母牛进行同期发情处理，使两者处于相同的生理状态，C正确；D、受体子宫对移入的胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎的存活提供了可能，故不需要对受体母牛注射免疫抑制剂，D错误。故选C。15.以菜花为材料进行DNA的粗提取与鉴定实验时，流程如图。下列叙述错误的是（）A.研磨时，研磨液中需含有使蛋白质变性的成分，使蛋白质与DNA分离B.析出时，需向沉淀得到的上清液中加入预冷的体积分数为95%的酒精C.溶解时，需用2mol/L的NaCl溶液，此时DNA的溶解度较大D.鉴定时，向溶解后的溶液中加入二苯胺试剂即可出现蓝色〖答案〗D〖祥解〗1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。2、DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。【详析】A、分离DNA和蛋白质时可根据两者的溶解性和耐受性不同等特点进行分离：如研磨时，研磨液中需含有使蛋白质变性的成分，使蛋白质与DNA分离，A正确；B、DNA不溶于酒精，细胞中的某些蛋白质可溶于酒精，因此离心后加入预冷的体积分数为95%的酒精进行DNA的粗提取，B正确；C、DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度较大，故可用该浓度的NaCl溶液对DNA进行溶解，C正确；D、向DNA溶液中加入二苯胺试剂后还需要沸水浴加热才可出现蓝色，D错误。故选D。二、选择题16.丙烯腈（C3H3N）常被用来生产合成纤维腈纶﹑丙烯酸等，丙烯腈水解酶产生菌能将丙烯腈转化为丙烯酸，可用于生物合成丙烯酸。实验室中筛选丙烯腈水解酶产生菌的过程如图，下列有关叙述错误的是（）A.应在被丙烯腈污染的水体中取样B.②号试管中的培养基以丙烯腈为唯一氮源C.Ⅱ号培养基接种时，需对接种环灼烧3次D.Ⅱ号培养基上的每个菌落产丙烯腈水解酶的能力相同〖答案〗CD〖祥解〗在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。【详析】A、应该在相应的环境中取菌种，则应在被丙烯腈污染的水体中取样筛选丙烯腈水解酶产生菌，A正确；B、②号试管中的培养基以丙烯腈为唯一氮源，对微生物具有选择作用，B正确；C、Ⅱ号培养基中有3个划线区域，应在每次划线前和最后一次划线后对接种环灼烧灭菌，故Ⅱ号培养基接种时，需对接种环灼烧4次，C错误；D、由于DNA在复制过程中可能发生突变，则Ⅱ号培养基上的每个菌落产丙烯腈水解酶的能力不一定相同，D错误。故选CD。17.甲植物（2n=24）细胞核基因具有耐盐碱效应，乙植物（2n=22）细胞质基因具有高产效应。某研究小组用甲、乙两种植物细胞进行体细胞杂交，其过程如图所示，过程Ⅱ可使甲原生质体的细胞质失活，过程Ⅲ可使乙原生质体的细胞核失活。下列叙述错误的是（）A.过程Ⅰ需在无菌水中进行操作B.过程Ⅳ可在高Ca2+-高pH溶液中进行操作C.过程Ⅵ需将杂种植株种在盐碱环境中D.再生植株细胞中含有46条染色体〖答案〗AD〖祥解〗图中Ⅰ-Ⅵ依次表示去壁，使甲原生质体的细胞质失活，使乙原生质体的细胞核失活，原生质体融合，植株组织培养，杂种植株的筛选。【详析】A、过程Ⅰ为去壁，去壁后原生质体无细胞壁保护，若在无菌水中进行操作，会导致原生质体吸水涨破，A错误；B、过程Ⅳ诱导原生质体融合的化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法等，B正确；C、过程Ⅵ需将杂种植株种在盐碱环境中筛选出具有耐盐碱效应杂种植株，C正确；D、由题意可知，杂种植株核遗传物质来自于甲，即再生植株含有24条染色体，D错误。故选AD。18.如图表示科学家利用体细胞核移植技术培育克隆动物的简单流程，下列叙述错误的是（）A.操作①可通过梯度离心的方法去核B.操作②所用的体细胞可为导入外源基因的受体细胞C.操作③可用电融合或PEG激活重构胚D.体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植〖答案〗C〖祥解〗动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。【详析】A、采用密度梯度离心，紫外光短时间照射、化学物质处理等方法都可以去核，A正确；B、操作②所用的体细胞可为导入外源基因的受体细胞，也可以是没有转基因的体细胞，B正确；C、用电融合法、PEG、灭活的病毒等诱导使动物细胞融合，体细胞核移植技术中，可以用物理或化学方法激活重组细胞，使用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，使其完成发育进程，C错误；D、胚胎细胞的全能性高于体细胞，因此体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植，D正确。故选C。19.TaqMan荧光探针是一小段被设计成可以与靶DNA序列中间部位特异结合的单链DNA，该单链DNA的5'和3'端带有短波长和长波长两个不同荧光基团。这两个荧光基团由于距离过近，会发生荧光淬灭，检测不到荧光。