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文档简介
ICS07.080
A21
中华人民共和国国家标准
GB/TXXXXX—201X
生物产品降解表面活性剂功效评价
技术规范
Technicalspecificationsforefficacyevaluationofsurfactant
degradationbybiologicalproduct
(征求意见稿)
201X-XX-XX发布201X-XX-XX实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
发布
中国国家标准1化管理委员会
GB/T××××—201×
GB/T××××—201×
生物产品降解表面活性剂功效评价技术规范
1范围
本标准规定了生物产品降解表面活性剂效果评价试验原理、仪器设备及器具、试剂与材料、试验步
骤、结果分析。
本标准适用于微生物和酶生物产品降解表面活性剂效果评价。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水
GB/T15818表面活性剂生物降解度试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
生物产品biologicalproducts
利用生物技术获得的产品。
3.2
降解degradation
表面活性剂在一定条件下由生物产品引起的原始母体分子特性在一定程度上的消失。
3.3
降解率degradationrate
表面活性剂在一定条件下降解前后浓度的百分比。
4试验原理
一定条件下生物产品使表面活性剂发生降解后,显色剂与剩余表面活性剂反应生成有色物质,利用
分光光度计在一定波长下测定有色物质吸光度值,其吸光度值与剩余表面活性剂浓度成正比,通过比较
降解前后表面活性剂浓度变化,评价生物产品降解效果。
5仪器设备及器具
1
GB/T××××—201×
5.1电子天平:精度为0.001g和0.01g。
5.2pH计:精度为0.01pH单位。
5.3微量移液器:10μL~1000μL。
6试剂与材料
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,实验用水均为GB/T6882规定的二级水。
6.1表面活性剂储备溶液
分别称取表面活性剂标准品1.000g,用三氯甲烷溶解并定容至100mL容量瓶中,配制成浓度为1
g/L的储备溶液,于冰箱冷冻室中保存。
6.2基础营养基溶液
按照GB/T15818要求进行配置。
7试验步骤
7.1试验设计
不同类型生物产品降解表面活性剂效果试验设计应符合表1要求。
表1生物产品降解表面活性剂效果试验设计
产品种类
项目
微生物产品酶产品
1.供试样品
处理设计2.失活样品
3.空白对照
阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、两性离子表面活性剂、乙氧
表面活性剂选择
基类表面活性剂、烷基糖苷类表面活性剂
重复次数不少于3次
反应条件按正交试验结果确定
7.2待测微生物试验实施
7.2.1供试样品处理
固体产品应进行研磨处理,制成粉末状供试样品。
7.2.2失活样品处理
取供试的固体或液体微生物样品进行121ºC,30min杀菌处理。
7.2.3最佳反应体系确定
250ml三角瓶中加入100ml基础营养基溶液,121℃,20min灭菌,冷却。设计正交实验,按照
供试样品的影响因素宜选取反应温度、反应转速、底物浓度、反应时间等,确定最佳反应体系条件。
2
GB/T××××—201×
7.2.4降解处理试验
取250mL三角瓶9个,空白样3个,供试样品瓶3个,失活样品瓶3个。分别向9个瓶中加入100mL基
础营养基溶液,进行灭菌处理后备用。按照最佳反应体系条件进行降解试验。
7.3待测酶试验实施
7.3.1供试样品处理
固体产品应用缓冲溶液溶解。
7.3.2失活样品处理
用缓冲溶液溶解后的固体样品或液体酶样品在100ºC环境下进行15min去酶活处理。
7.3.3最佳反应体系确定
250ml三角瓶中加入100ml缓冲溶液,设计正交实验,影响因素宜选取酶量、底物浓度、pH值、
反应时间等,确定最佳反应体系条件。
7.3.4降解处理试验
取250mL三角瓶9个,空白样品瓶3个,供试样品瓶3个,失活样品瓶3个。分别向9个瓶中加
入100mL缓冲溶液。按照最佳反应体系进行降解试验。
7.4浓度测定
根据表面活性剂的特性,分别按GB/T15818附录A、附录B、附录C、附录D中的方法进行。
8结果分析
8.1结果计算
降解率按照式(1)计算:
()
'…………..1
�0−�1−�0−�2−�0−�
式中:�=�0×100%
D——底物的降解率(%);
ρ0——为反应开始时的起始底物浓度(mg/L);
ρ1——为供试样品反应后的残留底物浓度(mg/L);
ρ2——为失活样品反应后的残留底物浓度(mg/L);
3
GB/T××××—201×
ρ′——为空白样品反应后的残留底物浓度(mg/L)。
以平行样的平均值为最终的降解率值,计算结果保留到小数点后两位。
8.2结果判定
以降解率的大小评价被测试生物产品的降解功效:降解率大于等于80%,小于100%时,降解效果为
好;降解率大于等于60%,小于80%时,降解效果为良好;降解率大
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