输血医学实验室认证经验台湾

台湾输血质量管控及输血医学实验室认证经验分享张志升台湾台大医院输血移植组组长技术组长台湾输血学会理事暨教育训练委员会召集人台湾组织兼容免疫基因学会理事台湾检验学会能力试验委员会委员1输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024讲在前头周一开始上班前的节奏两岸的法规制度不同，惯用的实验方法不同，种族性血型分布不同，均有些微作法的异同处。两岸制度及规范不同，环境及条件也有差异，不能混为一谈。大陆法规较为完善，台湾技术层面较为扎实。2输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024亚型输红细胞A2产生anti-A1的问题没有产生抗A1,输A1红细胞产生抗A1,输预温法或抗人球A红细胞交叉配血主侧相合台湾常见分生型A205,也有案例A205型输一般A1型产生IgGanti-A1Ax输O型红细胞，Ａ型血浆Am(Bm)Ael(Bel)输O型红细胞,血浆类孟买A(或B)型输A(或B)型红细胞,血浆3输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024Rh阴性输血小板(科学合理输血)文献证实Rh阴性输Rh阳性血小板产生抗D无HTR溶血性输血反应。TRANSFUSIONVolume51,June2011.Rh阴性病患输Rh阳性的机采血小板。除了未产生抗Ｄ孕龄期妇女非紧急下可选择输注Rh阳性机采血小板。已产生抗D的病患输D阳性的血小板.(包括已产生anti-D孕龄期妇女)4输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024Rh阴性输红细胞(以风险控管及经济管理)孕龄期妇女(外国定义:五十岁左右)未产生抗D非紧急输血下输Rh阴性红细胞。Rh阴性未产生抗D预期非长期输血状况下，无法立即取得Rh阴性血输Rh阳性血。Rh阴性未产生抗D,择期手术或紧急手术预期使用输血量无法备足相关Rh阴性血液量，先输Rh阳性红细胞,把Rh阴性血保留到己产生抗Ｄ下救命用。Rh阴性产生抗D紧急下无D阴性血输D阳性血。5输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024ISO15189医学实验室认证台湾是由台湾认证基金会TAFTaiwanaccreditationfoundation所办理用国际标准规范质量管理。取单一项目申请认证范围(e.g.ABO定型，Rh定型，抗体筛检，抗体鉴定，直抗）重视单一项目的标准化及实验作业的偏移误差。6输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024CAP美国病理学院认证CAP是专由临床检验学家和病理学家组成的联合会，被公认为是医学实验室质量保证的领导者之一。CAP的一个重要内容就是向世界各地的参与实验室开展能力验证活动（ProficiencyTesting,PT也称为室间质评）。通过室间质评和实验室实地评审进行CAP认证。CAP认证依据是CAP自己制定的标准，即评审检查要点（CHECKLIST）,它主要参照了CLIA-88的标准和美国的法律法规。7输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024认证质控的要求试剂/仪器的质控确效室间质量评价.实验环境评估试剂的审批确效,导入,储存运送确效.仪器的保养使用确效人员能力的确认新进人员教育训练继续教育训练8输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024试剂的质控9输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024免疫血液的内部实验品管试剂品管每日质控dailyQC

/开新瓶批号修改质控LotchangeQC/reagentallowableNewsystem/newmethod/newclone/newreagents:平行测试仪器品管离心机品管培温器Incubator/加温器Thermometer/冰箱滴管Pipette/吸管Dropper10输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024每日质控DailyQC监测试剂因储存运送的稳定性抗血清-A,-B,-D,Ac,Bc,使用可回溯性的阴性及阳性质控液，强度在2+左右抗筛细胞每一抗筛细胞至少一个抗原(可相同)需受到监控。原则上每个质控项目只监控单一项目抗A和A血细胞不能同为监控.凝聚胺不能和抗筛细胞互为监控目标.11输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024平行测试Newproductlot/newsystem/newmethod/newclone/newreagent/newmachine/newhomemakereagent30specimen:基准量监测专一性敏感度Sensitivity,specificity12输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024仪器品管温度品管定期校正每日温度监控。离心机品管校正维修允收FunctionalcheckPipette&Dropper

