人员卫生和微生物基础知识培训-高祥丽

人员卫生和微生物学知识培训质量管理部高祥丽2017.3.1目录01020304法规要求

人员卫生要求(更衣、清洁、消毒、灭菌）污染源微生物基础知识法规要求1.7.1凡在洁净室（区）工作的人员应当定期进行卫生和微生物学基础知识、洁净作业等方面培训。1.7.2临时进入洁净室（区）的人员，应当对其进行指导和监督。1.8.1应当建立对人员的清洁要求，制定洁净室（区）工作人员卫生守则。1.8.2人员进入洁净室（区）应当按照程序进行净化，并穿戴工作帽、口罩、洁净工作服、工作鞋。法规要求——

《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械现场检查指导原则》法规要求1.9.1应当制定人员健康要求，建立人员健康档案。1.9.2直接接触物料和产品的人员每年至少体检一次。患有传染性和感染性疾病的人员不得从事直接接触产品的工作。法规要求——

《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械现场检查指导原则》法规要求1.10.1应当明确人员服装要求，制定洁净和无菌工作服的管理规定。工作服及其质量应当与生产操作的要求及操作区的洁净度级别相适应，其式样和穿着方式应当能够满足保护产品和人员的要求。无菌工作服应当能够包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留人体脱落物。1.10.2洁净工作服和无菌工作服不得脱落纤维和颗粒性物质。法规要求——

《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械现场检查指导原则》法规要求*2.9.1应当根据所生产的无菌医疗器械的质量要求，确定在相应级别洁净室（区）内进行生产的过程，避免生产中的污染。2.20.1洁净室（区）内操作台应当光滑、平整、不脱落尘粒和纤维，不易积尘并便于清洁处理和消毒。法规要求——

《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械现场检查指导原则》法规要求2.21.1生产厂房应当设置防尘、防止昆虫和其他动物进入的设施。2.21.4在其他洁净室（区）内，水池或地漏应当有适当的设计和维护，并安装易于清洁且带有空气阻断功能的装置以防倒灌，同外部排水系统的连接方式应当能够防止微生物的侵入。法规要求——

《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械现场检查指导原则》法规要求3.10.1与物料或产品直接接触的设备、工艺装备及管道表面应当光洁、平整、无颗粒物质脱落、无毒、耐腐蚀，不与物料或产品发生化学反应和粘连，易于清洁处理、消毒或灭菌。7.13.1应当制定洁净室（区）的卫生管理文件，按照规定对洁净室（区）进行清洁处理和消毒，并保留记录。法规要求——

《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械现场检查指导原则》A概念B分类C特点D作用及危害微生物基础知识微生物基础知识微生物的概念——是所有形体微小，单细胞或个体结构较为简单的多细胞，甚至没有细胞结构的低等生物的统称。微生物基础知识微生物的分类（按结构）非细胞型微生物：体积微小，不能通过除菌滤器。如病毒、类病毒、朊病毒。原核细胞型微生物：仅有原始核质，无核膜或核仁，细胞器不很完善。如细菌、支原体、衣原体、螺旋体、放线菌。真核细胞型微生物：细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，细胞器完整。如真菌，单细胞-酵母，多细胞-霉菌、原生动物、藻类。微生物基础知识微生物的分类自然界中主要的微生物有：细菌、病毒、真菌。微生物基础知识几种微生物的比较：肉眼不能直接观察到微生物，必须经光镜或电镜放大几百倍，乃至几万倍方能看到。类型真菌细菌立克次体衣原体支原体病毒直径（μm）1~5.00.5~2.00.2~0.50.2~0.30.2~0.25<0.25可见性光镜光镜光镜光镜勉强可见光镜勉强可见电镜微生物基础知识自然界中的主要微生物（1）细菌：根据其外形结构、大小、色泽、透明度、粘稠度、边缘形状及其他特征来区别各种不同的菌类。

葡萄球菌大肠杆菌螺旋菌弧菌微生物基础知识自然界中的主要微生物（2）病毒：体积最小，结构最简单，没有细胞结构呼吸道病毒、肠道病毒、肝炎病毒虫媒病毒、疱疹病毒、逆转录病毒病毒大多能通过滤菌器，故俗称滤过性病毒。腺病毒HIV病毒流感病毒

virus-influenza猪流感病毒

非典SARS冠状病毒

微生物基础知识自然界中的主要微生物（3）真菌真菌是体积最大，结构比较复杂的微生物。对热的抵抗力不强，60℃加热1小时即被杀死。而对干燥、日光、紫外线和一些化学消毒剂有抵抗力，对2.5%碘酒和10%甲醛较敏感。分为

