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文档简介

实验外周血细胞种类与形态观察实验

一、实验目的：学习掌握血细胞的涂片与瑞氏染色方法

二、实验原理：不同种类的细胞及细胞的不同成分对酸性及碱性染料的亲和力不同，因而瑞氏染色后各种血细胞显示出各自的染色特征。三、试剂器材

1．试剂瑞氏染液Ⅰ液：包含瑞氏染料1.0g、纯甲醇（AR级以上）600.0ml、甘油

15ml。Ⅱ液：磷酸盐缓冲液（pH6.4~6.8）：包含磷酸二氢钾（KH2PO4）0.3g、磷酸氢二钠（Na2HPO4）0.2g、蒸馏水加至1000.0ml。2．器材载玻片、吸耳球、染色架、显微镜。2四、操作步骤1.取血：选择手指肚，先用75%酒精棉球消毒局部皮肤。等待干后，用消毒后的刺血针刺入皮肤，深约2毫米。轻轻挤压，使血液流出形成绿豆大小的血滴。3四、操作步骤（2）制片：取干净玻片一张，加血样一小滴，推成薄涂片，室温自然晾干。（3）染色:待血涂片干透后，将玻片平置于染色架上，滴加染液（I液）3滴~5滴，使其迅速盖满血涂片，约0.5min~1min后，滴加等量或稍多的缓冲液（II液），摇动玻片，使染液充分混合。（4）冲洗:室温染色5min~10min后用滴水冲去染液，待干。（5）结果观察:用低倍镜观察血涂片体、尾交界处血细胞平铺的部分。在正常情况下，血涂片外观为淡紫红色，在镜下红细胞染为粉红色，白细胞胞浆能显示各种细胞的特有色彩，细胞核染紫红色，染色质清楚，粗细松紧可辨。4五、注意事项1．未干透的血膜不能染色。2．加染液应适量，过少则易蒸发沉淀，一旦染料沉积在血涂片上，则不易冲掉，使细胞深染不易检查。3．染色时间的长短与染液浓度、染色时温度及血细胞多少有关。染色时间与染液浓度、染色时温度成反比；染色时间与细胞数量成正比。冲洗前，应先在低倍镜下观察有核细胞是否染色清楚，核质是否分明。4．冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲洗，以防染料沉着在血涂片上。时间不能过久，以防脱色。5．染色过淡，可以复染。5六、思考题

血细胞的种类有哪些？6中性粒细胞是白细胞的一种，在瑞氏（Wright）染色血涂片中，胞质呈无色或极浅的淡红色。正常值：

中性粒细胞0.5～0.7（50％～70％）

7中性杆状核粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞和幼稚细胞图片8中性粒细胞图片

9图D：血像，瑞氏染色，×1000，淋巴细胞浆中含有一个（偶也可见二个）圆形或椭圆形紫红色颗粒，直径2~3um。

10血小板是血液中体积最小的血细胞，正常人血液中计数为100×109／升一300×109／升，占血液体积的0．3％

血小板为圆盘形，直径1～4微米到7一8微米不等，且个体差异很大(5～12立方微米),是有折光的扁圆形小体,正常时呈圆盘状，有时可伸出伪足。

11各种血细胞1.2.3.单核细胞；4.5.6.淋巴细胞；7.8

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