动物细胞工程(知识梳理)

第三节动物细胞工程选修3第二章细胞工程主要内容动物细胞与组织培养

动物细胞融合单克隆抗体制备

4123一、动物细胞与组织培养学习目标：1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用2、对比说出动物细胞培养与植物组织培养原理、条件、结果、培养目的请自主完成导学案课前预习部分一、动物细胞与组织培养1．概念：（1）材料：取自动物

或

动物的器官或组织。（2）场所：在

模拟动物

。（3）目的：使动物细胞或组织继续

、

并维持原有的

和

。一、动物细胞与组织培养2．过程：（1）动物细胞培养：

取动物组织块剪碎，用

处理，形成分散的

，此称细胞悬液，然后接种到

中培养，待细胞分裂形成一层细胞，转移到新培养液中继续培养。（2）动物组织培养：

剪取动物组织块，用

冲洗，将组织块移入

，使组织块

在培养瓶的瓶壁上，称贴壁培养。一、动物细胞与组织培养3．培养的条件：（1）环境条件：包括

、

、

和

等。①温度：哺乳动物多以

℃为宜；②PH值：多数细胞生存的最适pH为

；

③气体：细胞培养所需气体主要有

和

，

是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的

；

④营养成分：有

等。一、动物细胞与组织培养细胞悬液10代细胞50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液（分解细胞间的蛋白）原代培养胰蛋白酶或胶原蛋白酶剪碎过程：细胞株细胞系动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质遗传物质未改变遗传物质已改变一、动物细胞与组织培养补充概念：细胞贴壁：在培养瓶中，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象叫做接触抑制。细胞贴壁过程那么什么是接触抑制？接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。50代以后失去接触抑制接触抑制部分细胞突变，获得不死性，向癌细胞方向发展，糖蛋白减少。一、动物细胞与组织培养植物组织培养和动物细胞培养的比较二、细胞核移植与动物体细胞克隆二、细胞核移植与动物体细胞克隆4．大致过程如下：（动物克隆）二、细胞核移植与动物体细胞克隆卵细胞Ａ母绵羊Ｂ母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植早期胚胎卵裂C母绵羊子宫胚胎移植融合后的卵细胞二、细胞核移植与动物体细胞克隆二、细胞核移植与动物体细胞克隆三、动物细胞融合与单克隆抗体（一）动物细胞融合1．概念：是指

或

结合形成一个细胞的过程。2．诱导动物细胞融合的方法：

物理法：

、

常见的诱导因素有化学法：

、

生物法：

等。3．应用：制造

。三、动物细胞融合与单克隆抗体（二）单克隆抗体1．制备过程：（1）能产生抗体的细胞是：

；

能够无线增殖的细胞：

；（2）利用

融合，检验和筛选杂交细胞。（3）

该杂交细胞，并筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是：。（4）在

或者

中培养杂交细胞，获取单克隆抗体。单克隆抗体的优点：

________、_________、_________。三、动物细胞融合与单克隆抗体2．单克隆抗体的应用：

单克隆抗体具有_______、_______、_______、_______和

优点，主要用于治疗疾病和运载药物，如治疗_______、________等。准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。诊断试剂——最广泛应用“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物单抗导向，药物为弹头治疗疾病和运载药物主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。三、动物细胞融合与单克隆抗体探究》》1、比较植物体细胞杂交和动物细胞融合（完成表格）三、动物细胞融合与单克隆抗体2、制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞？在融合的过程中你可以找出几种类型的细胞？3、制备单克隆抗体的过程有两次筛选，两次筛选的目的是什么？BB

、B瘤、瘤瘤（B、瘤）（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活获得产生相应抗体的B细胞（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞√体外培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。三、动物细胞融合与单克隆抗体两个过程动物细