显微镜品管13输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024台湾输血学会教育培训班输血医学工作人员基础班（为一般必需输血行业的大小医疗院所基础血库学培训班）输血医学工作人员进阶班（教导进阶抗体血型及临床输血培训班）输血医学医师培训班14输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024基础班实验方法实习课程ABO/Rh血液凝集及判读口水唾液试验弱亚血型吸附放散传统抗人球抗体筛检及凝聚胺法抗体筛检简易谱细胞抗体鉴定预温法交叉配血或抗体筛检15输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024试管法/凝集试验的观察方法轻轻摇动或倾斜试管，以重悬试管底部的红血球；倾斜试管法乃利用上清液划过cellbuttons，使红血球轻轻脱离管壁，直至试管底部的红血球完全被重悬，判断凝集价数并立即记录结果观察血球cellbuttons被摇散时呈现的方式，包括凝集块的大小、是否有松散凝块、线状凝块、具折光性凝块或混合视野型（mixed-field）结果，这可能对解决问题有所帮助：例某些抗体特异性（

anti-Lu,anti-Sda等）或输血后检体16输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024血液凝集的判读标准判读标准叙述备注分数4+一块大块的凝集123+数个大凝集102+许多中凝集块，背景澄清81+许多细小的凝集，背景混浊5±巨视可见十分微小凝集0无凝集0mf微镜下可见凝集及游离细胞限指微镜下Ｈ上清液完全溶血，无细胞残留PH上清液见明显溶血，但底部仍有血细胞块17输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024ABO/Rh的判读原则Anti-AAnti-BAcellBcellAnti-D*定型00

2+

2+

2+O/Pos.00

2+

2+0O/Neg.

3+00

2+

2+A/Pos.

3+00

2+0A/Neg.0

3+

2+0

2+B/Pos.0

3+

2+00B/Neg

3+

3+00

2+AB/Pos.

3+

3+000AB/Neg.正定<3+,反定<2+,正定为O型,反定差价

2+也是属于ABO定型不符(ABOdiscrepancy)<2+Ddiscrepancy*单克隆ＩｇＭ，IgG/IgM混株,或DVI(-)试管法或凝胶直接凝集法,非高效价抗D

3+??

18输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024凝集价数判读19输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024为什么要使用标准反应价数显现反应之强度及状况，ABO疑难血型的判别﹝含溶血、缗钱、混合视野之观察﹞多重抗体之区分或剂量效应之应用。求取输血科工作同仁实验结果之一致性，回溯性，及标准化。作业标准化。20输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024ABO疑难血型的定义狭义：不合：正定和反定判读结果不合。广义：不合正定<3+,反定<2+反定结果A-B(B-A)≧2和历史血型不合、和口述血型不合21输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024温盐水洗涤红细胞移除自体抗体正定型先预温一瓶温盐水，置37℃将红细胞悬浮液置放于37℃heatblock;，15至60分钟用37℃温盐水洗涤红细胞数次以移除自体抗体使用已洗涤过的红细胞与anti-A,anti-B,anti-D和6%BSA进行正定型，若6%BSA对照仍有反应，则需再洗涤几次则移除IgM自体抗体：DTTorAETtreated移除IgG自体抗体：45℃gentleheat/

chloroquine/acidglycine/EDTA(EGA)※亦可用coldautoadsorption(三个月内未输血)反定型以三组O型红细胞混合吸附血浆，吸附后血浆执行反定型。22输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024预温法交叉配血pre-warmtechnique正常人存在一般冷凝集素，在低温下

32效价。强力冷凝集素常造成定型疑难及配血疑集。强力有害冷凝集素的特点自身抗体，低温效价高于640，温度态度高于30°C，运用的实验方法：冷凝抗体专一性确认，低温冷凝抗体效价测定，温态测试thermalamplitude23输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024预温法prewarmtechnique将献血员红细胞及受血者血浆预先培

