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文档简介
紫外-可见分光光度法
三氯苯酚存在时苯酚含量的测定
5/9/20241紫外分光光度法测定水样中的苯酚一、实验目的学习紫外吸收光谱法的基本原理;了解紫外分光光度计的基本结构及其操作方法;掌握等吸光度法消除干扰的原理和方法。5/9/20242紫外分光光度法测定水样中的苯酚Lamber-Beer定律:吸收光谱法基本定律
图1物质对光的吸收
描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系假设一束平行单色光通过一个吸光物体二、基本原理5/9/20243紫外分光光度法测定水样中的苯酚三、仪器结构图2756CRT紫外分光光度计
5/9/20244紫外分光光度法测定水样中的苯酚钨灯或卤钨灯——可见光源350~1000nm氢灯或氘灯——紫外光源200~360nm1.光源:2.单色器:包括狭缝、准直镜、色散元件
棱镜——对不同波长的光折射率不同色散元件分出光波长不等距光栅——衍射和干涉分出光波长等距5/9/20245紫外分光光度法测定水样中的苯酚3.吸收池:
玻璃——能吸收UV光,仅适用于可见光区
石英——不能吸收紫外光,适用于紫外和可见光区要求:匹配性(对光的吸收和反射应一致)光电池光电管光电倍增管二极管阵列检测器4.检测器:将光信号转变为电信号的装置5.记录装置:讯号处理和显示系统5/9/20246紫外分光光度法测定水样中的苯酚光源单色器样品池检测器记录装置图3分光光度计构造方框图5/9/20247紫外分光光度法测定水样中的苯酚图4单光束分光光度计基本结构示意图特点:使用时来回拉动吸收池
→移动误差对光源要求高比色池配对5/9/20248紫外分光光度法测定水样中的苯酚特点:不用拉动吸收池,可以减小移动误差对光源要求不高可以自动扫描吸收光谱
图5双光束分光光度计结构示意图5/9/20249紫外分光光度法测定水样中的苯酚特点:利用吸光度差值定量消除干扰和吸收池不匹配引起的误差图6双波长分光光度计结构示意图5/9/202410紫外分光光度法测定水样中的苯酚四、定量分析方法
多组分的定量方法三种情况:1.两组分吸收光谱不重叠(互不干扰)
两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量5/9/202411紫外分光光度法测定水样中的苯酚2.两组分吸收光谱部分重叠
λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测Caλ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测Cb
5/9/202412紫外分光光度法测定水样中的苯酚3.两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定(1)解线性方程组法(2)等吸收双波长消去法5/9/202413紫外分光光度法测定水样中的苯酚(1)解线性方程组法步骤:5/9/202414紫外分光光度法测定水样中的苯酚(2)等吸收双波长法步骤:
消除a的影响测b5/9/202415紫外分光光度法测定水样中的苯酚消去b的影响测a注:须满足两个基本条件选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大5
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