单细胞真菌：酵母菌

多细胞真菌：霉菌酵母菌微生物基础知识白色念珠菌黑曲霉菌：可引起烧伤病人皮肤感染或真菌性肺部感染美丽的霉菌

微生物基础知识微生物繁殖的最适宜条件微生物酸碱度温度细菌pH7.0~7.537℃真菌(霉菌、酵母菌）pH4.5~6.022~28℃微生物的特点分布广生长旺适应强种类多繁殖快易变异代谢强转化快微生物的特点种类多——微生物的数量和种类是十分惊人的。一滴水，一颗土粒往往都是一个微生物“社会”。自然界已知的微生物就有10万种左右。有人估计，这个数仅占自然界微生物种类的1/10。以土壤内的生存密度最大，1克较肥活的土壤常含有几亿到几十亿个微生物；贫瘠土壤每克也含有几百万到几千万个，一只肮脏的苍蝇，全身能携带5亿多个细菌，三对足可以粘附700万至1000万个细菌，可见微生物的密集度之大。微生物的特点分布广——微生物是地球上分布最广泛的一类生物。在辽阔的自然界中，无论土壤、水域、空气以及动物、植物、人体内外都有大量微生物存在。从炎热的赤道，到酷寒的极地；从阳光强烈的万米高空，到终年不见阳光的万米海底；从绿色无边的平原，到荒芜人烟的沙漠；从冰雪高山到泥泞沼泽，到处都有微生物的踪迹。

微生物的特点分布广——有些微生物能够在异常的条件下生存.例如:耐酸菌能在10%的硫酸溶液中生活，暗热菌能在温度高达98℃以上的温泉中生活，有的甚至在高达200～300℃的深海火山口附近也能活动，嗜盐菌在含盐量高达23%～25%的死海里，甚至30%的氯化钠溶液中和盐块上存活.微生物的特点繁殖快——二分裂的无性繁殖（即裂殖，通过细胞分裂的方式繁殖）一般细菌约20~30分钟繁殖一代1小时

=8个

2小时

8×23=64个

3小时

64×23=512个

24小时

1×2=4.7*10

7221微生物的特点代谢旺——微生物的个体虽然微小，但却有很大的表面积与体积的比值，能迅速地和周围环境进行物质交换。例如有研究认为，活跃的大肠杆菌，每小时可消耗自重2000倍的糖。乳酸菌每小时可产生其自重1000～10000倍的乳酸。

微生物的特点易变异——由于微生物的个体小，对外界环境条件直接接触而表面特别敏感，因此，当环境剧烈变化时，多数个体容易死亡而被淘汰，少数个体则发生变异而适应新的环境。这种易变性，从利用微生物的角度讲，既有利又有弊。

微生物基础知识微生物的作用及危害微生物的作用绝大多数微生物对人和动物是有益的，已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。例如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。微生物基础知识微生物的危害微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，这些具有致病性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传染病（感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。

从医疗器械生产的角度讲，微生物对其原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格、直接或间接对人类造成危害的重要因素。

传播污染的五大媒介01空气02水03表面04人体05物料污染源污染源第一媒介空气空气并不是产生污染的介质，但它是污染的危险携带者。微生物常常依附在尘埃微粒的表面而悬浮在空气中，使空气成为污染产品的重要媒介。这就是要建立密闭厂房和空气净化系统的原因。污染源防止空气污染的措施合适的空气净化系统（空气过滤器的合理应用）。合适的检查空气洁净的方法。合适的空气净化系统的验证规程。合适的空气净化系统的维修规程。请记住：空气中存在的尘埃微粒是含有微生物(细菌等)的。空气是侵袭我们产品的污染物的主要媒介。因此，尽量保持空气的洁净是极为重要的。污染源第一媒介空气-空气洁净度要求洁净度级别尘粒最大允许数/个·m-3微生物最大允许数

≥0.5μm≥5μm沉降菌/个·皿-1100级≤35000≤110000级≤35000≤2000≤3100000级≤3500000≤20000≤10300000级≤1050000060000≤15污染源第二媒介水水中含有微生物赖以生存和繁殖所必须的养料，如有机物和盐类。绝对的纯水无微生物生长，但实际无论怎样蒸馏和过滤，不可能得到绝对的纯水，微量的可溶性物质仍可被微生物所利用。国家食品药品监督管理总局关于发布医疗器械工艺用水质量管理指南的通告（2016年第14号）污染源防止水污染的措施选择合适的工艺用水处理设备。（满足产品工艺要求）合适的水质监测规程。合适的设备维护保养规程。合适的设备操作规程。合适的水系统验证规程。污染源第三媒介表面表面包括：天花板、墙壁、地面、设备、容器、工具或桌子等。由于空气中的湿度，所有表面都包上一层含水的薄膜。这层薄膜由于静电吸引而饱含尘埃微粒，有很多时候，表面还覆盖一层油状物质，此层油膜易受到尘粒污染。表面因尘埃微粒和微生物由空气传播的回降而受到污染。污染源防止表面污染的控制措施合适的材质控制与选用。合适的消毒灭菌规程。合适的验证方法。合适的维修规程。