温到37度，另准备已预温的37度盐水采严格限制的预温把献血员红细胞及受者血浆加在一起培温,培温后不离心判读,直接用预温的37度盐水洗涤后,再加抗人球试剂离心判读。常用于解决强力的冷凝集素的交叉配血；或者是冷反应的同种抗体(anti-Lea,-Leb,-P1,-M…等,不找抗原阴性，随机取血使用预温法交叉配血)24输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024？输血前试验流程

阳性不规则抗体筛检病患血清+抗筛红细胞阴性选择可测得具临床意义抗体的适当方法抗体特异性鉴定病患血浆+谱细胞主侧配合试验病患血清+献血者红细胞(+/-血袋相对应抗原测试)*ABO血型检查病患及献血者MP法(或IS法)*相对抗原测试的效率比盲配较高25输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024例Allo-Ab!先找找看再说……可能是anti-M……可能是anti-C,-e……可能是anti-Mia+anti-?可否跳过”抗体鉴定”步骤，

直接作配合试验?当此不规则抗体强度较低时，相对应抗原表现较弱的血品（例：singledose）可能被测为”相合”。以系统性分析方式厘清抗体的特异性及反应性，可以经济有效地寻得相合的血品。AntibodyScreening(MP)SISIISIIIAC0++026输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024常见异体抗体之血清学特性对应抗体In-VitroHemolysis4C22C37CAHGCauses:HDNHTRAnti-DSomeMostMostYesYesAnti-CFewMostMostYesYesAnti-ESomeMostMostYesYesAnti-cRareMostMostYesYesAnti-eRareMostMostYesYesAnti-K0FewSomeMostYesYesAnti-k0FewFewMostYesYesAnti-JkaSomeFewFewMostMildYesAnti-JkbSomeFewFewMostMildYesAnti-Fya0RareRareMostYesYesAnti-Fyb0RareRareMostYesYesAnti-LeaSomeMostMostSomeManyNoFewAnti-LebRareMostMostFewSomeNoNoAnti-M0MostSomeFewFewFewFewAnti-N0MostFewOcc.Occ.RareNoAnti-S0FewSomeSomeMostYesYesAnti-s0NoFewFewMostYesYesAnti-P1Occ.MostSomeOccRareNoRareAnti-MiaSomeMostMostYesYesAnti-Dia0SomeSomeMostYesYes#摘自AABBTechnicalManual14thedition.Page288,317.27输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024国人的红细胞次要抗原频率抗原系统抗原抗原频率(台湾*)RhD99.6%C91%E43%c49%e94%KellK0%k100%KiddJka70%Jkb75%DuffyFya99.8%Fyb8%LewisLea23%Leb92%Le(a-b-):8%MNSsUM83%N68%S11%s99.5%Mia7%PP132%DiegoDia3%*国人抗原频率摘自93年血库在职人员基础班讲义，孙建峰主任28输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024进阶班实验课程内容酵素一步法，二步法，化学试剂处理分离红细胞，冷冻红细胞，解冻红细胞血清酸化法。血型物质中和抑制法吸附放散法温态测试thermalamplitude高频抗原抗体鉴定，药物抗体鉴定血小板抗体，白细胞抗体29输血医学实验室认证经验台湾5/9/202430输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024抗体筛检结果分析要点仅部分筛检细胞有反应？可鉴定出特异性的异体抗体反应强度一致？单一抗体或多重抗体血品核发策略？MP法？三相法？或仅作抗球蛋白期？或预温技术？自体对照是否有阳性反应？异体或自体抗体阳性反应在哪一种方法/哪一期发生？温型或冷型抗体MP筛检阳性后，续以传统三相法再做一次抗体筛检＆自体对照优点：1.藉三相法可分析抗体的基本性质（温型或冷型）

2.三相法之抗球蛋白期可减除冷凝集素或缗钱状反应的干扰

3.发现不同反应期的反应差异，有助于解决多重抗体或自体抗体合并异体抗体的复杂案例31输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024抗体鉴定难题(I)抗筛结果(+)

自身对照(-)与谱细胞反应均(+)

或大部份谱细胞反应为(+)

反应期与反应强度不ㄧ致与谱细胞反应均(+)

