绿僵菌的研究现状及进展

绿僵菌的研究现状及进展广西农业科学2009年第40卷第11期?1443?绿僵菌的研究现状及进展果.CurrentsituationanddevelopmentresearchonMetarhiziumspp.(1AgriculturalCollege,GuangxiUnivitute,GuangxiAcademyofAgriculturalSciences,Nanning530007,China:3DepartmentofEntomology,CollegeofResourcesandEnvironment,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou,Guangdong510640,China)Abstract:ThepresentstudysummarizestheresearchesOnclassification,separationandidentificationmethod,bio—logicalcharacteristicsandapplicationsofMetarhiziumspp.,atChinaandabroadduringrecentyears.Recently,themelee—ularsystemicresearch,genicinheritancebreeding,improvingdosageformulationandenlargingcontrolobjectsinMetadliziumspp.madeagreatprogress,butthereisstillalargegapcomparedtothatofinsecticidalmicroorganismsuchasBt.Therefore,thescreeningofhighlytoxicstrainofMetarhiziumndtheinfluenceofhumidi—violetradiations,soilmicroorganism,andsoilphysicalandchemicalcharacteristicsaffectingMetarhiziumspp.shouldbestudiedtoenhancethecontrollingeffectsofMetarhiziumspp.ontargetinsectpests.Keywords:Metarhiziumspp.;classification;separation;identification;biologicalcharacteristics;application自从1879年梅契尼柯夫最先从奥地利金龟上分离到金龟子绿僵菌以来，已有100多年的历史.近20年来，随着巴两和澳大利亚广泛使用金龟子绿僵菌防治甘蔗和牧草害虫取得较大进展.以及在非洲用黄绿绿僵菌(Metarhiziumflavoviride)防治蝗虫实验的初步成功，借助于分子生物学技术和基因工程它的研究领域也在不断深入，1绿僵菌属的系统分类现状自Sorokin于1883年建立绿僵菌属Metarhizium相继发表多个新种，但由于对其特征描述不尽完善基金项目：国家科技支撑计划项目(2007BAD30B03);广西科学研究与技术开发计学院科技发展基金项目2006004(Z)防治研究工作.?1444?广西农业科学2009年第40卷第11期和各自所依据分种标准不一，因此也出现了对本属的鉴别性状和颜色变化幅度等特征的描述不够明确具体的现象.迄今为止，Driver等的研究是最为详尽和完整的，基本解决了绿僵菌属中的分类难题.他们将绿僵菌划分为3个种：金龟子绿僵菌，黄绿绿僵菌和白色绿僵菌，其中黄绿绿僵菌下分5个变种，分别是黄绿绿僵菌新变种1,黄绿绿僵菌新变种2,黄绿绿僵菌新变种3,黄绿绿僵菌小孢变种，黄绿绿僵菌大孢变种；金龟子绿僵菌下分4个变种.分别是金龟子绿僵茵新变种1,金龟子绿僵菌新变种2,金龟子绿僵菌小孢变种，金龟子绿僵菌大孢变种.2绿僵菌的分离与鉴定方法2.1分离方法常规方法多是从体表有明显真菌感染症状的僵虫上分离.1986年ZimmermannE]将研究线虫在土壤中发生率的"大蜡螟诱饵法"(GalleriaBaitMethod)引入昆虫病原真菌生态学研究，检验昆虫病原真菌在土壤中的出现频率.此方法简便易行，可从土壤中诱集白僵菌，绿僵菌和拟青霉(Paecilomycesspp.)等病原真菌.黄运霞等[4]探索了从活虫体分离昆虫效生防菌株DATF一001.2.2鉴定方法菌核糖体ITS(InternalTranscribedSpacer).即转录间度多态性(RestrictionFragmentLengthPolyRFLP),随机扩增多态性DNA(RandomAmplifiPolymorphicDNA,RAPD),SCAR(SequenceChatefizedAmplifiedregions),微卫星序列(SiPCR技术基础上的DNA随机扩增多态性(RAPD)方上述鉴别方法都要经过分离这一繁琐的过程，3绿僵茵的生物学特性环境条件对绿僵菌的生长影响较大，不同菌株形成的温度为25oC:在温度高于40℃和低于7—8℃以98%～100%为最适.