动物克隆与转基因克隆技术课件

动物克隆与转基因克隆技术动物克隆与转基因克隆技术基本概念克隆：克隆是英文“clone”或“cloning”的音译，而英文“clone”则起源于希腊文“Klone”，原意是指幼苗或嫩枝，以无性繁殖或营养繁殖的方式培育植物，如扦插和嫁接。在大陆译为“无性繁殖”在台湾与港澳一般意译为复制或转殖或群殖。个体克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组织后代的过程。细胞克隆：干细胞分子克隆：PCR质粒扩增

动物克隆与转基因克隆技术动物克隆与转基因克隆技术动物克隆的一般技术流程动物克隆与转基因克隆技术转基因克隆动物的基本流程细胞筛选基因整合MSTN基因基因转移同源重组核供体猪体细胞细胞培养卵供体猪未受精卵除去卵核细胞融合克隆胚胎胚胎移植无核卵子代孕母亲基因组经过同源重组修饰的转基因克隆猪同源重组细胞扩增动物克隆与转基因克隆技术克隆发展的简单历史1938年德国汉斯·施佩曼提出采用细胞核移植技术克隆动物的设想；

1952年起，科学家们首先采用青蛙开展细胞核移植克隆实验，先后获得了蝌蚪和成体蛙；1963年，中国童第周教授获得胚胎细胞核移植鱼；1964年，格登（J.Gurdon)获得体细胞核移植非洲爪蟾；1981年，卡尔·伊尔门泽和彼得·霍佩用鼠胚胎细胞培育出发育正常的小鼠。1984年，施特恩·维拉德森获得胚胎细胞克隆羊；1989年，维拉德森获得连续移核二代的克隆牛；1997年2月，英国罗斯林研究所wilmut博士科研组公布体细胞克隆羊“多利”培育成功；1998年7月，美国夏威夷大学Wakayama等报道，由小鼠卵丘细胞克隆了27只成活小鼠，其中7只是由克隆小鼠再次克隆的后代，这是继“多利”以后的第二批哺乳动物体细胞核移植后代。“檀香山技术”；2001年，克隆欧洲盘羊，但盘羊克隆成功后仅活了7个月。

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动物克隆与转基因克隆技术在NT牛胚胎1、2、4细胞检测到的hnRNA明显高于IVF胚胎，NT胚胎的基因转录在1细胞阶段发生，此亦反应出供体细胞的基因表达并没有完全被终止。在正常的受精卵发育中，牛、猪、小鼠、大鼠和人类受精后父源DNA发生快速的主动去甲基化，同时母源DNA随着复制发生被动去甲基化(Xuetal.2005)。动物克隆与转基因克隆技术牛的父源染色体去甲基化后，很快开始从头甲基化（denovo），在2细胞期前甲基化水平恢复至和母源DNA相同的甲基化水平(Park,Jeongetal.2007)。牛在8-16细胞期，在DNMT3A和DNMT3B酶的作用下，染色体重新从头甲基化，胚胎建立起新的甲基化模式(Deanetal.2001)。随后胚胎染色体的甲基化模式由DNMT1维持，它决定着早期胚胎基因表达的程序性启动。动物克隆与转基因克隆技术Dnmt161790bpDNA40个外显子mRNAjoin(1..316,13059..13095,14251..14358,14567..14786,17769..17844,19518..19596,21231..21265,21962..22046,26772..26806,28451..28538,31776..31810,32388..32469,34718..34752,35073..35118,35214..35294,35369..35478,38627..38745,39191..39283,40080..40231,40363..40550,40657..40843,43289..43386,43591..43738,45168..45283,45479..45683,46119..46252,48612..48785,51149..51370,52916..53108,53947..54031,54227..54355,54808..55090,55319..55460,56531..56697,57127..57304,57856..58051,58849..59015,59284..59400,60829..60919,61435..61790)

动物克隆与转基因克隆技术鼠基因组中与甲基化直接相关的基因15动物克隆与转基因克隆技术推测