体外受和早期胚胎发育专家讲座

学习目标简述哺乳动物体外受精技术主要操作步骤。简述哺乳动物胚胎早期培养方法。认同体外受精在家畜快速繁殖中主要意义。学习重点（1）体外受精在家畜快速繁殖中主要意义。（2）哺乳动物体外受精技术主要操作步骤。学习难点（1）卵母细胞采集和培养。（2）精子采集和获能。体外受和早期胚胎发育专家讲座第1页1978年7月25日世界首例试管婴儿体外受和早期胚胎发育专家讲座第2页1988年3月10日我国首例试管婴儿诞生著名妇产科教授张丽珠教授与中国首例试管婴儿体外受和早期胚胎发育专家讲座第3页1992年我国首例三胞胎试管婴儿体外受和早期胚胎发育专家讲座第4页1978年7月25日世界首例试管婴儿第一个试管婴儿于1978年7月25日在英国奥尔德姆市医院诞生，她名字叫路易丝.布朗。路易丝.布朗母亲梅.布朗因输卵管阻塞而不能生育。

医生从梅.布朗（时年31岁）体内提取卵子，再取她丈夫（时年38岁）精液，经处理在体外使卵子受精，受精卵分裂形成16细胞胚后重新植入梅.布朗子宫内。9个多月后就生下了路易丝.布朗。体外受和早期胚胎发育专家讲座第5页婴儿真能在试管中发育吗？体外受和早期胚胎发育专家讲座第6页

经过

使卵子和精子在

下成熟和受精，并经过培养发育成

后，再经移植产生后代技术。体外条件人工操作早期胚胎试管婴儿技术：体外受和早期胚胎发育专家讲座第7页依据资料回答以下问题：1.试管婴儿技术包含哪些操作步骤？（体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植）2.试管婴儿培育和母亲正常怀孕过程有何异同？相同之处：都经过有性生殖产生;都要在母体子宫内发育形成胎儿。不一样之处：受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。体外受和早期胚胎发育专家讲座第8页一、从试管牛说起体外受和早期胚胎发育专家讲座第9页牛生育率即使很低，不过牛卵母细胞却相当多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右公牛产生精子数目就更多了伟大构想诞生了试管动物技术体外受和早期胚胎发育专家讲座第10页1982年世界首例试管牛犊问世体外受和早期胚胎发育专家讲座第11页试管动物技术是指经过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并经过培养发育成早期胚胎后，再经移植产生后代技术。精子卵子受精卵早期胚胎移植子宫个体体外受和早期胚胎发育专家讲座第12页1、快速繁殖动物优良品种意义：试管动物技术2、能够处理生育低问题3、能够经过普通家畜繁育良种家畜4、更多有效地利用卵母细胞体外受和早期胚胎发育专家讲座第13页试管动物技术过程：第一步：体外受精

第二步：胚胎早期培养第三步：胚胎移植体外受和早期胚胎发育专家讲座第14页问题：怎样用一个流程图表示体外受精过程？体外受和早期胚胎发育专家讲座第15页胚胎移植采集卵母细胞体外培养采集精子体外获能体外受精早期胚胎培养受体动物（时期：）成熟卵子获能精子MII中期体外受和早期胚胎发育专家讲座第16页主要包含

、

和

等几个主要步骤。概念：采取雌性动物

和雄性动物

，使其在

受精。二、体外受精卵母细胞精子体外卵母细胞采集精子获取受精体外受和早期胚胎发育专家讲座第17页a.怎样使雌性动物排出更多卵子？b.对试验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊怎样采集卵子？c.对于大家畜或大型动物怎样采集卵子？d.采集卵子是否马上能够受精？阅读P69、70思考以下问题：1.卵母细胞采集和培养体外受和早期胚胎发育专家讲座第18页采取主要方法是给供体注射

，使其排出更多卵子，之后从

中冲取卵子，直接与获能精子在体外受精。促性腺激素输卵管a.怎样使雌性动物排出更多卵子？超数排卵处理b.对试验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊怎样采集卵子？对不一样动物,采集卵母细胞方法不一样。1.卵母细胞采集和培养体外受和早期胚胎发育专家讲座第19页大家畜或大型动物，如牛，卵细胞采集：从屠宰场已屠宰母畜

