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文档简介
培养基人工配制的,适合细菌等微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。培养基的概念培养基的类型按成分分类天然培养基(非化学限定培养基):含有化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物。如,牛肉膏蛋白胨培养基。--成本较低,是微生物实验室和工业化生产中常用的培养基。天然有机物来源主要成分牛肉浸膏/粉瘦牛肉组织浸出汁浓缩干燥而成的膏状或粉末状物质富含水溶性糖类、有机氮化合物、维生素、盐等蛋白胨将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的淡黄色粉末状物质富含有机氮化合物,也含有一些维生素和糖类酵母浸膏/粉酵母细胞的水溶性提取物经浓缩干燥制成的膏状或粉末状物质富含B族维生素,也含有有机氮化合物和糖类培养基的类型按成分分类合成培养基(也称化学限定培养基):根据目标微生物所需营养物质的种类和数量,精确设计并由已知成分的纯化学药品人工配制而成。如,葡萄糖铵培养基--成本较高;微生物生长缓慢;适用于微生物营养代谢、分类鉴定、菌种选育及遗传分析等方面的研究。葡萄糖铵培养基配方氯化钠5g硫酸镁0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g葡萄糖2g麝香草酚蓝0.08g琼脂15g蒸馏水1000mL最终pH6.8+0.2培养基的类型按物理状态分类液体培养基:--大规模培养微生物时常用,在培养需氧菌或兼性菌时,通过通气、振荡或搅拌可以增加培养基的溶氧量,同时使细菌和营养物质分布均匀,从而提高细菌或其产物的产量。固体培养基半固体培养基凝固剂凝固剂(赋形剂)明胶:使用最早,由动物胶原组织制备而成,目前已不作为赋形剂使用,而是用于制备鉴别培养基,观察细菌能否液化明胶。琼脂:目前最常用,是从海藻中提取的一种高度分支的复杂多糖。琼脂明胶常用浓度(%)1.5—25—12熔点(℃)9625凝固点(℃)4020pH微酸酸性灰分(%)1614—15氧化钙(%)1.150氧化镁(%)0.770氮(%)0.418.3微生物利用能力绝大多数微生物不能利用许多微生物能利用培养基的类型按物理状态分类半固体培养基:琼脂含量0.2%-0.5%。--常用于细菌动力试验→判断鞭毛有无。固体培养基:琼脂含量2%-3%。--为微生物提供一个营养表面,单个细菌在上面生长繁殖形成菌落。--常用于细菌的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏等。平板斜面培养基的类型按用途分类基础培养基:含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质。--应用:一些对营养要求不高的细菌的纯培养;作为一些特殊培养基的基础成分。牛肉膏蛋白胨培养基培养基的类型按用途分类营养培养基(加富培养基):在基础培养基中加入某些特殊营养物质(如,血液、血清、酵母浸液等)。--应用:培养营养要求比较苛刻的异养型微生物。血琼脂平板培养基的类型按用途分类选择培养基:在培养基中加入某种化学物质,抑制不需要的微生物的生长,有利于所需微生物的生长。--两类:①加入某种特殊营养物质。如,明胶培养基,以蛋白质为唯一氮源,分离产胞外蛋白酶的微生物。②加入某种抑菌物质,抑制或杀死其他微生物。如,染料亮绿或结晶紫,抑制革兰阳性菌,从分离革兰阴性菌;亚硫酸铋,抑制革兰阳性菌和绝大多数革兰阴性菌,而革兰阴性的沙门菌可以生长。培养基的类型按用途分类鉴别培养基:在培养基中加入某种底物和指示剂,根据细菌能否利用这一底物产生某种代谢产物,依据指示剂的颜色变化,将不同类型的微生物区分开来。--应用:细菌的生化鉴定(生化培养基)培养基底物指示剂代谢产物培养基特征变化主要用途糖发酵培养基各种糖类溴甲酚紫乳酸、醋酸、丙酸等由紫色变成黄色鉴别肠道细菌伊红美蓝培养基乳糖伊红、美蓝酸形成带金属光泽深紫色菌落鉴别大肠杆菌伊红美蓝琼脂平板各种糖发酵培养基选择鉴别培养基:用于细菌的分离培养麦康凯琼脂培养基配方蛋白胨20g乳糖10g3号胆盐1.
5g
氯化钠5g中性红0.03g结晶紫0.001g琼脂15g蒸馏水1000mL最终pH7.2+0.2麦康凯平板培养基的类型按用途分类增菌培养基:给微生物的繁殖提供特定的生长环境,促进目的微生物的大量生长。--根据培养目标分为两类:①通用增菌培养基(非选择性增菌培养基):在基础培养基中加入合适的营养元素(如,生长因子),以促进目的菌的生长繁殖。能保证大多数微生物的生长。②专用增菌培养基(本质为选择培养基):含有特殊的抑菌物质,抑制杂菌的生长,有利于特定微生物的生长。特别适合病原菌含量少,很难直接分离培养的病料。亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液(专用增菌培养基)亚硒酸氢钠:抑制革兰氏阳性菌和非沙门氏菌的大多数革兰氏阴性肠道菌。培养基的类型按用途分类厌氧培养基:专门用来培养基厌氧微生物。含有还原性物质,液体培养基表面常覆盖凡士林或石蜡。庖肉培养基配方蛋白胨30g牛肉膏粉5g
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