PCR反应中，TaqMan探针会结合到与之配对的靶DNA序列上，随后被具有外切酶活性的TaqDNA聚合酶降解，从而解除荧光淬灭的束缚，发出荧光，其机理如下图。下列叙述正确的是（）A.TaqMan探针的碱基序列越长，与靶DNA序列结合的特异性越强B.设计引物1和引物2时，应避免二者的碱基序列存在互补序列C.TaqDNA聚合酶具有外切酶活性，说明TaqDNA聚合酶无专一性D.PCR反应液荧光强度的高低与PCR循环次数呈正相关〖答案〗ABD〖祥解〗PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链。【详析】A、根据碱基互补配对原则，TaqMan探针的碱基序列越长，与靶DNA序列结合的特异性越强，A正确；B、进行引物设计时需要注意的问题是引物长度要适宜、引物中GC含量要适宜、引物自身与引物之间不能存在互补序列，则引物1和引物2，应避免二者的碱基序列存在互补序列，B正确；C、TaqDNA聚合酶发挥外切酶活性和聚合酶活性的部位不同，则不能说明TaqDNA聚合酶无专一性，C错误；D、PCR反应中，TaqMan探针会结合到与之配对的靶DNA序列上，随后被具有外切酶活性的TaqDNA聚合酶降解，从而解除荧光淬灭的束缚，发出荧光，则PCR反应液荧光强度的高低与PCR循环次数呈正相关，D正确。故选ABD。20.同尾酶是指一组识别序列不同，但切出的黏性末端相同的限制酶。下图为EcoRI、BamHI、BglⅡ和NotⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。下列有关叙述错误的是（）A.若DNA分子碱基随机排列，NotI的识别序列出现概率小于其他三种限制酶B.选用两种不同的限制酶切割目的基因，都可以防止目的基因自身环化C.BanHI与BglⅡ属于同尾酶，可切割目的基因上相同的位点D.用BamnHI处理目的基因、BglII处理质粒后，构建的表达载体上不含有这两种酶的识别序列〖答案〗BC〖祥解〗由于同种限制酶切割得到的目的基因或质粒的两端黏性末端相同，会出现自体相连的现象，所以为了保证目的基因与载体的正确连接，通常用两种识别序列和切割位点不同的限制酶同时处理含目的基因的DNA片段与载体。【详析】A、由题图可知，NotI的识别序列具有8个碱基对，而其他三种限制性核酸内切酶的识别序列均为6个碱基对，故若DNA分子碱基随机排列，NotI的识别序列出现概率小于其他三种限制酶，A正确；B、由于同种限制酶切割得到的目的基因或质粒的两端黏性末端相同，会出现自体相连的现象，所以为了保证目的基因与载体的正确连接，通常用两种识别序列和切割位点不同的限制酶同时处理含目的基因的DNA片段与载体，B错误；C、同尾酶是指一组识别序列不同，但切出的黏性末端相同的限制酶。由图可知，BanHI与BglⅡ切出的黏性末端相同，属于同尾酶，但二者的切割位点不同，C错误；D、由图可知，用BamnHI处理目的基因、BglII处理质粒后，重新构建的表达载体上不含有这两种酶的识别序列，D正确。故选BC。三、非选择题21.乳酸菌数量是评价酸奶质量的重要指标。某兴趣小组对A、B、C三个品牌的袋装酸奶进行乳酸菌数量测定，过程如下：配制培养基（见表1）→对样品进行梯度稀释→取0.1mL样品涂布培养→菌落计数（每种酸奶样品均接种了3个平板），结果如表2。表1：牛肉膏蛋白胨酵母膏葡萄糖番茄汁CaCO3琼脂蒸馏水1g1g1g1g20g1.7g2g100ml表2时间菌落数组别样品的测定与出厂间隔天数3天6天9天样品编号A299288289271277274212214210B251265260196200198119125120C175180176127135130108112110空白对照0（1）从物理性质上划分，该过程中所用培养基属于_________培养基。培养基因含CaCO3而不透明，而乳酸菌产生的乳酸能溶解CaCO3，推测培养基中加入CaCO3的作用为__________（答出两点）。（2）设置空白对照的目的是__________。（3）若稀释倍数为107，出厂间隔3天后，1mL样品C中乳酸菌的含量约为__________个/mL。该数值往往比实际数值偏低，原因是__________。（4）由表2结果可以得出的结论是__________。〖答案〗（1）①.固体②.便于对乳酸菌进行计数﹑维持培养基的pH（2）检验培养基是否灭菌彻底（3）①.1.77×1010②.当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（4）A品牌的酸奶中乳酸菌的含量最高，C的最少；酸奶中乳酸菌的数量随着出厂天数的延长，数量呈下降趋势〖祥解〗培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。稀释涂布平板法计算公式：每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M；（C：某稀释度下平板上生长的平均菌落数；V：涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)；M：稀释倍数）【小问1详析】从培养基成分看，该培养基有琼脂凝固剂，属于固体培养基，培养基中加入CaCO3的作用有中和菌体代谢过程中产生的酸类,使培养基的pH能保持在恒定的范围内。