合适的清场管理规程和清洁卫生制度。请记住：一个表面看起来很干净，而实际上已经被千百万个微生物所污染，除非已经做了正确的消毒灭菌。

污染源第四媒介人人的头发和皮肤。水滴——如呼吸、咳嗽和喷嚏衣着。化妆品和珠宝首饰。人是最常见的传染源。事实上，人们常说，人是最不清洁的成份，最大的污染源。为什么呢?一个原因，人体是一个永不休止的污染媒介。当您每天来上班时，您也许随身携带将几百万细菌。

污染源皮肤表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、绿脓杆菌、耻垢杆菌等口腔链球菌（甲型或乙型）、乳酸杆菌、螺旋体、梭形杆菌、白色念球

菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏球菌、类白喉杆菌等胃正常一般无菌肠道类杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌、厌氧性链球菌、粪链球菌葡萄球菌、

白色念球菌、乳酸杆菌、变形杆菌、破伤风杆菌、产气荚膜杆菌等鼻咽腔甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄

球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等眼结膜皮表葡萄球菌、结膜干燥杆菌、类白喉杆菌等污染源人是最大的污染源

(1)人的头发和皮肤

每分钟从人类皮肤中要散发出约10,000个微生物。我们的手上，也拥有大量的微生物。此外，在人们正常的日常活动中都接触大量微生物。皮肤上经常存在白色葡萄球菌、枯草杆菌、类白喉杆菌、大肠杆菌等，有时还有非致病性的抗酸菌、真菌等。污染源人是最大的污染源

(2)水滴呼吸和咳嗽将产生出大量水滴，这种水滴既含有尘粒污染也含有微生物污染。口腔是对污染最为敏感的地区，常见的微生物有白色葡萄球菌、类白喉杆菌、乳酸杆菌、放线菌、真菌、螺旋体等。呼吸道常存在空气中的细菌，如葡萄球菌、类白喉杆菌；在鼻咽部还有链球菌、奈氏菌属。一次咳嗽或喷嚏将把千百万个微生物引入工作环境内。污染源人是最大的污染源(3)衣着从可洗涤的纺织物中，可能散发出棉绒和淀粉粒。而从羊毛、开士米和其它松软的针纺织物中也可能散落出纤维和磨损下的微粒。污染也可能通过我们的鞋子进入工作场所。

污染源人是最大的污染源(4)化妆品和珠宝手饰

发胶、香水、睫毛膏、香粉等，为微生物污染提供了极好的源泉。耳环、戒指、项链、手链能传播微生物污染。如果，一小片珠宝碎片落入一批产品中，则可能引起严重的尘粒污染。人是最大的污染源坐着不动能产生10万个颗粒走能产生500万个颗粒跑能产生1500万个颗粒人是

最大的

污染源人体内外表面广泛存在微生物人体携带的微生物根据卫生情况不同因人而异污染源人是最大的污染源难以觉察的口腔微滴污染源第五媒介物料物料系指原料、辅料和包装材料等。原辅料可能将大量的微生物带入到产品中。因此，选用符合标准的原辅料，将有利于控制产品和环境的污染水平。来源于动物的原料或辅料（如明胶），有可能被动物病原体所污染；来源于植物的原料或辅料（如淀粉）则可能被多种细菌、霉菌、酵母菌所污染。原辅料的处理方法因产品类型而异，许多原辅料需进行消毒或灭菌处理。植物药材可用晾晒、烘烤方法使之充分干燥，以减少微生物繁殖。污染源第五媒介物料原辅料在储藏过程中必须注意环境条件。包装材料，特别是内包装材料，一方面包装产品，另一方面防止外界微生物进入产品中。若处理不当，在产品储藏和运输过程中，极易引起污染，造成严重后果。总之，包装材料应考虑不同需要加以清洁或消毒处理进行合理封装。原则是尽量减少微生物数量，预防发生污染。

更衣A清洁B消毒C灭菌D保证卫生方法人员卫生要求一、更衣-正确洗手靠近洗手池，用清水润湿双手及手腕以上10厘米取适量洗手液，两手搓拭手心、指缝及手背一分钟。边冲洗边搓拭，至无泡沫为止，用手背关上水龙头。烘手器烘干双手（注意不要把水溅到地上）。人员卫生要求洗手的细菌对照试验未洗的手只用清水洗的手

洗净的手洗净的手

(用皂液)(用皂液+消毒剂)

