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文档简介
ICS11.020
C62
DB32
江苏省地方标准
DB32/T3762.11—2020
新型冠状病毒检测技术规范
第11部分:全基因组高通量测序
TechnicalspecificationsforSARS-CoV-2detection
Part11:Wholegenomehigh-throughputsequencing
2020-07-29发布2020-07-30实施
江苏省市场监督管理局发布
DB32/T3762.11—2020
新型冠状病毒检测技术规范第11部分:全基因组高通量测序
1范围
本部分规定了新型冠状病毒全基因组高通量测序的环境与设施、设备与耗材、试剂、样本前处理与
核酸提取、全基因组测序、结果分析。
本部分适用于新型冠状病毒全基因组高通量测序。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB19489实验室生物安全通用要求
新型冠状病毒实验室生物安全指南中华人民共和国国家卫生健康委员会
医疗机构临床基因扩增管理办法原卫生部办公厅
医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则原卫生部检验中心
国家卫生计生委对高通量测序试点实验室的要求原国家卫生计生委
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件
3.1
全基因组测序wholegenomesequencing
对生物体整个基因组序列进行测定,以获得完整的基因组信息。
3.2
高通量测序high-throughputsequencing
能一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定的技术,又称“下一代”测序
("next-generation"sequencing)或深度测序(deepsequencing)技术。
3.3
Reads
高通量测序平台产生的序列称为reads,即测序读到的碱基序列片段,是测序的最小单位。
3.4
测序深度sequencingdepth
测序得到的总碱基数与待测基因组大小的比值。
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3.5
测序覆盖度sequencingcoverage
测序得到的序列占整个基因组的比例。
4环境与设施
4.1实验室资质及级别要求
应符合《新型冠状病毒实验室生物安全指南》的要求,未经培养的感染性材料的操作在采用可靠的
方法灭活前进行核酸提取及临床样本的灭活等操作,应在生物安全二级实验室(BSL-2)进行,同时采
用生物安全三级实验室(BSL-3)的个人防护;感染性材料或活病毒在采用可靠方法灭活后进行的核酸
检测操作应在BSL-2进行。cDNA制备后的相关操作可在生物安全一级实验室(BSL-1)进行。全基因组
测序实验室应符合GB19489、《国家卫生计生委对高通量测序试点实验室的要求》、《医疗机构临床
基因扩增管理办法》、《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》相关要求。
4.2操作人员资质及防护要求
实验操作人员应经过生物安全培训并取得实验活动上岗证,在身体健康状态良好的情况下准入。样
本制备及核酸提取防护参照DB32/T3762.3的第4章进行,测序相关操作采用BSL-1的个人防护。
5设备与耗材
5.1设备
PCR扩增仪、核酸提取仪、核酸定量仪、高通量测序仪。
5.2耗材
微量移液器及各种配套带滤芯Tip头、96孔板磁力架、1.5mLEP管、0.2mL8联排管、96孔PCR板。
6试剂
核酸提取试剂盒、核酸定量试剂盒、第一链cDNA合成试剂盒、随机六聚体引物、经验证可靠的适
合多重反应的PCR扩增试剂盒、DNA纯化磁珠、文库制备试剂盒、高通量测序试剂盒。
7样本前处理与核酸提取
参照DB32/T3762.3的第7章进行。
8模板制备
8.1cDNA制备
以提取的核酸为模板,采用第一链cDNA合成试剂盒和随机六聚体引物,根据试剂盒说明书在PCR
扩增仪上制备第一链cDNA。
2
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8.2混合引物
8.2.1将所有扩增引物(附录A)配置为100µM储存浓度,将49对Pool1的引物各取5µL混匀,得
