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文档简介
第二章肠杆菌科
肠杆菌科细菌是一大群生物学性状近似的革兰氏阴性杆菌。多数是肠道的正常菌群,少数为病原菌。肠杆菌科细菌种类繁多,如埃希菌属、沙门菌属、克雷伯菌属、变形杆菌属等。(Enterobacteriaceae)第一节埃希菌属(Escherichia)
埃希菌属有5个种,其中最重要的是大肠埃希菌俗称大肠杆菌(E.coli),是最常见的临床分离菌。引起疾病:能感染人和动物,引起腹泻、化脓或败血症。
1.形态与染色:卵圆形或杆状,单个或成双,无芽孢,大多数具有周身鞭毛,能运动。一般无荚膜,但有些菌株有荚膜。G-。革兰氏阴性小杆菌,散在或成对,周毛菌,有菌毛。大肠杆菌扫描电镜下的大肠杆菌(示鞭毛)
2、培养及生化特性属于需氧和兼性厌氧菌,对营养要求不高,在普通营养琼脂上生长良好,最适生长温度为37℃,最适pH为7.2-7.4。
普通培养基上生长良好,光滑、湿润、半透明、灰白色菌落;麦康凯琼脂上形成红色菌落;伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属光泽菌落;致病菌株在绵羊血平板上呈β型溶血;麦康凯培养基伊红美蓝琼脂麦康凯琼脂:红色菌落;伊红美蓝琼脂:黑色带金属闪光的菌落;SS琼脂:一般不生长或生长较差,生长者呈红色;血平板:一些致病性菌株常β溶血;①能发酵多种糖类,产酸产气。多数菌株发酵乳糖;约半数菌株不分解蔗糖;②IMViC:++――③几乎均不产生硫化氢,H2S阴性。
不分解尿素。生化特性I(吲哚)
M(MR)
Vi(VP)
C(枸橼酸盐利用试验)3.抵抗力抵抗力中等,但各菌株间有差异。一般都能被巴氏消毒所杀死。常用的化学消毒药可在数分钟之内杀死本菌,在潮湿、阴暗而温暖的环境中,本菌可生存1个月左右,在寒冷而干燥的环境中生存较久。4.抗原结构:血清型较多。
O抗原:是光滑型细菌的菌体抗原,对热稳定,抗原性强。
K抗原:热不稳定抗原。多存在于荚膜或类似结构中,个别位于菌毛中。除K88、K99为蛋白质菌毛抗原,其余均属多糖抗原。
H抗原为鞭毛抗原,为蛋白质。加热80℃或以乙醇处理则被破坏。大肠杆菌的抗原式,表示方法:O:K:H,如O111:K58(B):H12。5、致病性根据毒力因子与发病机制不同,将腹泻大肠杆菌分为5类:(1)产肠毒素大肠杆菌(ETEC)(2)肠致病型大肠杆菌(EPEC)(3)肠出血型大肠杆菌(EHEC)(4)肠侵袭型大肠杆菌(EIEC)(5)肠聚集型大肠杆菌(EAEC)
产肠毒素大肠杆菌(ETEC)引起人和动物腹泻,主要毒力因子有两类:粘附素(定居因子):菌毛和非菌毛类蛋白,能粘附宿主的小肠上皮细胞,虽不是直接的致病因子,却是首要的毒力因子。肠毒素:分泌到胞外的一种蛋白质性毒素。
(1)不耐热肠毒素(heat-labileenterotoxin,LT)
对热敏感,可转变成类毒素,具有A和B亚单位。
(2)耐热肠毒素(heat-stableenterotoxin,ST)
耐热,分子量小,无免疫原性。产志贺毒素大肠杆菌(STEC)引起猪水肿病,有两类毒力因子:粘附素
粘附性菌毛F18,有助于细菌在肠粘膜上皮细胞定居和繁殖。志贺毒素,又称类志贺毒素、Vero毒素。
直接导致该病发生的主要毒力因子。标本采集:根据临床疾病类型的不同,采集适当的标本。如败血症病例采集病变的内脏组织,腹泻病例采集小肠内容物。检查方法:
(一)分离培养:选择培养基(麦康凯或伊红美蓝培养基)(二)生化试验:糖发酵、IMViC试验、H2S阴性。
(三)血清学试验:玻片凝集试验鉴定血清型6.微生物学诊断目前国内外已有多种疫苗预防大肠杆菌病,如全菌灭活苗、亚单位疫苗、类毒素苗、基因工程疫苗等。
7.免疫防治:由于大肠杆菌极易产生耐药性,尤其是抗生素的不合理应用,使耐药菌株不断增加,且通过耐药质粒在细菌间传递,广泛蔓延。为了减少药物的滥用和细菌耐药性的产生,在使用药物治疗大肠杆菌病时,有条件的应扩大常规抗生素种类进行药敏试验。根据药敏试验结果,选择敏感药物,且应注意交替用药,按疗程投药,这样才能收到较好的治疗效果。