乳酸菌发酵产酸使菌落周围碳酸钙溶解，以辨别乳酸菌，也就是说在培养基中加入碳酸钙，观察溶钙圈的大小，就可以知道产酸情况即乳酸菌的多少。【小问2详析】空白对照是指不给予任何处理的对照，目的是检验培养基是否灭菌彻底。【小问3详析】每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M，即（175+180+176）÷3×107=1.77×109。由于当两个或多个菌体连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以计算出的数值往往比实际数值偏低。【小问4详析】由表中数据可推知，A品牌的酸奶中乳酸菌的含量最高，C的最少；酸奶中乳酸菌的数量随着出厂天数的延长，数量呈下降趋势。22.GNA基因和ACA基因是两种抗蚜虫基因，研究人员将二者连接成融合基因后与pB1121质粒载体结合，导入玉米细胞中，最终获得13株玉米植株。分别对其细胞中的总DNA进行提取后，用特定的引物扩增融合基因并进行电泳，结果如图所示。（1）将融合基因与pBI121质粒载体相结合的目的是_________，在融合基因的上游需要含有启动子，其作用是_________。（2）由图分析可知，未能成功导入融合基因的是___________（填编号），若成功导入融合基因的玉米植株未表现出抗蚜虫性状，最可能的原因是__________。（3）由含融合基因的玉米细胞培育成植株的技术称为___________，在培育过程中需使用的植物激素是_________。（4）写出一种在个体水平上鉴定转基因抗蚜虫玉米的方法：__________。〖答案〗（1）①.让融合基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，同时使融合基因能够表达和发挥作用②.RNA聚合酶识别和结合的部位（2）①.6，12，13②.导入的融合基因未能成功表达（3）①.植物组织培养②.生长素和细胞分裂素（4）在获得的转基因植株上接种适龄蚜虫，观察蚜虫的生长繁殖情况〖祥解〗基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体具有启动子、终止子、复制原点和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。【小问1详析】将融合基因与pBI121质粒载体相结合的目的是让融合基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，同时使融合基因能够表达和发挥作用；目的基因上游的启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动基因的转录。【小问2详析】分析图可知，M为标准DNA，15为阳性对照，14为未转基因植株，对比可知，测验结果是阳性的证明是成功导入目的基因，而不显示阳性条带的是6、12、13；若导入的融合基因未能在细胞中成功表达，则玉米植株不会表现出抗蚜虫的性状。【小问3详析】由含融合基因的玉米细胞培育成植株的技术称为植物组织培养，培育过程中需使用的植物激素是生长素和细胞分裂素，生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，生长素与细胞分裂素用量的比值大，有利于根的分化，抑制芽的分化；比值低有利于芽的分化，抑制根的分化；比例适中，有利于愈伤组织的形成。【小问4详析】在个体水平上鉴定转基因抗蚜虫玉米培育是否成功的方法是：在获得的转基因植株上接种适龄蚜虫，观察蚜虫的生长繁殖情况，若蚜虫的生长繁殖受抑制，则转基因抗蚜虫玉米培育成功。23.人乳头瘤病毒（HPV）可诱发细胞癌变，抗-HPV的单克隆抗体可作为宫颈癌的诊断试剂。科研人员以小鼠为实验材料制备抗HPV的单克隆抗体，流程如图所示。（1）图中部位甲是小鼠的_________（器官），为使细胞悬液中一定含有能产生抗HPV抗体的B淋巴细胞、需进行的操作是_________。（2）B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合所依据的原理是_____________，图中筛选1通过用____________进行筛选，筛选2要对杂交瘤细胞Ⅰ进行克隆化培养和抗体检测，其目的是_________。（3）为了得到大量的抗HPV单克隆抗体，可将杂交瘤细胞Ⅱ接种到适宜的动物细胞培养液中进行培养，但杂交瘤细胞Ⅱ的接种量会影响单克隆抗体的产量。科研人员为探究在培养液中杂交瘤细胞П的最佳接种量而进行实验，请写出实验思路：__________。（4）抗HPV的单克隆抗体可作为宫颈癌诊断试剂的原因是_________。〖答案〗（1）①.脾##脾脏②.给小鼠注射适量的人乳头瘤病毒（HPV）（2）①.细胞膜具有流动性②.特定的选择培养基（或HAT培养基）③.