490µLPool1引物池(引物总浓度为100µM),同样将49对Pool2的引物各取5µL混匀,得490µLPool
2引物池(引物总浓度为100µM)。
8.2.2以去离子水分别将Pool1和Pool2引物池作10倍稀释,使其引物总浓度均为10µM,分装后储
存以防止污染和降解。
8.3多重PCR扩增
8.3.1采用PCR扩增试剂盒,根据试剂盒说明书配置多重PCR扩增体系,反应体系中每一条引物的
终浓度为0.015µM,Pool1和Pool2各配置一套扩增体系,每25µL反应体系中加入2µLcDNA模板。
8.3.2按以下参数进行PCR扩增:98℃30s;98℃15s,65℃5min,扩增30循环;4℃hold。
8.4PCR产物的纯化
8.4.1将每一份样本的Pool1扩增产物和Pool2扩增产物混合于新的8联排PCR管或96孔PCR板中。
8.4.2采用DNA纯化磁珠法对混合后的扩增产物进行纯化,以30µLTEbuffer(10mMtris-HClpH8.0,
0.1mMEDTA)洗脱纯化后的产物。
9DNA文库构建
9.1纯化产物的定量与标化
使用核酸定量试剂盒对纯化产物进行双链DNA定量,根据所使用建库试剂盒说明对其进行标化。
9.2DNA文库制备与混合
根据所使用的建库试剂盒说明书进行文库制备、定量和文库混合。
10上机测序
根据高通量测序试剂盒和高通量测序仪操作说明完成试剂装载,设置测序参数进行测序。
11结果分析
可采用不同的生物信息学软件进行测序结果的分析:首先去除测序数据中的PCR引物序列(按照最
大引物长度30bp进行Trim)和低质量的Reads,然后以SARS-CoV-2参考基因组(GeneBank号:
MN908947.3)为模板进行序列mapping,mapping之后对测序覆盖度和测序深度进行分析,最终生成一
致性(consensus)序列,即为待测样本的全基因组序列。
3
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AA
附录A
(规范性附录)
多重PCR扩增引物序列
序号引物名称所属引物池引物序列(5′-3′)长度
1nCoV-2019_1_LEFTPool1ACCAACCAACTTTCGATCTCTTGT24
2nCoV-2019_1_RIGHTPool1AAGTGCCATCTTTAAGATGTTGACG25
3nCoV-2019_2_LEFTPool2CTGTTTTACAGGTTCGCGACGT22
4nCoV-2019_2_RIGHTPool2TAAGGATCAGTGCCAAGCTCGT22
5nCoV-2019_3_LEFTPool1CGGTAATAAAGGAGCTGGTGGC22
6nCoV-2019_3_RIGHTPool1AAGGTGTCTGCAATTCATAGCTCT24
7nCoV-2019_4_LEFTPool2GGTGTATACTGCTGCCGTGAAC22
8nCoV-2019_4_RIGHTPool2CACAAGTAGTGGCACCTTCTTTAGT25
9nCoV-2019_5_LEFTPool1TGGTGAAACTTCATGGCAGACG22
10nCoV-2019_5_RIGHTPool1ATTGATGTTGACTTTCTCTTTTTGGAGT28
11nCoV-2019_6_LEFTPool2GGTGTTGTTGGAGAAGGTTCCG22
12nCoV-2019_6_RIGHTPool2TAGCGGCCTTCTGTAAAACACG22
13nCoV-2019_7_LEFTPool1ATCAGAGGCTGCTCGTGTTGTA22
14nCoV-2019_7_RIGHTPool1TGCACAGGTGACAATTTGTCCA22
15nCoV-2019_8_LEFTPool2AGAGTTTCTTAGAGACGGTTGGGA24
16nCoV-2019_8_RIGHTPool2GCTTCAACAGCTTCACTAGTAGGT24
17nCoV-2019_9_LEFTPool1TCCCACAGAAGTGTTAACAGAGGA24
18nCoV-2019_9_RIGHTPool1TTTATGACAGCATCTGCCACAA22
19nCoV-2019_10_LEFTPool2TGAGAAGTGCTCTGCCTATACAGT24
20nCoV-2019_10_RIGHTPool2TCATCTAACCAATCTTCTTCTTGCTCT27
