高考高考生物复习专题一基因工程第四十七课时基因工程的基本工具基因工程的基本操作程序全国公开课一等奖百

专题1基因工程第1页第四十七课时基因工程基本工具、基因工程基本操作程序第2页第3页DNA

四种脱氧核苷酸

双螺旋

第4页基因

中心法则

遗传密码

限制性核酸内切酶

限制酶

原核生物

双链DNA

特定核苷酸序列

磷酸二酯键

黏性末端

平末端

第5页复制

限制性核酸内切酶

标识基因

质粒

动植物病毒

DNA

黏性末端

黏性末端和平末端

第6页目标基因

复制

第7页第8页第9页A第10页考点二基因工程基本操作程序【回扣教材】基因工程基本操作程序第一步：______________________1．目标基因主要是指_________________________，也能够是一些含有调控作用因子。目标基因获取路径常见有：_________________________________、_________________、____________________________。目标基因获取编码蛋白质结构基因从自然界中已经有物种中分离出来人工合成目标基因利用PCR技术扩增目标基因第11页2．基因文库：将含有某种生物不一样基因许多______导入________群体中储存，各个_______分别含有这种生物______________，称为基因文库。常见基因文库有______________和_______________。3．PCR技术扩增目标基因PCR是_______________缩写，是一项在___________复制特定DNA片段核酸合成技术，能够在短时间内___________________。其原理是________________，其过程是：①加热至90～95℃，__________；②冷却到55～60℃，________________________；③加热至70～75℃___________________________________________________________。DNA片段受体菌受体菌不一样基因基因组文库cDNA文库聚合酶链式反应生物体外大量扩增目标基因DNA双链复制DNA解旋引物结合到互补DNA链

热稳定DNA聚合酶(如Taq酶)从引物起始进行互补链合成第12页第二步：__________________________1．目标：使目标基因在受体细胞中__________，而且能够______________，同时使目标基因能够_____________________。2．基因表示载体组成：_______＋____________＋_________＋______________(1)开启子：是一段有特殊结构___________，位于基因首端，是___________识别和结合部位，能驱动基因___________________，最终取得所需蛋白质。(2)终止子：是一段有特殊结构______________，位于基因________。(3)标识基因作用：是为了判定受体细胞中_________________，从而将______________________筛选出来。惯用标识基因是____________________。基因表示载体构建稳定存在遗传给下一代表示和发挥作用开启子目标基因终止子标识基因DNA片段RNA聚合酶转录出mRNADNA短片段尾端是否含有目标基因含有目标基因细胞抗生素抗性基因第13页第三步：__________________________1．转化概念：是目标基因进入_________________，而且在受体细胞内__________________过程。2．惯用转化方法：(1)将目标基因导入植物细胞：①采取最多方法是______________，农杆菌特点：易感染__________植物和裸子植物，对大多数__________植物没有感染力；农杆菌中Ti质粒上T—DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞_________________上。②其次还有_____________，是单子叶植物中惯用一个基因转化方法，不过成本较高。将目标基因导入受体细胞受体细胞内维持稳定和表示农杆菌转化法双子叶单子叶染色体DNA基因枪法第14页③__________________，是我国科学家独创一个方法，是一个十分简便经济方法(我国转基因抗虫棉就是用此种方法取得)。(2)将目标基因导入动物细胞：①最惯用方法是___________________。此方法受体细胞多是_________。②操作程序：目标基因表示载体_________→取卵(受精卵)→显微注射→注射了目标基因受精卵移植到_______性动物_____________________内发育→新性状动物。花粉管通道法显微注射技术受精卵提纯雌输卵管或子宫第15页(3)将目标基因导入微生物细胞：感受态细胞法①原核生物特点：________、_______________、_______________________等，所以早期基因工程都用原核生物作为受体细胞。②大肠杆菌最惯用转化方法是：________处理细胞→_________细胞→表示载体与感受态细胞混合→__________细胞吸收DNA分子。3．重组目标基因导入受体细胞后，筛选含有基因表示载体受体细胞依据是________________________。繁殖快多为单细胞遗传物质相对较少Ca2＋感受态感受态标识基因是否表示第16页第四步：__________________________1．首先要检测转基因生物染色体DNA上是否插入了目标基因，方法是________________________。2．其次还要检测______________________________，方法是________________________________________。3．最终检测___________________________________，方法是从转基因生物中提取_________，用对应抗体进行________________________。4．有时还需进行___________________判定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。目标基因检测与判定DNA分子杂交技术目标基因是否转录出了mRNA用标识目标基因作探针与mRNA杂交目标基因是否翻译成蛋白质蛋白质抗原—抗体杂交个体生物学水平第17页第18页第19页C第20页第21页D第22页第23页D第24页第25页B第26页D第27页B第28页C第29页B第30页第31页C第32页A第33页第34页B第35页D第36页第37页A第38页第39页第40页限制性核酸内切酶DNA连接酶DNA分子杂交抗原—抗体特异性反应第41页农杆菌转化法基因枪法不赞成转基因玉米能抵抗玉米螟，但并不能抵抗全部害虫第42页愈伤组织有丝分裂第43页酵母细胞ADS酶基因DNA分子杂交都含有FPP合成酶基因，FPP合成酶基因所携带遗传信息相同；不一样细胞中转录相同模板链，转录和翻译过程中都遵照碱基互补配对标准，两种生物共用一套遗传密码，都含有底物IPP酵母细胞中部分FPP用于合成固醇第44页第45页反转录DNA连接酶3第46页四环素未导入质粒氨苄青霉素无抗原抗体杂交第47页限制性核酸内切识别特定核苷酸序列，并在特定节点上切割DNA分子第48页逆(或反)转录4种脱氧核苷酸DNA分子杂交PCR第49页筛选含有目标基因受体细胞开启子、终止子体细胞克隆或者核移植第50页终止子RNA聚合作为标识基因，将含有重组质粒大肠杆菌筛选出来限制酶和DNA连接酶第51页预防胰