孢子的存活受物理和化学因存活的影响是相关的，在4℃时ORH和20℃时97%存14周后(5~C和15℃)萌发率为92.1%;30℃培养的究只证明在4cc,空气相对湿度为0时孢子存活时间义.3.2绿僵菌的毒力段.樊美珍等F21分析了17株绿僵菌的酯酶同功酶4绿僵菌的应用现状个目42个科200多种昆虫，还能寄生螨类及线虫等.日本，安川荣曾试用金龟子绿僵菌防治金龟子获得连续2年防效70%以上.黄基荣等在室内用绿僵和直蜉金龟子的感病率分别为90.2%,50.0%和83.3%.曾传芳等利用从田间蔗根土天牛分离到高可达100%.于凤泉等在水稻移栽后5～7d,田间田间稻水象甲成虫室内饲养1～10d有近50%染病死66.7%～88-3%,按卵密度计算菌剂的防效为59.0%一82.7%,按幼虫量计算的防效为68.4%～79.6%.程辉彩等30]在试验小区内用绿僵菌油剂60mL/667m.设后12d.小区虫口减退率为63.4%蝗绿僵菌生物农药(GreenGuard).并用于大面(BioCaneGranule).目前4个绿僵菌产品(Biotrol作项目组(CABIBioscience)研制的杀蝗绿僵菌生施药10—15d后防效达到90%以上，成为有效的蝗虫?1446?广西农业科学2009年第40卷第11期的绿僵菌产品(Metarhizin).德国登记了防治蛴的绿僵菌产品(Biol020).中国登记了防治蜚蠊的百澳克Bioc和防治蝗虫的蝗敌19产品_31].卫生等害虫防治的绿僵菌商品制剂主要是金龟子绿僵菌，对棉铃虫(Helicoverpaarmigera),桃小食心虫(Carosinanoilellsis),玉米螟(Ostrinialurnacalis),甘蔗杆草螟(Diatraeasaccharalis),甘薯华叶甲(Colasposomameta坩cLIm),斜纹夜蛾(Prodenialitura),刚竹毒蛾(Pantanaphyllostachysae),橄榄星室木虱(Pseudophacopteronanarium),松褐天牛(Monochamusalternatus),白杨透翅蛾(Paranthrenetabaniformis),马尾松毛虫(Endrolimuspunctatus),德国小蠊(Blat.tellagerman/ca)和黑翅土白蚁(0(tontotermesfOr-II]OSaBHS)等害虫均有明显控制效果.国内重庆真菌农药研制工程中心获得的杀蝗绿僵菌孢子母粉和杀蝗生物制剂"蝗敌1号"已在我国北方部分蝗虫发生省区使用和推广[3.在利用绿僵菌防治蔬菜害虫领域，国内外学者也作了相关研究.主要防治对象菜蛾，菜粉蝶和棉铃虫等害虫.在长期的剂型研究与害虫防治过程中，绿僵菌的剂型和应用技术也得到了长足发展.到目前为剂型相配套的应用技术也随之得到发展.对于粉周后的孢子萌发率仍达到60%.5展望BritishMycologicalSociety,1976.66:407—411.ofMetarhiziumbasedonaphylogsequencedata[Jj.MycologicalResearch,2000,104:[3]ZimmermannG.TheGentomopathogenicfungiifromelmbarkandsoilwith[6]LinggAJ,DonaldsonMD.Bioticandabioticfactorsaf-fectingstabilityofBeauvedabassianaconidiainsoillJ』.Jlnve~ebrPathol,1981.38:191—200.CulextarsMis(Diptera:Culicidae)[J]entomopathogenic[J].Inve~ebrPathol,1992,65:186一amonggeographicalpopulationsofBeauvedabassiA,Vlak&D.Peters&Looijen.ProceedingsoftheFourthInternatiloquiumoflnvertebratePathology,1986:205—209.soilfungi[Mj.AcademicPress,1980:415.storageofMetarhiziumanisopliaeconidia:effectoftem—peratureandrelativehumid41:143一150.temperaturesOfftheviabilityofMetarhiziumtlavoconidiastoredinvegetablesandmineraloilslJ.JIn—118JMcClatchieGV,M