21nCoV-2019_11_LEFTPool1GGAATTTGGTGCCACTTCTGCT22
22nCoV-2019_11_RIGHTPool1TCATCAGATTCAACTTGCATGGCA24
23nCoV-2019_12_LEFTPool2AAACATGGAGGAGGTGTTGCAG22
24nCoV-2019_12_RIGHTPool2TTCACTCTTCATTTCCAAAAAGCTTGA27
25nCoV-2019_13_LEFTPool1TCGCACAAATGTCTACTTAGCTGT24
26nCoV-2019_13_RIGHTPool1ATAACCACAGCAGTTAAAACAC22
27nCoV-2019_14_LEFTPool2CATCCAGATTCTGCCACTCTTGT23
28nCoV-2019_14_RIGHTPool2AGTTTCCACACAGACAGGCATT22
29nCoV-2019_15_LEFTPool1ACAGTGCTTAAAAAGTGTAAAAGTGCC27
30nCoV-2019_15_RIGHTPool1AGAAACAGAAACTGTAGCTGGC22
31nCoV-2019_16_LEFTPool2AATTTGGAAGAAGCTGCTCGGT22
32nCoV-2019_16_RIGHTPool2CACAACTTGCGTGTGGAGGTTA22
33nCoV-2019_17_LEFTPool1CTTCTTTCTTTGAGAGAAGTGAGGACT27
34nCoV-2019_17_RIGHTPool1TTTGTTGGAGTGTTAACAATGCAGT25
35nCoV-2019_18_LEFTPool2TGGAAATACCCACAAGTTAATGGTTTAAC29
4
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序号引物名称所属引物池引物序列(5′-3′)长度
36nCoV-2019_18_RIGHTPool2AGCTTGTTTACCACACGTACAAGG24
37nCoV-2019_19_LEFTPool1GCTGTTATGTACATGGGCACACT23
38nCoV-2019_19_RIGHTPool1TGTCCAACTTAGGGTCAATTTCTGT25
39nCoV-2019_20_LEFTPool2ACAAAGAAAACAGTTACACAACAACCA27
40nCoV-2019_20_RIGHTPool2ACGTGGCTTTATTAGTTGCATTGTT25
41nCoV-2019_21_LEFTPool1TGGTGGCTATTGATTATAAACACTACACA29
42nCoV-2019_21_RIGHTPool1TAGATCTGTGTGGCCAACCTCT22
43nCoV-2019_22_LEFTPool2ACTACCGAAGTTGTAGGAGACATTATACT29
44nCoV-2019_22_RIGHTPool2ACAGTATTCTTTGCTATAGTAGTCGGC27
45nCoV-2019_23_LEFTPool1ACAACTACTAACATAGTTACACGGTGT27
46nCoV-2019_23_RIGHTPool1ACCAGTACAGTAGGTTGCAATAGTG25
47nCoV-2019_24_LEFTPool2AGGCATGCCTTCTTACTGTACTG23
48nCoV-2019_24_RIGHTPool2ACATTCTAACCATAGCTGAAATCGGG26
49nCoV-2019_25_LEFTPool1GCAATTGTTTTTCAGCTATTTTGCAGT27
50nCoV-2019_25_RIGHTPool1ACTGTAGTGACAAGTCTCTCGCA23
51nCoV-2019_26_LEFTPool2TTGTGATACATTCTGTGCTGGTAGT25
52nCoV-2019_26_RIGHTPool2TCCGCACTATCACCAACATCAG22
53nCoV-2019_27_LEFTPool1ACTACAGTCAGCTTATGTGTCAACC25
54nCoV-2019_27_RIGHTPool1AATACAAGCACCAAGGTCACGG22
55nCoV-2019_28_LEFTPool2ACATAGAAGTTACTGGCGATAGTTGT26
56nCoV-2019_28_RIGHTPool2TGTTTAGACATGACATGAACAGGTGT26
