植物组织培养快繁（植物组织培养技术课件）

组培苗增殖培养目录01增值培养的定义02增殖的类型03影响增殖的因素04组培苗增殖培养过程一、继代培养（增殖培养）

将初代培养获得的愈伤组织、不定芽、原球茎等无菌材料进行切割、分离后转接到新的培养基中增殖的过程。二、增殖的类型以芽繁芽原球茎增殖愈伤组织增殖三、影响增殖的因素1、植物种类2、培养基及培养条件3、增殖培养时间长短1、植物种类

不同植物种类或同一种类不同品种，同一植物不同器官和不同部位继代繁殖能力不同。一般是草本优于木本植物，年幼材料优于年老材料，刚分离组织优于已继代组织。2、培养基及培养条件细胞分裂素和生长素的比例是影响繁殖系数和不定芽质量的主要因素。光照对增殖有一定影响，一般弱光利用增殖。3、增殖培养时间长短有的植物材料增殖可保持原来的再生能力和增殖率；如葡萄、月季等。有的植物材料经过一定时间增殖培养后才有分化再生能力；如沙枣等。有的随增殖时间加长分化再生能力降低；如杜鹃等。四、组培苗增殖过程1、培养基的配制1/2MS+2.5mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+20g/L白糖+4g/L琼脂

计算母液吸取量吸取母液混合调节PH值定容分装计算糖、琼脂等称取量称量糖、琼脂等加水加热溶解贴标签灭菌人员准备机台准备工具准备母瓶准备取苗切苗接苗整理2、接种3、育苗室管理温度：28℃左右。湿度：50-60%。光照：暗培养一周左右，给予1000-1500lux光照。4、注意事项（1）培养基灭菌彻底。（2）严守无菌操作规程。（3）严守生根苗切分及接种要求。组培苗生根培养目录01组培苗生根培养的类型02影响组培苗生根的因素03组培苗生根培养过程一、组培苗生根培养的类型1、瓶内生根瓶内生根是指将完成壮苗阶段的单苗，转接到生根培养基上，在培养瓶内生根的方法。2、瓶外生根瓶外生根也叫活体生根。瓶外生根是将已完成壮苗培养的小苗，用生根粉或海藻素处理后栽入疏松透气的基质中，经过合理养护形成根系的方法。二、影响组培苗生根的因素1、植物材料2、培养基3、植物生长调节剂4、培养条件1、植物材料

不同植物、不同基因类型、同一植株不同部位和不同年龄对分化生根都有影响，一般木本比草本难，成树比幼树难，乔木比灌木难。2、培养基

一般情况下矿质元素浓度较高时有利于茎、叶生长，浓度较低时有利于生根，且根多而粗壮，发根也快，加铁盐则更好，因此生根培养可使用1/2MS或1/3MS培养基；生根培养时通常使用的糖是蔗糖，其浓度一般为1%-3%；组培苗的生根要求一定的pH值，一般为5.0-6.0。3、植物生长调节剂

对于大多数植物来说，诱导生根需要有适当的生长素，其中最常用的是NAA和IBA，质量浓度一般为0.1-10mg/L。通常的使用方法是将植物生长调节剂预先加入到培养基中，然后再接种组培苗诱导生根。4、培养条件

不同植物对光照和温度的要求不同。光照强度和光照时间对生根影响十分复杂。三、组培苗生根的过程1、培养基的配制蝴蝶兰生根培养基：1/2MS+1g/L活性炭+0.1mg/LNAA+18g/L白糖+4g/L琼脂

计算母液吸取量吸取母液混合调节PH值定容分装计算糖、琼脂等称取量称量糖、琼脂等加水加热溶解贴标签灭菌人员准备机台准备工具准备母瓶准备取苗切苗接苗整理2、接种3、育苗室管理温度：28℃左右。湿度：50-60%。光照：暗培养一周左右，给予1500lux-2000lux光照。4、注意事项（1）培养基灭菌彻底。（2）严守无菌操作规程。（3）严守生根苗切分及接种要求。组培苗的炼苗与移栽

—以粗肋草为例目录01组培苗的炼苗02组培苗移栽03小苗的养护管理04提高组培苗移栽成活率的途径一、组培苗的炼苗

已生根的组培苗在移栽前要先进行锻炼，使组培苗适应移栽后的环境并进行自养，这是一个逐步锻炼和适应的过程，这个过程叫作驯化或炼苗。炼苗的目的在于通过人工控水、肥、增光、降温等措施，使组培苗逐渐适应外界环境，提高组培苗对外界环境的适应性，提高其光合作用的能力，促使组培苗健壮，最终达到提高组培苗移栽成活率的目的。1、保护栽培设施（1）现代温室（2）日光温室（3）遮荫防雨棚（4）防虫纱网棚2、炼苗过程一般是将生根状态理想的组培苗（一般具有2-3条根，根长1-2cm）移入温室内，开始保持与培养室比较接近的环境条件，适当遮光，以后逐渐撤除保护，使光照条件接近生长环境。3、炼苗时间不同植物的组培苗炼苗时间不同。如甜叶菊的炼苗时间为5天，粗肋草的炼苗时间20-30天，白掌的炼苗时间30天，蝴蝶兰、金线莲的炼苗时间为2个月。二、组培苗移栽（1）苗的准备将驯化（炼苗）过粗肋草瓶苗瓶塞打开，向瓶内装少许水轻轻摇动培养瓶，用镊子轻轻搅动瓶苗内的培养基，待培养基松动后用镊子小心将苗子取出，取苗时注意尽量避免伤苗。组培苗移栽前要将苗上的培养基清洗干净后控水备用。若瓶苗有少量污染则用清水洗净后，在1000倍甲基硫菌灵溶液中浸泡15s后取出，再用清水清洗后控水备用。（2）基质准备配制基质。将泥炭土（0-10）、珍珠岩按照7：3的比例混合。配制土壤消毒剂。配制甲基硫菌灵1000倍液10L。土壤消毒。将配制好的甲基硫菌灵喷洒于基质中消毒。（3）容器准备组培苗一般采用72孔、105孔黑色穴盘种植即可。（4）种植种植时手势要轻，要求根系舒展，不能外露，适当种深些，1cm。以防后期茎伸长过长，影响美观且易倒伏。基质埋住茎基部即可，切勿将心埋住。不同级别小苗分别种植不同穴盘中，种植过程中要注意保湿工作，适时给叶面喷水，以免植株失水萎蔫。种植好后，浇定根水，并及时用薄膜（温度低的季节）或遮荫网（高温强光季节）保湿。（1）水分控制小苗定植后，进入成活期，时间长度一般为8-15d。应保持湿度。到成活期后，小苗有了根系，但这时的根系少而弱，吸水能力较差，需经常给小苗喷洒叶面水保湿，并长期保持基质呈湿润状态，防止小苗失水萎蔫。三、小苗的养护管理（2）温度管理移栽前要保持温度在25-30℃。（3）肥料管理当小苗有新根和新叶长出时可开始浇肥。浇肥用2000-3000倍的20-20-20速效肥液浇灌。浇肥的次数和频率要根据苗的长势来具体判断。一般每浇1次肥后，浇1次水后再浇第2次肥。（4）光照强度刚刚移栽的小苗要给予适度遮阴，苗成活稳定后要逐渐增强光照，才可使粗肋草叶色美观。穴盘苗的光照强度控制在10000lux以内，阴天可全光照。四、提高组培苗移栽成活率的途径（1）组培苗的生理状况。组培苗的生理状况是影响移栽成活率的内在因素。