中采集卵母细胞，也能够借助

、

或

等工具，直接从活体动物卵巢中吸收卵母细胞。卵巢超声波(B超)探测仪内窥镜腹腔镜1.卵母细胞采集和培养c.对于大家畜或大型动物怎样采集卵子？d.采集卵子是否马上能够受精？采集卵母细胞，都要在体外经

后，才能与

精子结合完成受精。人工培养成熟获能体外受和早期胚胎发育专家讲座第20页阅读P70、71思索以下问题：a.精子采集有哪些方法？b.体外受精需要哪些前处理？2、精子细胞采集和获能体外受和早期胚胎发育专家讲座第21页2、精子细胞采集和获能（1）采集方法：假阴道法手握法电刺激法a.精子采集有哪些方法？

大家畜或大型动物猪、犬等体型较小，易于控制动物野生或经济动物另外，啮齿类试验动物可在处死后从附睾尾搜集精液。体外受和早期胚胎发育专家讲座第22页2、精子细胞采集和获能（2）体外精子获能方法：培养法:化学诱导法:如：啮齿动物、家兔和猪等如：牛、羊等放入人工配制获能液中放在一定浓度肝素或钙离子载体A23187溶液中b.体外受精需要哪些前处理？体外受和早期胚胎发育专家讲座第23页卵巢卵母细胞新鲜或解冻精液卵母细胞培养精子离心处理MⅠ期卵母细胞MⅡ期卵母细胞精子获能处理获能精子体外受精受精卵培养在获能溶液或专用受精溶液中完成受精过程3、体外受精过程体外受和早期胚胎发育专家讲座第24页人工授精就是体外受精吗？人工授精就是用人工方法将精液注入雌性动物体内，所以受精过程在体内完成。体外受精受精过程在体外完成。概念辨析体外受和早期胚胎发育专家讲座第25页CO2培养箱三、胚胎早期培养复习：动物细胞培养条件是什么？糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清等动物细胞培养液成份?体外受和早期胚胎发育专家讲座第26页精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检验受精情况和受精卵发育能力。培养液成份：有机盐、无机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等三、胚胎早期培养体外受和早期胚胎发育专家讲座第27页动物胚胎培养液成份与动物细胞培养液成份比较项目动物胚胎培养液动物细胞培养液盐类营养物质调整物质特有物质无机盐和有机盐氨基酸、核苷酸维生素、激素血清无机盐、微量元素促生长因子糖、氨基酸血清、血浆三、胚胎早期培养体外受和早期胚胎发育专家讲座第28页培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷动保留三、胚胎早期培养不一样动物胚胎移植时间不一样牛、羊：小鼠、家兔：试管婴儿：桑椹胚或囊胚阶段可在更早阶段移植8~16个细胞阶段注：胚胎发育主要场所是母体体外受和早期胚胎发育专家讲座第29页为充分利用屠宰母畜卵巢上卵母细胞，不妨将屠宰场和“胚胎工厂”合建。这么屠宰场产品就不但是鲜肉，还会生产出大量胚胎和胚胎工程所需原材料，你看这个想法可行吗？奇思妙想当前，从屠宰场废弃卵巢中，每个卵巢平均可采集10枚左右可用卵母细胞，经体外培养成熟和受精后约可获4枚可用胚胎，经过移植给受体母牛，最终可得到1～2头犊牛。牛体外受精胚胎工厂化生产已经成为可能。体外受和早期胚胎发育专家讲座第30页体外受精过程检验受精情况和受精卵发育能力体外受和早期胚胎发育专家讲座第31页存放条件？体外受和早期胚胎发育专家讲座第32页采集良种母牛卵母细胞卵母细胞体外培养采集良种公牛精子精子体外获能体外受精良种牛体外受精胚胎胚胎移植受体牛良种犊牛成熟期牛屠宰加工厂市场采集卵巢中卵母细胞“试管牛”工厂化生产技术流程图思索：试管牛产生属于克隆吗？体外受和早期胚胎发育专家讲座第33页早期胚胎胚胎移植C代孕母体D新个体（与B遗传物质相同）克隆动物培育过程A雌性动物卵子去核细胞质取核B动物体细胞核移植显微注射重组细胞体外受和早期胚胎发育专家讲座第34页有性生殖

