液相色谱峰分叉了怎么办 液相色谱常见问题解决方法

第第页液相色谱峰分叉了怎么办液相色谱常见问题解决方法做液相色谱的同学基本都会碰到分叉峰，很多时候，这都意味着硬件或者方法某些地方可能显现问题。今日我们就一起看看导致峰分叉的原因，以及如何解决这个问题。

首先，我们需要判定这到底是一个峰，还是两个峰？

A图主峰前面有一个肩峰这到底是峰形不好，还是另外一个化合物没分开呢？判定方法：降低该成分在样品中的浓度B图是降低该成分浓度后进样后得到的色谱图，假如这是一个峰那肩峰也应当响应变小，但是这个例子里，肩峰没有变小这应当是另外一个化合物。这时候，我们就要考虑如何更改方法，将这两个东西分开。

假如全部峰的峰形都不好一般来说，一个样品都会出多个峰，绝大多数时候在每个峰上面都显现肩峰比如像下面这样:这种情况一般都是管路连接、液相色谱柱头塌陷或者柱头的筛板被堵导致的。

如何解决液相色谱柱头筛板被堵的问题呢？

01反冲柱出口放空，冲20—30ml流动相。虽然液相色谱柱上都有表明使用方向，但是对于硅胶基质的色谱柱基本都可以反冲。将柱头污染物如泵密封圈的碎屑，样品中的污染等冲走，就能解决问题。02更换或清洗筛板现在估量做这个事情的人不多，但是假如有废的液相色谱柱，想练练也未尝不可。将筛板取下来，用超声波清洗器清洗，晾干后安装；假如清洗后仍旧没有效果则需要更换新的筛板。

当然，还是要提倡大家注意样品上机之前的前处理和适时更换磨损的泵密封圈。有条件的还是用保护柱，大不了就换保护柱，也比换色谱柱成本更低。

高效液相色谱仪的构成及分类

一.高压输液系统

贮液装置、高压输液泵、过滤器、脱气装置等

1.贮液器：贮液器用于存放溶剂。溶剂必需很纯，贮液器材料要耐腐蚀，对溶剂呈惰性。贮液器应配有溶剂过滤器，以防止活动相中的颗粒进进泵内。溶剂过滤器一般用耐腐蚀的镍合金制成，空隙大小一般为2mm。

2.脱气装置：脱气的目的是为了防止活动相从高压柱内流出时，开释出气泡进进检测器而使噪声剧增，甚至不能正常检测。

3.高压输液泵高压输液泵是高效液相色谱仪的紧要部件，是驱动溶剂和样品通过色谱柱和检测系统的高压源，其性能好坏直接影响分析结果的牢靠性。

对高压泵的基本要求是：

①流量稳定；②输出压力高，最高输出压力为50Mpa；③流量范围宽，可在0.01～10ml／min范围任选。④耐酸、碱、缓冲液腐蚀。⑤压力波动小。

2.梯度洗脱装置梯度洗脱是利用两种或两种以上的溶剂，依照确定时间程序连续或阶段地更改配比浓度，以达到更改活动相极性、离子强度或pH值，从而进步洗脱本领，改善分别的一种有效方法。当一个样品混合物的容量因子是范围很宽，用等度洗脱时间太长，且后出的峰形扁平不便检测时，用梯度洗脱可以改善峰形、并缩短分别时间。HPLC的梯度洗脱与GC的程序升温相像，可以缩短分析时间，进步分别效果。使全部的峰都处于较佳分别状态，而且峰形尖而窄。

二.进样器

进样器一般要求密封性好，死体积小，重复性好，保证中心进样，进样时对色谱系统的压力和流量波动小，并便于实现自动化。

高压进样阀是目前广泛接受的一种方式。阀的种类很多，有六通阀、四通阀，双路阀等。以六通进样阀较为常用。

三.分别系统

色谱分别系统包括色谱柱、固定相和活动相。色谱柱是其核心部分，柱应具备耐高压、耐腐蚀、抗氧化、密封不漏液和柱内死体积小、柱效高、柱容量大、分析速度快、柱寿命长的要求。通常接受优质不锈钢管制成。

色谱柱按内径不同可分为常规柱、快速柱和微量柱三类。

常规分析柱柱长一般为10～25cm，内径4～5mm，固定相颗粒直径为5～10mm。为了保护分析柱不受污染，一般在分析柱前加一短柱，约数厘米长，称为保护柱。

（微量分析柱内径小于lmm，凝胶色谱往内径3～12mm，制备往内径