获得足够数量的能分泌抗HPV单克隆抗体的杂交瘤细胞（3）将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的若干组，在不同组中接种不同量的杂交瘤细胞，一定且相同时间后测定各培养液中的相应抗体含量（4）能准确识别HPV，并与其发生特异性结合，且可以大量制备（或特异性强、灵敏度高、可大量制备）〖祥解〗单克隆抗体的制备过程：对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；得到相应的B淋巴细胞；将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）；对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体。【小问1详析】在小鼠的脾脏当中获取已免疫的B细胞，所以图中甲是小鼠的脾脏。制备抗HPV的单克隆抗体时，给小鼠注入的抗原是HPV衣壳蛋白，然后从小鼠体内获得能产生相应抗体的细胞。【小问2详析】细胞融合所依据的原理是细胞膜具有流动性。由于小鼠骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上生长，所以，在HAT培养基上存活的杂交瘤细胞既能无限增殖又可以分泌抗体。根据抗原抗体特异性结合的原理、细胞增殖原理，对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，可获得获得足够数量的能分泌抗HPV单克隆抗体的杂交瘤细胞。【小问3详析】为了探究适宜的杂交瘤细胞П的最佳接种量，则实验的自变量是杂交瘤细胞П的接种量，因变量是抗体的含量，则实验思路如下：将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的若干组，在不同组中接种不同量的杂交瘤细胞，一定且相同时间后测定各培养液中的相应抗体含量。【小问4详析】由于抗HPV的单克隆抗体能准确识别HPV，并与其发生特异性结合，且可以大量制备（或特异性强、灵敏度高、可大量制备），则抗HPV的单克隆抗体可作为宫颈癌诊断试剂。24.中国科研团队成功构建了世界首例人-猴嵌合胚胎，即同时具有人和猴细胞来源的胚胎，对器官再生研究具有指导意义。嵌合体培育的部分过程如图所示。（1）图中①为扩展潜能干细胞（EPSCs），体外培养EPSCs时，需定期更换培养液的目的是___________。此外，还需要无菌条件，创造无菌条件的主要措施是___________（至少答出两点）。（2）图中②胚胎最外层为___________，沿其内壁扩展和排列的细胞在后期胚胎发育中的去向是_________。（3）研究嵌合体的目的是培养与人类似的同种器官，以缓解器官移植供体不足的困境，目前器官移植中最大的技术难题是___________。为充分利用嵌合体胚胎以获取更多同种器官，可采用胚胎分割移植。若对图中嵌合胚胎进行分割，应注意的问题是_________。（4）研究人员将图中嵌合体胚胎在体外进行培养，随后胚胎会进入_________期，该时期胚胎的特点是_________。〖答案〗（1）①.清除代谢废物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害②.培养液和所有培养用具进行灭菌、无菌环境下进行操作、在培养液中加入一定量的抗生素（2）①.透明带②.发育成胎盘和胎膜（3）①.避免免疫排斥反应②.应将内细胞团均等分割（4）①.原肠胚②.发生了内、中、外三个胚层的分化〖祥解〗1、胚胎早期发育过程：受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚。囊胚中的滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，内细胞团细胞将来发育成胎儿的各种组织。

2、胚胎干细胞存在于早期胚胎，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能，具有全能性。

3、动物细胞培养的条件：营养（+血清），无菌、无毒的环境（定期更换），温度、pH和渗透压，气体环境（95%空气和5%CO2）。【小问1详析】培养EPSCs时，需要定期更换培养液，目的是以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。创造无菌条件的主要措施是，对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的抗生素，可以保持培养环境处于无菌条件。【小问2详析】图②时期是囊胚期，最外侧是透明带，内壁扩展和排列的、个体较小的是滋养层细胞，聚集在一端的细胞形成内细胞团。滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，内细胞团细胞将来发育成胎儿的各种组织。【小问3详析】在器官移植中要尽可能减少免疫排斥反应，才能保证移植的器官能执行正常的功能；进行胚胎分割时，胚胎分割的次数不宜过多一般以一次为好、若采用囊胚阶段的胚胎应将内细胞团均等分制。【小问4详析】胚胎囊胚期进一步发育是原肠胚期，该时期胚胎出现内、中、外三个胚层的分化。25.胡萝