人员卫生要求一、更衣更衣需从上到下，上衣全部包入裤子中。需要将头发、胡须等相关部位遮盖、包裹。穿上合适的鞋子和/或鞋套。戴手套，手套把袖口套好。连体服须按从下到上的顺序穿戴。确保包裹效果，避免带入洁净区外的污染物人员卫生要求一、更衣正确穿戴洁净服，必须包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留人体脱落物；口罩要罩住口鼻；洁净鞋应能遮盖住全脚。并定期按规定清洗。离开洁净室，必须脱掉洁净服装。YESNONO人员卫生要求一、更衣YESNO人员卫生要求不能佩戴手表、首饰等人员卫生要求定时或在任何关键操作前，应消毒手套人员卫生要求二、清洁-清洁剂清洁剂：是指用于移除设施和设备表面可能影响消毒剂效力和潜在微生物之残留物的介质。清洁剂的选择标准：（中性洗涤剂）

（1）能有效溶解残留物，不腐蚀设备，且本身易被清除；（2）随着环境保护标准的提高，要求清洁剂对环境尽量无害或

可被无害化处理；（3）满足以上要求的前提下应尽量廉价。人员卫生要求二、清洁-清洁顺序

1、天花板—墙壁—与墙壁连接的物体—管道—台面—设备—地面。2、先物后地，先零后整，先上后下，先内后外，先拆后洗。3、不要在清洁过的地面上走动。人员卫生要求三、消毒-消毒剂分类如果按照化学消毒剂的作用水平，其种类可以分为如下类别：高水平（高效）消毒剂：可杀灭一切微生物，包括细菌繁殖体、细菌芽孢、真菌、结核杆菌、亲水病毒、亲脂病毒（戊二醛、二氧化氯、过氧乙酸、环氧乙烷等）；中水平（中效）消毒剂：除不能杀灭细菌芽孢外，可杀灭其他各种微生物（醇类消毒剂、酚类消毒剂、含碘消毒剂等）；低水平（低效）消毒剂：可杀灭细菌繁殖体、真菌和亲脂病毒，不能杀灭细菌芽孢、结核杆菌和亲水病毒（季铵盐类消毒剂、双胍类消毒剂等）。人员卫生要求三、消毒-消毒剂分类如果按照化学消毒剂的化学性质，其种类可以分为如下类别：醛类：甲醛、戊二醛等；醇类：乙醇、异丙醇等；酚类：苯酚（石炭酸）、甲酚皂溶液（来苏儿）等；含氯消毒剂：次氯酸钠、二氯异氰尿酸钠等；含碘消毒剂：碘伏、碘酊等；氧化型消毒剂：臭氧、二氧化氯、过氧化氢、过氧乙酸等；杂环类消毒剂：环氧乙烷、环氧丙烷等季铵盐类消毒剂：苯扎氯铵（洁尔灭）、苯扎溴铵（新洁尔灭）等；双胍类消毒剂：氯己定（洗必泰）、聚六亚甲基胍等；其他消毒剂：高锰酸钾、三氯生、乳酸、强氧化高电位酸性水等。保证卫生方法三、消毒剂——对微生物细胞的作用机理作用部位消毒剂细胞壁甲醛、次氯酸盐、汞剂细胞膜，引起细胞点位势变化苯胺类和六氯酚类细胞膜的酶，影响电子转运途径六氯酚类作用于三磷酸腺苷洗必泰和过氧乙烯类作用于含硫基的酶类过氧乙烯、戊二醛、过氧化氢、碘剂和汞剂影响细胞渗透酒精、洗必泰、季铵盐类细胞质洗必泰、乙醛、六氯酚类、季铵盐类核糖体过氧化氢、汞剂核酸次氯酸盐含硫醇基团过氧乙烯、戊二醛、过氧化氢、汞剂、次氯酸盐含氨基基团过氧乙烯、戊二醛、次氯酸盐全面氧化过氧乙烯、戊二醛、次氯酸盐保证卫生方法★常用消毒剂种类和用途类别作用机制常用种类用途酚类蛋白变性，细胞膜损伤石炭酸地面、器具表面、皮肤消毒醇类蛋白变性75％酒精皮肤、体温计消毒氧化剂氧化、蛋白沉淀二氧化氯地面、器具表面、皮肤消毒重金属盐氧化、蛋白酶变性红汞、硫柳汞皮肤、粘膜、小创伤消毒氧化剂氧化、蛋白沉淀过氧乙酸、碘酒塑料、玻璃器材、皮肤消毒表面活性剂蛋白变性，细胞膜损伤0.1％新洁而灭地面、器具表面、皮肤消毒保证卫生方法四、灭菌采用灭菌方法的主要目的是：杀灭或除去所有微生物繁殖体和芽胞，最大限度地提高药物制剂的安全性，保护制剂的稳定性，保证制剂的临床疗效。生产中，通常的灭菌方法可分为二大类：物理灭菌法化学灭菌法保证卫生方法物理灭菌法是利用蛋白质与核酸具有遇热、射线不稳定的特性，采用加热、射线和过