无性生殖核移植技术、胚胎移植遵照

不遵照体外受精胚胎移植试管动物克隆动物发育起点生殖方式技术伎俩遗传物质遗传规律比较试管动物和克隆动物来自2个个体主要来自核供体

受精卵重组细胞体外受和早期胚胎发育专家讲座第35页胚胎移植采集卵母细胞体外培养采集精子体外获能体外受精早期胚胎培养受体牛小结（时期：）

1）超数排卵（试剂）

2）活体取卵（仪器）

3）从屠宰卵巢取卵方法①②③（方法，试剂）（试剂）（培养条件、目标阶段）成熟卵子获能精子MII中期方法体外受和早期胚胎发育专家讲座第36页1、关于牛体外受精及胚胎工厂化生产叙述，正确是A.精子和卵细胞受精形成受精卵后即可移入母牛子宫B.采集卵母细胞应马上与精子共同放入培养液才能形成受精卵C.成熟卵细胞与搜集来精子相遇形成受精卵，需培养到一定阶段才可移植D.体外受精胚胎工厂化生产即胚胎发育和受精过程只需在体外进行2、以下当代生物技术结果取得必须经过胚胎移植是

A.转基因良种鸡B.重组酵母乙肝疫苗

C.单克隆抗体D.试管婴儿C

D

巩固练习体外受和早期胚胎发育专家讲座第37页3、采集卵母细胞，在体外经人工培养成熟后，才能与获能精子受精，以下原因不正确是A.卵子从输卵管中冲出也要经历类似精子获能过程B.动物排出卵子成熟程度不一样C.体外人工培养至减数分裂第二次分裂中期时才成熟D.冲出卵子还需要培养一段时间由小变大D

4、以下关于滋养层细胞叙述，不正确是 A.囊胚滋养层细胞未来发育成胎盘和胎膜B.能够用滋养层细胞做DNA分析性别判定C.囊胚滋养层细胞就是未来原肠胚外胚层D.滋养层细胞沿透明带内壁扩展和排列C

体外受和早期胚胎发育专家讲座第38页

5、以下相关胚胎工程叙述，正确是

A.“试管动物”生殖方式属于无性生殖

B.卵裂球时期每一个细胞体积比受精卵大

C.经过胚胎移植技术可充分发挥良种母畜繁殖潜力

D.对某一胚胎干细胞移植，产生动物中雄性和雌性概率各占1/2C

6、以下关于胚胎工程叙述，正确是（ ）

A.经过胚胎体外培养可直接取得新生儿

B.超数排卵技术要使用一定激素

C.胚胎移植中受体与供体必须都为优良品种

D.受体母畜需要遗传性状优良品种，供体母畜可用遗传性状普通品种B

体外受和早期胚胎发育专家讲座第39页7、“试管婴儿”技术是经过将不孕夫妇精子和卵细胞取出在试管中完成受精，并在试管中培养受精卵使其发育到桑椹胚或囊胚阶段，再将胚胎移入女性子宫内发育成胎儿。它不但使一部分不能生育男女重新取得了生育机会，也为人类优生开辟了新路径。据此回答：（1）“试管婴儿”技术在生物学上所依据原理是

A.有性生殖 B.组织培养

C.克隆技术 D.基因工程（2）“试管婴儿”形成用到以下哪些技术？

（填序号）①体外培养②人工授精 ③胚胎移植④核移植A①②③体外受和早期胚胎发育专家讲座第40页8、下列图是培育能产生凝血因子牛过程示意图，回答相关问题：（1）为能从良种母牛体内一次取得多枚卵子，能够采取

方法。据报道，这种技术已经被滥用于人类生育中，从而出现许多人工“多胞胎”，这种技术带来危害之一是

。（2）在过程③中，当一个精子进入卵细胞后会激发卵子发生反应，如透明带反应等，其意义是

。过程⑥包括技术是