57nCoV-2019_29_LEFTPool1ACTTGTGTTCCTTTTTGTTGCTGC24
58nCoV-2019_29_RIGHTPool1AGTGTACTCTATAAGTTTTGATGGTGTGT29
59nCoV-2019_30_LEFTPool2GCACAACTAATGGTGACTTTTTGCA25
60nCoV-2019_30_RIGHTPool2ACCACTAGTAGATACACAAACACCAG26
61nCoV-2019_31_LEFTPool1TTCTGAGTACTGTAGGCACGGC22
62nCoV-2019_31_RIGHTPool1ACAGAATAAACACCAGGTAAGAATGAGT28
63nCoV-2019_32_LEFTPool2TGGTGAATACAGTCATGTAGTTGCC25
64nCoV-2019_32_RIGHTPool2GGTAATAGCACATCACTACGCAAC24
65nCoV-2019_33_LEFTPool1ACTTTTGAAGAAGCTGCGCTGT22
66nCoV-2019_33_RIGHTPool1TGGACAGTAAACTACGTCATCAAGC25
67nCoV-2019_34_LEFTPool2TCCCATCTGGTAAAGTTGAGGGT23
68nCoV-2019_34_RIGHTPool2AGTGAAATTGGGCCTCATAGCA22
69nCoV-2019_35_LEFTPool1TGTTCGCATTCAACCAGGACAG22
70nCoV-2019_35_RIGHTPool1ACTTCATAGCCACAAGGTTAAAGTCA26
71nCoV-2019_36_LEFTPool2ATTACAGTTAATGTTTTAGCTTGGTTGTA22
72nCoV-2019_36_RIGHTPool2GAACAAAGACCATTGAGTACTCTGGA26
73nCoV-2019_37_LEFTPool1ACACACCACTGGTTGTTACTCAC23
74nCoV-2019_37_RIGHTPool1GTCCACACTCTCCTAGCACCAT22
75nCoV-2019_38_LEFTPool2ACTGTGTTATGTATGCATCAGCTGT25
76nCoV-2019_38_RIGHTPool2ATCATAAACACCAAGAGTCAGTCTAAA25
5
DB32/T3762.11—2020
序号引物名称所属引物池引物序列(5′-3′)长度
77nCoV-2019_39_LEFTPool1AGTATTGCCCTATTTTCTTCATAACTGGT29
78nCoV-2019_39_RIGHTPool1TGTAACTGGACACATTGAGCCC22
79nCoV-2019_40_LEFTPool2TGCACATCAGTAGTCTTACTCTCAGT26
80nCoV-2019_40_RIGHTPool2CATGGCTGCATCACGGTCAAAT22
81nCoV-2019_41_LEFTPool1GTTCCCTTCCATCATATGCAGCT23
82nCoV-2019_41_RIGHTPool1TGGTATGACAACCATTAGTTTGGCT25
83nCoV-2019_42_LEFTPool2TGCAAGAGATGGTTGTGTTCCC22
84nCoV-2019_42_RIGHTPool2CCTACCTCCCTTTGTTGTGTTGT23
85nCoV-2019_43_LEFTPool1TACGACAGATGTCTTGTGCTGC22
86nCoV-2019_43_RIGHTPool1AGCAGCATCTACAGCAAAAGCA22
87nCoV-2019_44_LEFTPool2TGCCACAGTACGTCTACAAGCT22
88nCoV-2019_44_RIGHTPool2AACCTTTCCACATACCGCAGAC22
89nCoV-2019_45_LEFTPool1TACCTACAACTTGTGCTAATGACCC25
90nCoV-2019_45_RIGHTPool1AAATTGTTTCTTCATGTTGGTAGTTAGAGA30
91nCoV-2019_46_LEFTPool2TGTCGCTTCCAAGAAAAGGACG22
92nCoV-2019_46_RIGHTPool2CACGTTCACCTAAGTTGGCGTA22