第二节沙门氏菌属(Salmonella)绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性,人类食物中毒的主要病原之一,在公共卫生上占有重要地位。所致疾病:1.对人类致病的沙门氏菌2.对畜禽致病:如鸡白痢、鸡伤寒、鸡副伤寒等感染雏鸡后发生白痢或败血症等。也引起牛、羊、马发生流产。3.引起食物中毒:如鼠伤寒沙门氏菌。
一、形态及染色与大肠杆菌相似,除鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌无鞭毛不运动外,其余均以周鞭毛运动。G-。两端钝圆,细长,中等大杆菌,无芽孢,无荚膜。培养特性:该菌需氧或兼性厌氧;对营养的要求不高。
普通琼脂平板:无色半透明、光滑、湿润、边缘整齐或呈锯齿状、直径2-3mm的中等大菌落。鸡白痢、鸡沙门氏菌生长贫瘠,形成较小菌落。
S·S琼脂:由于本菌不分解乳糖,故生长出与培养基颜色一致的淡黄色或无色菌落。产生硫化氢的菌株,菌落中心形成黑色小点。二、培养及生化特性(1)培养特性与埃希氏菌属相似。(2)鸡白痢、鸡伤寒、羊流产和甲型副伤寒等沙门氏菌在普通琼脂上生长贫瘠。培养基中加入血清、葡萄糖、硫代硫酸钠、胱氨酸、脑心浸液和甘油等均有助于本菌生长。(3)麦康凯上,大多形成无色菌落(不发酵乳糖);SS平板上,形成黑色菌落。
麦康凯培养基:发酵乳糖(大肠杆菌);不发酵乳糖(沙门氏菌)在选择培养基上因不发酵乳糖而呈无色菌落。IMViC试验:-+-+;多数菌株H2S阳性。三糖铁培养基三糖铁琼脂斜面:斜面为红色,底部变黑并产气。
三糖铁培养基阳性:斜面变红,底面是黄色或是黑色,有时产生气泡。阴性:是斜面变黄,底面发黄,有时也有气泡。三、抗原及血清型(一)抗原
1.菌体抗原(O抗原):其成分为LPS的多糖侧链。58种,耐
热,1个菌株可含多种,以阿拉伯数字表示。
2.
荚膜抗原(K抗原):与毒力有关,又称Vi抗原。有的菌株有,
有的菌株无。
3.鞭毛抗原(H抗原):其成分为蛋白质,不耐热,63种,
分为两相:
(1)第1相(特异相):小写英文字母表示
(2)第2相(非特异相):阿拉伯数字表示
表示方法:
O抗原:第1相H抗原:第2相H抗原
如:1,4,[5],12:i:1,2有Vi抗原的,则表示为:(二)血清型(抗原式)
O抗原:Vi抗原:第1相H抗原:第2相H抗原沙门氏菌属在外界的生活力较强,在10℃
~42℃的范围内均能生长。但不耐热,60℃15~
30min即被杀死。在普通水中可生存2~
3周,在粪便中可存活1~
2个月。在牛乳和肉类食品中存活数月,在食盐含量为10%~15%的腌肉中亦可存活2~
3个月。由于沙门氏菌属不分解蛋白质,不产生靛基质,污染食物后无感官性状的变化,易被忽视而引起食物中毒。四、抵抗力沙门氏菌属包括2000多个血清型,在形态结构、培养特性、生化特性和抗原构造方面都非常相似,主要寄居于人和其它温血动物的肠道中,可引起多种性质的疾病。
五、致病性第一类群:专门对人致病。如伤寒沙门氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌,乙型副伤寒伤门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌。第二类群:能引起人类食物中毒,称之为食物中毒沙门氏菌群,如鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、肠炎沙门氏菌等。第三类群:专门对动物致病,很少感染人,如马流产沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌。根据沙门氏菌的致病范围,可将其分为三大类群:根据对宿主适应性不同,可分为:专嗜性:如鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌2.偏嗜性:如猪霍乱沙门氏菌3.泛嗜性:如鼠伤寒、肠炎沙门氏菌(一)分离培养:选择培养基
(二)生化试验:糖发酵、IMViC试验、H2S阳性。
(三)血清学试验:玻片凝集试验鉴定血清型
六、微生物学诊断1、疫苗接种;2、严格实行卫生检验和检疫规程;3、有效的抗生素
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