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文档简介

项目七

水样中生物指标的测定任务一

细菌总数的测定

《生活饮用水卫生标准》（GB5749-2006）规定,菌落总数不能超过100CFU/mL。

一、方法原理

将采集的水样接种于营养琼脂培养基中，在36℃培养48h后，查出培养基上所生长的需氧菌以及兼性厌氧菌的菌落总数即为水样中的细菌菌落总数。项目七水样中生物指标测定二、试剂及仪器

（一）试剂及药品

将上述成分溶于1000mL水中，调节pH至7.4～7.6，分装于玻璃容器中，121℃高压蒸汽灭菌20min，避光干燥保存。

1.营养琼脂培养基

成分质量（g）成分质量（g）蛋白胨牛肉膏103氯化钠琼脂1015～20

2.无菌水

取适量实验用水，1℃高压蒸汽灭菌20min，备用。项目七水样中生物指标测定

（二）实验仪器

高压蒸汽灭菌锅、均质器、恒温培养箱、电炉、天平、无菌平皿、无菌试管、无菌刻度吸管或移液枪、无菌锥形瓶、酒精灯、菌落计数器。

项目七水样中生物指标测定三、操作步骤（一）水样采集

一般在距离水面10～15cm处使用采样瓶采集水样；从水龙头采集自来水时，要先放水3～5min后关闭水龙头，使用火焰灼烧或者酒精消毒后再放水1min，使用采样瓶采集水样。（二）样品测定

1.样品稀释吸取10mL装有90mL无菌水的锥形瓶吸取10mL的水样装有90mL无菌水的锥形瓶1:10水样稀释液1:100水样稀释液┈┈装有90mL无菌水的锥形瓶1:1000水样稀释液┈┈装有90mL无菌水的锥形瓶1:10000水样稀释液项目七水样中生物指标测定（二）样品测定

2.接种培养吸取1mL水样或稀释过的水样项目七水样中生物指标测定灭菌培养皿倾注15～20ml的融化过并冷却到44～47℃的营养琼脂培养基来回转动培养基，使水样与培养基混合均匀培养箱培养基凝固后调节温度在36℃培养48h，然后进行菌落计数（二）样品测定

3.计数方法项目七水样中生物指标测定

（1）首先选择的是菌落总数在30～300的样品，若只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围，则将其菌落总数乘以稀释的倍数作为细菌总数。

（2）当有两个稀释度的水样的菌落数都在30～300时，则计算二者之间的比值，如果比值小于2，则报告两者的平均数；如果比值大于2，则报告稀释度较小的菌落数。

（3）如果所有稀释度的菌落总数都大于300，则报告稀释度最高的菌落总数乘以稀释倍数。

（4）所有稀释度的菌落总数都小于30时，则报告稀释度最低的菌落总数乘以

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