93nCoV-2019_47_LEFTPool1AGGACTGGTATGATTTTGTAGAAAACCC28
94nCoV-2019_47_RIGHTPool1AATAACGGTCAAAGAGTTTTAACCTCTC28
95nCoV-2019_48_LEFTPool2TGTTGACACTGACTTAACAAAGCCT25
96nCoV-2019_48_RIGHTPool2TAGATTACCAGAAGCAGCGTGC22
97nCoV-2019_49_LEFTPool1AGGAATTACTTGTGTATGCTGCTGA25
98nCoV-2019_49_RIGHTPool1TGACGATGACTTGGTTAGCATTAATACA28
99nCoV-2019_50_LEFTPool2GTTGATAAGTACTTTGATTGTTACGATGGT30
100nCoV-2019_50_RIGHTPool2TAACATGTTGTGCCAACCACCA22
101nCoV-2019_51_LEFTPool1TCAATAGCCGCCACTAGAGGAG22
102nCoV-2019_51_RIGHTPool1AGTGCATTAACATTGGCCGTGA22
103nCoV-2019_52_LEFTPool2CATCAGGAGATGCCACAACTGC22
104nCoV-2019_52_RIGHTPool2GTTGAGAGCAAAATTCATGAGGTCC25
105nCoV-2019_53_LEFTPool1AGCAAAATGTTGGACTGAGACTGA24
106nCoV-2019_53_RIGHTPool1AGCCTCATAAAACTCAGGTTCCC23
107nCoV-2019_54_LEFTPool2TGAGTTAACAGGACACATGTTAGACA26
108nCoV-2019_54_RIGHTPool2AACCAAAAACTTGTCCATTAGCACA25
109nCoV-2019_55_LEFTPool1ACTCAACTTTACTTAGGAGGTATGAGCT28
110nCoV-2019_55_RIGHTPool1GGTGTACTCTCCTATTTGTACTTTACTGT29
111nCoV-2019_56_LEFTPool2ACCTAGACCACCACTTAACCGA22
112nCoV-2019_56_RIGHTPool2ACACTATGCGAGCAGAAGGGTA22
113nCoV-2019_57_LEFTPool1ATTCTACACTCCAGGGACCACC22
114nCoV-2019_57_RIGHTPool1GTAATTGAGCAGGGTCGCCAAT22
115nCoV-2019_58_LEFTPool2TGATTTGAGTGTTGTCAATGCCAGA25
116nCoV-2019_58_RIGHTPool2CTTTTCTCCAAGCAGGGTTACGT23
117nCoV-2019_59_LEFTPool1TCACGCATGATGTTTCATCTGCA23
6
DB32/T3762.11—2020
序号引物名称所属引物池引物序列(5′-3′)长度
118nCoV-2019_59_RIGHTPool1AAGAGTCCTGTTACATTTTCAGCTTG26
119nCoV-2019_60_LEFTPool2TGATAGAGACCTTTATGACAAGTTGCA27
120nCoV-2019_60_RIGHTPool2GGTACCAACAGCTTCTCTAGTAGC24
121nCoV-2019_61_LEFTPool1TGTTTATCACCCGCGAAGAAGC22
122nCoV-2019_61_RIGHTPool1ATCACATAGACAACAGGTGCGC22
123nCoV-2019_62_LEFTPool2GGCACATGGCTTTGAGTTGACA22
124nCoV-2019_62_RIGHTPool2GTTGAACCTTTCTACAAGCCGC22
125nCoV-2019_63_LEFTPool1TGTTAAGCGTGTTGACTGGACT22
126nCoV-2019_63_RIGHTPool1ACAAACTGCCACCATCACAACC22
127nCoV-2019_64_LEFTPool2TCGATAGATATCCTGCTAATTCCATTGT28
128nCoV-2019_64_RIGHTPool2AGTCTTGTAAAAGTGTTCCAGAGGT25