反应期与反应强度ㄧ致疑为抗high-incidenceantigen的异体抗体疑为多重异体抗体仔细分析可能的特异性，选择更多特定红细胞反应测试病人的红细胞抗原分型利用辅助方法协助特异性鉴定根据反应特性及病人种族，推测可能的特异性测试病人的红细胞抗原分型(请病人的兄弟姐妹前来采血检查)(交由咨询实验室鉴定抗体特异性)32输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024可能为自体抗体加上异体抗体(少数案例可见呈现特异性的自体抗体)抗体鉴定难题(II)抗体筛检(+)

自身对照

(+)与谱细胞反应均(+)

反应期与反应强度不ㄧ致与谱细胞反应均(+)

反应期与反应强度ㄧ致疑为自体抗体(但仍须仔细排除异体抗体的可能)以自体吸收(三个月内未输过血者)或异体吸收法，移除自体抗体，以检测异体抗体的存在。测试病人的红细胞抗原分型(Rh,Kidd……)，可辅助异体抗体特异性鉴定；给予表现型相合血品可预防异体抗体产生直抗(+)※若为输血后检体，须小心排除对抗高频率抗原之抗体的可能！33输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024高频率抗原抗体HTLA手工凝聚胺法所有筛选细胞阳性3个月内有输血史，不要做凝聚胺法自身对照经典IAT+自身细胞如果3个月内无输血史，凝聚胺和/或经典IAT+自身对照自身对照阴性自身对照阳性所有反应强度都一样≦1+2倍稀释~256效价≧32高效价低亲和力抗体hightiterlowavidity一样的反应强度效价<32抗筛阳性IAT阴性

自身抗体药物抗体-几乎都是药物依赖抗体自身细胞>抗筛自身抗体药物抗体-药物非依赖抗体.如果正定型是

O型,用

anti-H检测H(-),孟买或类孟买H(+)所有细胞均反应，但强度不同自身细胞

<抗筛细胞只有1个或几个谱细胞不反应种族

相关的高频抗原D,s,Lea,Leb,Fya.表型多重抗体有剂量效应的单一抗高频抗原抗体见

:多重抗体抗体鉴定程序抗-Dib(MediproSRC)

抗-Wrb(有些谱细胞),

抗-k,

抗-Kpb检测

Dia,Wra,K,Kpa表型都是一样的混合外观抗-Lub,

(DTT破坏)

抗-Sda(天竺鼠尿中和)与普通谱细胞的区别

药物抗体的研究温度反应性评估Donath-Landsteiner实验

冷凝集素效价

温自免溶贫研究自身对照≧2+放散液和血清经典IAT筛选细胞均阳性抗-Sda:混合外观反应,用天竺鼠尿中和

抗-Rg/Ch:AB

血浆中和检测

RhD,RhCE,Kidd,Duffy,MNSs,Kell血型Rh:抗-Hr0

Kidd:抗-Jk3

Duffy:抗-Fy3

MNSs:抗-U

Kell:抗-Ku,anti-Kx(弱

Kell)无花果酶(木瓜酶),

0.2MDTT

处理细胞脐血

i细胞,IgG1,IgG3

溶血性评估IgA/IgG分类酶

+,DTT+

抗-Jra

抗-Vel(脐血iw)抗-p抗-Tja酶

+,DTT0抗-Kpb抗-AnWj(脐血i0)抗-Jsb(EGA0)抗-Lub抗-Lu3~Lu21(除外.Lu8)酶

0,DTT0抗-JMH(脐血iw)抗-Inb抗-Yta

酶

0,DTT+

抗-Ch/Rg+:反应,0:不反应,w:弱反应酶

:木瓜酶/无花果酶高效价低亲和力

抗体是一组抗体群EGA:glycine-HCl-EDTA

处理红细胞酶

0,DTT0:抗-JMH

酶

0,DTT+:抗-Ch/Rg酶

+,DTT+:抗-Csa酶

0,DTTw:Knop抗体

(anti-Kn,McCa,Sla,Yka)

