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DNA的粗提取与鉴定生物学选择性必修3《生物技术与工程》新课导入思考:如何将DNA提取出来,并进行鉴定呢?DNADNA知识海洋提取生物大分子的基本思路选用适当物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。基本思路提取DNA的方法知识海洋选用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大。取材时注意安全问题,保护环境,不要选择珍稀濒危的生物。新鲜洋葱(也可选用香蕉、菠菜、菜花和猪肝等,提取DNA的方法可能稍有不同)。实验材料研磨液、体积分数为95%的酒精、2mol/L的NaCl溶液、二苯胺试剂和蒸馏水等。DNA粗提取与鉴定探究·实践知识海洋实验用具烧杯、量筒、玻璃棒、研钵、纱布、漏斗、试管、试管架、试管夹、酒精灯、石棉网、三脚架、火柴、刀片和天平等。DNA粗提取与鉴定探究·实践知识海洋DNA粗提取与鉴定探究·实践方法步骤1.研磨洋葱2.过滤获取含DNA的上清液3.冷却酒精析出DNA4.DNA的鉴定知识海洋方法步骤称取约30g洋葱切碎,放入研钵中,倒入10mL研磨液,充分研磨。1.研磨洋葱DNA粗提取与鉴定探究·实践在漏斗中垫上纱布,将洋葱研磨液过滤到烧杯中,在4℃冰箱中放置几分钟后,再取上清液。也可直接将研磨液倒入塑料离心管中,1500r/min的转速下离心5min,再取上清液放入烧杯中。2.过滤获取含DNA的上清液研磨洋葱知识海洋方法步骤或将溶液倒入塑料离心管中,在10000r/min的转速下离心5min,弃上清液,将管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干。3.冷却酒精析出DNADNA粗提取与鉴定探究·实践在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为95%),静置2~3min,溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸去上面的水分;知识海洋方法步骤向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min。待试管冷却后,比较两支试管中溶液颜色的变化。4.DNA的鉴定DNA粗提取与鉴定探究·实践取两支20mL的试管,各加入2mol/L的NaCl溶液5mL。将丝状物或沉淀物溶于其中一支试管的NaCI溶液中。知识海洋方法步骤4.DNA的鉴定1号试管2号试管加入2mol/LNaCl溶液5mL5mL丝状物(DNA)不加加入用玻璃棒搅拌无丝状物溶解加入二苯胺试剂4mL4mL沸水浴5min5min观察现象不变蓝变蓝DNA粗提取与鉴定探究·实践鉴定结果知识海洋DNA粗提取与鉴定操作提示①获取材料时,选取DNA含量多的,不同实验材料提取DNA的方法可能稍有不同。②粗提取DNA时,用玻璃棒搅拌含有悬浮物的溶液时,不要直插烧杯底部,搅拌要轻缓、并沿一个方向,以便获得较完整的DNA分子。③二苯胺试剂现配现用,否则会影响鉴定结果。④查阅资料了解实验室提取纯度高的DNA的方法。探究·实践应用探究下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述,错误的是()A.DNA析出过程中,搅拌操作要轻柔以防DNA断裂B.预冷的乙醇溶液可用来粗提取DNAC.用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热D.鉴定DNA时,应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴D应用探究如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。(1)图中实验材料A可以是_________________________等,研磨前加入的B应该是_________________。(2)通过上述所示步骤得到滤液C后,在4℃冰箱中放置几分钟后,再取________,向其中加入等体积、预冷的酒精溶液,析出的白色丝状物为______________。洋葱(花菜、香蕉、猪肝)配置好的研磨液上清液粗提取的DNA应用探究G1B液中搅拌研磨后过滤滤液

E22mol/L的NaCl溶液搅拌后过滤滤液

F3冷却的95%的酒精溶液中搅拌后过滤滤液

G(3)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2mL的3种溶液中,经搅拌后过滤,获得如表所示的3种滤液,含DNA最少的是滤液_____。课堂总结DNA粗提取与

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