129nCoV-2019_65_LEFTPool1GCTGGCTTTAGCTTGTGGGTTT22
130nCoV-2019_65_RIGHTPool1TGTCAGTCATAGAACAAACACCAATAGT28
131nCoV-2019_66_LEFTPool2GGGTGTGGACATTGCTGCT22
132nCoV-2019_66_RIGHTPool2TCAATTTCCATTTGACTCCTGGGT24
133nCoV-2019_67_LEFTPool1GTTGTCCAACAATTACCTGAAACTTACT28
134nCoV-2019_67_RIGHTPool1CAACCTTAGAAACTACAGATAAATCTTGGG30
135nCoV-2019_68_LEFTPool2ACAGGTTCATCTAAGTGTGTGTGT24
136nCoV-2019_68_RIGHTPool2CTCCTTTATCAGAACCAGCACCA23
137nCoV-2019_69_LEFTPool1TGTCGCAAAATATACTCAACTGTGTCA27
138nCoV-2019_69_RIGHTPool1TCTTTATAGCCACGGAACCTCCA23
139nCoV-2019_70_LEFTPool2ACAAAAGAAAATGACTCTAAAGAGGGTTT29
140nCoV-2019_70_RIGHTPool2TGACCTTCTTTTAAAGACATAACAGCAG28
141nCoV-2019_71_LEFTPool1ACAAATCCAATTCAGTTGTCTTCCTATTC29
142nCoV-2019_71_RIGHTPool1TGGAAAAGAAAGGTAAGAACAAGTCCT27
143nCoV-2019_72_LEFTPool2ACACGTGGTGTTTATTACCCTGAC24
144nCoV-2019_72_RIGHTPool2ACTCTGAACTCACTTTCCATCCAAC25
145nCoV-2019_73_LEFTPool1CAATTTTGTAATGATCCATTTTTGGGTGT29
146nCoV-2019_73_RIGHTPool1CACCAGCTGTCCAACCTGAAGA22
147nCoV-2019_74_LEFTPool2ACATCACTAGGTTTCAAACTTTACTTGC28
148nCoV-2019_74_RIGHTPool2GCAACACAGTTGCTGATTCTCTTC24
149nCoV-2019_75_LEFTPool1AGAGTCCAACCAACAGAATCTATTGT26
150nCoV-2019_75_RIGHTPool1ACCACCAACCTTAGAATCAAGATTGT26
151nCoV-2019_76_LEFTPool2AGGGCAAACTGGAAAGATTGCT22
152nCoV-2019_76_RIGHTPool2TCTCTGCCAAATTGTTGGAAAGGCA22
153nCoV-2019_77_LEFTPool1CCAGCAACTGTTTGTGGACCTA22
154nCoV-2019_77_RIGHTPool1CAGCCCCTATTAAACAGCCTGC22
155nCoV-2019_78_LEFTPool2CAACTTACTCCTACTTGGCGTGT23
156nCoV-2019_78_RIGHTPool2TGTGTACAAAAACTGCCATATTGCA25
157nCoV-2019_79_LEFTPool1GTGGTGATTCAACTGAATGCAGC23
158nCoV-2019_79_RIGHTPool1CATTTCATCTGTGAGCAAAGGTGG24
7
DB32/T3762.11—2020
序号引物名称所属引物池引物序列(5′-3′)长度
159nCoV-2019_80_LEFTPool2TTGCCTTGGTGATATTGCTGCT22
160nCoV-2019_80_RIGHTPool2TGGAGCTAAGTTGTTTAACAAGCG24
161nCoV-2019_81_LEFTPool1GCACTTGGAAAACTTCAAGATGTGG25
162nCoV-2019_81_RIGHTPool1GTGAAGTTCTTTTCTTGTGCAGGG24
163nCoV-2019_82_LEFTPool2GGGCTATCATCTTATGTCCTTCCCT25