Yka

可以被唾液酸苷酶破坏）如果怀疑是药物抗体,

则放散液,

新鲜血清(要备补体),

及怀疑的药物要准备一下,

以便进一步研究

34输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024多重抗体鉴定技巧仔细判读反应价数选择适当的鉴定方法（传统三相法通常优于MP法）可针对每个phase，以排除法仔细分析特异性可获知该抗体之血清学特性，辅助特异性鉴定参考病人的红细胞抗原分型若病人之某ㄧ抗原为阳性，则可排除其对应抗体的可能病人的抗原异体抗体？阳性不可能！阴性不能排除（无法下定论）35输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024红细胞抗原分型的难题病人近日输过血找出输血前的检体测试分离病人自身血球测试基因分型IgG或IgM抗体附着的红细胞IgM附着：须移除自发性凝集IgG附着：多不影响分型，除非须用抗球蛋白试剂分型若输注单位不多，仔细观察mix-field反应的有无，仍可得到可信的分型结果36输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024

简易离心法(SimpleCentrifugation)分离自体红细胞红细胞以盐水洗三次，最后一次离心1000×g5-15分钟，于不破坏白膜层下尽量移除上清液。(或直接重离心2500g15分钟取白膜层)充分混合均匀后，填满十根毛细管(不含抗凝剂)，一端封口。

※注意！充填每ㄧ支毛细管前均须再次充份混合！离心15分钟。割下十支毛细管顶端5mm，集中于ㄧ试管，加入盐水。以滴管将红细胞全冲出后，移至另一干净试管。洗三次后泡成2-5%红细胞悬浮液（参考资料：AABBTechnicalManual15thedition,Method2.15）新生自体红细胞比重较低，可利用离心法将之与输入的红细胞分离注1:至少须输血后3天的标本才有较佳的分离效果注2:此法不适用于网织细胞生成数较低的病人，亦不适用于有HemoglobinS或spherocyticdisorders病人注3:有些抗原在网织细胞的表现比在老旧的血球为弱，测E,e,c,Fya,Jka与Ge抗原要特别留意37输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024DTT处理红细胞抗原Yta,JMH,Kna,McCa,Yka,LWa,LWb,Ge,AllKell,Lutheran,Dombrock,andCromerbloodgroupantigens0.2MDTT处理红细胞抗原38输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024剂量效应的快速记忆法:KiddsandDuffytheMonkey(Rh)eatlotsofM&NsJka,Jkb,Fya,Fyb,C,c,E,e(noD),M,N,S,sM&NsadaptedfromClinicalLaboratoryScienceReview:ABottomLineApproach(3rdEdition)M&NsKiddDuffyRhMNSs39输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024吸附法adsorption自身吸附autoadsorption冷吸附温吸附

异体吸附Alloadsorption应用于含有多重抗体复杂性高的吸附排除，配合放散可以区分出多重抗体。也可应用于曾输过血，不适合用自身吸附的自身含异体抗体的区别法40输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024放散Elution从致敏化红细胞上游离出IgG抗体常应用于输血后产生抗体，但可能无法测出游离抗体，可以从致敏红细胞上放散出抗体。放散法常应用于新生儿溶血症。多重抗体吸附后放散抗体鉴定浓缩低滴度抗体。（二体积血浆＋一体积红细胞吸附后放散）41输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024放散技术ElutionTechniques改变温度动力学如热放散：包括微放散及强热放散冷冻加温放散Luifreeze-thawelution逆转抗原抗体间吸引力e.g.Ether,xyleneordichloromethaneelution干扰抗原抗体的互补结构e.g.酸放散，快速且敏感，不需用危险化学药剂Ph6.8~7.2抗原抗体结合稳定,降低到pH3则造成抗体游离超音波震荡42输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024利用自身吸附法来吸附去除温自身抗体温自身抗体经常会遮盖了同种临床有意义抗体的出现运用自身吸附法可以侦测到隐藏的同种抗体.解离红细胞上的自身抗体，可以让出更多位置来吸附其他游离自身抗体。利用酵素处理红细胞也可以改变红细胞膜的结构，进而用来吸附不同的抗体。近期内输过血的标本不适合作自身吸附法43输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024异体吸附法近期内输过血无法使用自体吸附法。异体吸附法最好使用三组血球R1R1Jk(a+,b-),R2R2Jk(a-,b+),rr,(也可加一组酶处理血细胞)异体吸附法的应用自体+异体抗体多重复杂抗体:单纯多重抗体,高频抗原抗体+其他抗体Anti-G,anti-D,anti-C或其他复合抗体44输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024稀释法自身抗体多半具有低滴度高亲合力，所以利用滴度的不同，稀释法常可以区分出隐藏的同种抗体。但偶而也会伪阴性，将滴度不高的同种抗体稀释到无法鉴定的滴度。威力十足的穷人原子弹45输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024

