发酵过程染菌及其防治

纯种培育。染菌对发酵的影响一、染菌对不同发酵过程的影响1、青霉素发酵过程：由于很多杂菌都能产生青霉素酶，因此不管染菌是发生在害格外严峻。2、核苷或核苷酸发酵过程：由于所用的生产菌种是多种养分缺陷型微生物，其基中的养分成分快速被消耗，严峻抑制了生产菌的生长和代谢产物的生成。3pH困难，在发酵中、后期不太会发生染菌，主要是要预防发酵前期染菌。、谷氨酸发酵：周期短，生产菌生殖快，培育基不太丰富，一般较少污染杂菌，但噬菌体污染对谷氨酸发酵的影响较大。二、染菌发生的不同时间对发酵的影响1、种子培育期染菌基地养分格外丰富，比较简洁染菌。一旦觉察种子受到杂菌的污染，应经灭菌后弃去，并对种子罐、管道等进展认真检查和彻底灭菌。2、发酵前期染菌少，相对而言这个时期也简洁染菌。产菌的正常生长、生殖及产物的生成。3、发酵中期染菌代谢，影响产物的生成。pH；有的染菌后会使已生成的产物被利用或破坏。中应尽力做到早觉察、快处理。4、发酵后期染菌柠檬酸的发酵，染菌对产物的影响不大；肌苷酸、谷氨酸等地发酵，后期染菌也会影响产物的产量、提取和产品的质量。发酵特别现象及缘由分析生产蒙受损失。对此应准时查明缘由，加以解决。一、种子培育和发酵的特别现象、种子培育特别〔表现为培育的种子质量不合格〕：菌体生长缓慢；菌丝结团；代谢不正常。pH体浓度过高或过低；菌体生长差。二、染菌的检查和推断发酵过程是否染菌应以无菌试验的结果为依据进展推断。菌的污染。法、平板〔双碟〕培育法、发酵过程的特别观看法〔如溶氧量〕等。此法检查杂菌最简洁、最直接、最常用。必要时还可进展芽胞染色或鞭毛染色。1、显微镜检查法〔镜检法〕用革兰氏染色法〔Gramsstain〕对样品进展涂片、染色，然后在显微镜下、肉汤培育法〔用于检查培育基和无菌空气是否带菌，同时此法也可用于噬菌体的检查〕37℃、27℃进展培育，随时观看微生物的生长状况，并取样进展镜检，推断是否有杂菌。白胨、0.4％酚红溶液，pH7.2。3、平板划线培育或斜面培育检查法37℃、2724h376h，使杂菌快速增殖后再划线培育。4、留意点无菌试验时，假设肉汤连续三次发生变色反响〔红色→黄色〕或产生混浊，或平板培育连续三次觉察有特别菌落的消灭，即可推断为染菌；有时肉汤培育的阳性反响不够明显，而发酵样品的各项参数确有可疑染菌，染菌；一般来讲，无菌试验的肉汤或培育平板应保存并观看至本批〔罐〕放罐后12h，确认为无杂菌后才能弃去；三、发酵染菌缘由分析1、染菌的杂菌种类分析杂菌杂菌缘由球菌、无芽胞杆菌种子带菌、空气过滤效率低、除菌不彻底、设备渗漏、操等 作问题等真菌 却盘管渗漏无菌室灭菌不彻底无菌操作不当、糖液灭菌不彻底〔糖液放置时间较长〕等2、发酵染菌的规模分析局部发酵罐染菌：

缘由种子带菌、连消设备染菌系统构造不合理、空气过滤介质失效等问题

缘由种子带菌、连消系统灭菌不彻底中间补料染菌，如补料液带菌、补料管渗漏〔于设备渗漏造成，应认真检查阀门、罐体或罐器是否清洁等。3、不同污染时间分析、染菌发生在种子培育阶段，或称种子培育期染菌。通常是由种子带菌、培育基或设备灭菌不彻底，以及接种操作不当或设备因素等缘由而引起染菌。B、在发酵过程的初始阶段发生染菌，或称发酵前期染菌。大局部也是由于种子而引起。、发酵后期染菌大局部是由空气过滤不彻底、中间补料染菌、设备渗漏、泡沫顶盖以及操作问题而引起。杂菌污染的预防一、种子带菌及其防治、保藏斜面试管菌种染菌、培育基和器具灭菌不彻底、种子转移和接种过程染菌、种子培育所涉及的设备和装置染菌。2、严格掌握无菌室的污染，依据生产工艺的要求和特点，建立相应的无菌室，交替使用各种灭菌手段对无菌室进展处理；在制备种子时对砂土管、斜面、三角瓶及摇瓶均严格进展治理，防止杂菌的进入而受到污染。为了防止染菌，种子保级种子均未受杂菌污染后才能使用；对菌种培育基或器具进展严格的灭菌处理，的温度达不到预定值，造成灭菌不彻底而使种子染菌。二、空气带菌及其防治选用和装填、过滤介质的灭菌和治理等方面完善空气净化系统。1进口空气的干净度。2、设计合理的空气预处理工艺，尽可能削减生产环境中空气带油、水量，提高空气冷却器漏水，防止冷却水进入空气系统等。3、设计和安装合理的空气过滤器，防止过滤器失效。选用除菌效率高的过滤介剧变和流速的急增。三、操作失误导致染菌及其防治1、通常对于淀粉质培育基地灭菌承受实罐灭菌较好，一般在升温前先通过搅拌料，再转至发酵罐内进展实罐灭菌较为有效。、在灭菌升温时，要翻开排气阀门，使蒸汽能通过并驱除罐内冷空气，一般可避开“假压”造成染菌。3、要严防泡沫升顶，尽可能添加消泡剂防止泡沫的大量产生。4、避开蒸汽压力的波动过大，应严格掌握灭菌温度，过程最好承受自动控温。、发酵过程越来越多的承受自动掌握，一些掌握仪器渐渐被应用。一般常承受化学试剂浸泡等方法来灭菌。四、设备渗漏或“死角”造成的染菌及其防治〔发酵代谢所产生的有机酸等发生腐蚀作用良等缘由形成微小漏孔后发生渗漏染菌。染菌的挽救和处理一、种子培育期染菌的处理、一旦觉察种子受到杂菌污染，该种子不能再接入发酵罐中进展发酵，应经灭菌后弃之，并对种子罐、管道等进展认真检查和彻底灭菌。2、承受备用种子，选择生长生产无染菌的种子接入发酵罐，连续进展发酵生产。3、如无备用种子，则可选择一个适当菌龄的发酵罐内的发酵液作为种子，进展二、发酵前期染菌的处理1将培育基加热至规定温度，重进展灭菌处理后，再接入种子进展发酵；2、假设此时染菌已造成较大的危害，培育基中的碳、氮源的消耗量已比较多，三、发酵中、后期染菌处理1、发酵中、后期染菌或发酵前期稍微染菌而觉察较晚时，可以参加适当地杀菌降低通风量、停顿搅拌、少量补糖等其它措施，进展处理。、假设发酵过程的产物代谢已到达肯定水平，此时产品的含量假设达肯定值，只要明确是染菌也可放罐。12030min能排放。四、染菌后对设备的处理12h上等方法进展处理。噬菌体污染及其防治一、病症：发酵液