164nCoV-2019_82_RIGHTPool2TGCCAGAGATGTCACCTAAATCAA24
165nCoV-2019_83_LEFTPool1TCCTTTGCAACCTGAATTAGACTCA25
166nCoV-2019_83_RIGHTPool1TTTGACTCCTTTGAGCACTGGC22
167nCoV-2019_84_LEFTPool2TGCTGTAGTTGTCTCAAGGGCT22
168nCoV-2019_84_RIGHTPool2AGGTGTGAGTAAACTGTTACAAACAAC27
169nCoV-2019_85_LEFTPool1ACTAGCACTCTCCAAGGGTGTT22
170nCoV-2019_85_RIGHTPool1ACACAGTCTTTTACTCCAGATTCCC25
171nCoV-2019_86_LEFTPool2TCAGGTGATGGCACAACAAGTC22
172nCoV-2019_86_RIGHTPool2ACGAAAGCAAGAAAAAGAAGTACGC25
173nCoV-2019_87_LEFTPool1CGACTACTAGCGTGCCTTTGTA22
174nCoV-2019_87_RIGHTPool1ACTAGGTTCCATTGTTCAAGGAGC24
175nCoV-2019_88_LEFTPool2CCATGGCAGATTCCAACGGTAC22
176nCoV-2019_88_RIGHTPool2TGGTCAGAATAGTGCCATGGAGT23
177nCoV-2019_89_LEFTPool1CGCGTACGCGTTCCATGTGGTC22
178nCoV-2019_89_RIGHTPool1ATAGTAACCTGAAAGTCAACGAGAT25
179nCoV-2019_90_LEFTPool2ACACAGACCATTCCAGTAGCAGT23
180nCoV-2019_90_RIGHTPool2TGAAATGGTGAATTGCCCTCGT22
181nCoV-2019_91_LEFTPool1TCACTACCAAGAGTGTGTTAGAGGT25
182nCoV-2019_91_RIGHTPool1TTCAAGTGAGAACCAAAAGATAATAAGCA29
183nCoV-2019_92_LEFTPool2TTTGTGCTTTTTAGCCTTTCTGCT24
184nCoV-2019_92_RIGHTPool2AGGTTCCTGGCAATTAATTGTAAAAGG27
185nCoV-2019_93_LEFTPool1TGAGGCTGGTTCTAAATCACCCA23
186nCoV-2019_93_RIGHTPool1AGGTCTTCCTTGCCATGTTGAG22
187nCoV-2019_94_LEFTPool2GGCCCCAAGGTTTACCCAATAA22
188nCoV-2019_94_RIGHTPool2TTTGGCAATGTTGTTCCTTGAGG23
189nCoV-2019_95_LEFTPool1TGAGGGAGCCTTGAATACACCA22
190nCoV-2019_95_RIGHTPool1CAGTACGTTTTTGCCGAGGCTT22
191nCoV-2019_96_LEFTPool2GCCAACAACAACAAGGCCAAAC22
192nCoV-2019_96_RIGHTPool2TAGGCTCTGTTGGTGGGAATGT22
193nCoV-2019_97_LEFTPool1TGGATGACAAAGATCCAAATTTCAAAGA28
194nCoV-2019_97_RIGHTPool1ACACACTGATTAAAGATTGCTATGTGAG28
195nCoV-2019_98_LEFTPool2AACAATTGCAACAATCCATGAGCA24
196nCoV-2019_98_RIGHTPool2TTCTCCTAAGAAGCTATTAAAATCACATGG30
_________________________________
8
DB32/T3762.11—2020
前 言
DB32/T3762《新型冠状病毒检测技术规范》目前分为以下部分:
——第1部分:生物样本采集、运输和保存;
——第2部分:病毒分离与鉴定;
——第3部分:核酸荧光PCR检测程序;
——第4部分
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