运用酵素方法运用常用的酵法(木瓜酶,菠萝密酶,无花果酶)处理红细胞可以加强Rh,P1,I,Kidd,Lewis抗原的表现,使其相对的抗体表达增强可以运用在卡片法传统经典IAT抗人球法无法运用在凝聚胺法PEG+放散液46输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024

酶处理红细胞抗原M,N,S,Fya,Fyb,Yta,Ch.Rg,Pr,Tn,Mg,Mia/Vw,Cla,Jea,Nya,JMH,someGe,Inb47输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024有谱细胞就有谱48输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024酵素处理谱细胞未经处理谱细胞49输血医学实验室认证经验台湾5/9/202450输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024波萝密酶酸放散51输血医学实验室认证经验台湾5/9/202452输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024中和抑制法利用可溶性抗原，可以用来中和或抑制了某些抗体的活性，剩下的抗体就可以单独表达出来。经常有些不具临床意义的抗体都可以被这些血型物质中和或抑制：如Lea,Leb,P1血型物质53输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024血型物质的来源Anti-P1蚯蚓，乌龟蛋白，鸽子蛋Anti-Lewis混合血浆血清或口水唾液Anti-Chido,anti-Rogers混合血浆血清Anti-Sda

人或天竺鼠尿Anti-I人类母乳Anti-H口水唾液54输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024P1,LewiesBGS唾液Ｌｅａ，Ｌｅｂ，Ｈ鸽蛋55输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024Anti-LeaAnti-LebAnti-IAnti-P1Anti-MAnti-A,-B,-HAnti-NNaturallyOccurringLIiPMABHNIgMantibodies56输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024外部质评能力测试ProficiencyTestingCAP质评能力测试ABO/Rh,抗筛,抗体鉴定,抗原确认,交叉试验,直抗检测,抗体效滴度,放散实验,血小板抗体RCPAQAP澳洲品保ABO/Rh,抗筛,抗体鉴定,抗原确认,交叉试验,直抗检测,抗体效滴度,放散实验,台湾医检学会质评能力测试小组ABO/Rh定型,抗筛,抗体鉴定(选择性),抗原确认,交叉合血,直抗检测57输血医学实验室认证经验台湾5/9/202458输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024台湾输血医学质评能力测试每年二次依申请实验室条件分成两组，每次随机两组编码分四支红细胞悬液+血浆样本测ABO/Rh(正反定型合并)，抗筛，抗体鉴定，直抗（每次二支红细胞悬液标本），交叉配血(每次一支红细胞悬液标本)，抗原确认（提供交叉配血标分依抗体种类作抗原分型，不计分）

。以往测试的特殊血型及抗体：A2,B3,类孟买血型，弱Ｄ，anti-D,-E,-c,-Dia,-Mia,-Fyb,-Jka,-Jkb,-P1.-M等,potentcoldanti-I,也试过多种抗体组合(如anti-c,-E,-Jka)。59输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024全国室间质评能力测试比较定型判读，可增加选择测试项目。以最终判读的结果为评分标准。（但有ABO正反不符的选项）可以后送单位的结果来因应室间质评能力测试的结果。有抗体鉴定结果，及交叉配血结果评定。有直抗评量及献血员相对应抗原定型。60输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024血小板抗体台湾组织相容免疫基因学会能力试验小组:HLA抗体PRA测试台湾常用血小板抗体的监测方法:ELISAPRA(酶标法),FlowPRA(流式细胞仪),LuminexPRA,SPRCA(交叉及PRA)适用:血小板输注无效,新生儿血小板低小紫癜症。61输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024血小板输注无效症输血管理华人大部份的血小板输注无效症是来自HLA抗体评估使用CREGmatching(cross-reactivegroup),或HLAmatchmaker效果良好。台湾血液基金会建立约六万多笔常献机采血小板献血员HLAclassI资料,目前也建立多笔CD36及HPAIIIa,IVb抗原阴性献血员台大医院每月约100笔HLA配血机采血小板62输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024MASPAT63输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024交叉配血的意义（主侧）主侧配血:确认血型相容是否有抗筛无法筛到的同种抗体或自身抗体。紧急输血下主侧交叉配血来不及执行，可以省略。（紧急输血，无标本下无血型记录，无抗体筛查，应以Ｏ型血不需配血直接输注）一般交叉配血以凝聚胺法较为快速，若在抗筛完整下，以凝聚胺法主侧配血是快速且安全的主侧交叉配血法。（虽然凝聚胺及卡式配血那一种方法较敏感尚无定论，但凝聚胺的高敏感度及快速仍是主侧交叉配血的主要方法）Transfusion.1987Mar-Apr;27(2):134-7.没有择定抗原阴性的交叉配血，凝聚胺法可以筛到更高比例的不合配血64输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024交叉配血的意义（次侧）次侧配血:确认血浆血型是否相容。因次侧配血的意义在于确认血浆血型是否相容，理论上只要盐水次侧交叉配血即可。但一般次侧配血也以卡片法或凝聚胺法执行，当使用上述方法配血，主侧相合，次侧不合，但献血员及受者血型可以确认同型输血或相容输血，可以勿略次侧不合的情形（常因直抗阳性造成，更换多袋献血员血液次侧交叉仍是不合），此血仍可输用。65输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024交叉配血的策略紧急下，来不及抽输血前检查标本，之前无二次血型资料，紧急输Ｏ型悬红。有确认定型资料，56天内曾有输血前检查，期间无输血，紧急下可输给同型血，不做交叉。（政策指导下决策）一般输血，主侧凝聚胺交叉配血，次侧可盐水配血（选）。常规配血，条件不同可选主侧凝聚胺或经典-IAT配血，次侧盐水配血（选）。66输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024凝聚胺法解析凝聚胺的原理凝聚胺法注意事项凝聚胺法和传统抗人球法67输血医学实验室认证经验台湾5/9/202468输血医学实验室认证经验台湾5/9/202469输血医学实验室认证经验台湾5/9/202470输血医学实验室认证经验台湾5/9/202471输血医学实验室认证经验台湾5/9/202472输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024凝聚胺法Manualpolybrene

注意事项使用显微镜观察1mL

LIM会比0.6mL

LIM较敏感些。使用LIM先洗涤cell会比较敏感些。使用0.05%

Polybrene判读时间勿超过1min,加重悬液后加温会有伪阳性.洗肾病人使用多阳离子heparin,或使用某些高剂量带阳离子药物，不适合使用凝聚胺法配血对冷反应抗体较敏感(anti-Mia,-E,-e,-c,-D,-M,-Lea,-Leb…)，也可使用MPA方法区分或MPCAT。73输血医学实验室认证经验台湾5/9/2024凝聚胺法与传统抗人球法比较方法凝聚胺法传统抗人球（卡片）对Rh抗体敏感度相当高，尤以华人常出现的anti-E,anti-Mia,(华人的anti-E常以IgG/IgM型式表现)好,尤以输血后产生抗体（可能IgG型式）较凝聚胺高。对冷型自身或同种抗体或温型自身抗体，HTLA高敏感度（交叉配血常受冷凝集素干扰，若抗筛阴性，主侧交叉凝聚胺配血不合，常可能因存在冷凝集素造成交叉配血不合）除温型自身抗体，无干扰对临床有意义抗体配血有指标性意义.直抗比传统法更敏感（但无法