2022-2023学年辽宁省沈阳市郊联体高二下学期期中生物试题（解析版）

高级中学名校试卷PAGEPAGE1辽宁省沈阳市郊联体2022-2023学年高二下学期期中试题一、单项选择题1.中国酸菜历史悠久，早在北魏的《齐民要术》中就记载了用白菜等原料腌制酸菜的多种方法。酸菜不仅口感好，而且对人体有益。下列说法错误的是（）A.酸菜制作过程中，主要起作用的微生物是乳酸菌B.制作泡菜时腌制时间过长会引起细菌大量繁殖C.真空包装的酸菜可能会因杂菌污染而发生“胀袋”D.腌制过程中，坛中水分会因蔬菜细胞渗透失水而增多〖答案〗B〖祥解〗1、泡菜的制作离不开乳酸菌，选用乳酸菌（异养厌氧型）在密闭条件下，利用乳酸菌的发酵作用，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸，发酵产物乳酸不断积累，抑制其他菌的活动。2、泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。【详析】A、酸菜制作过程中，白菜经乳酸菌发酵后产生大量乳酸，因此起主要作用的微生物是乳酸菌，A正确；B、温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，而腌制时间过长，由于发酵产物乳酸不断积累，pH降低，不利于细菌大量繁殖，B错误；C、真空包装的酸菜发生“胀袋”的原因可能是混入了其它微生物，这些混入的微生物呼吸作用会释放CO2，使包装袋膨胀，C正确；D、腌制过程中，因为外界溶液浓度高会使蔬菜细胞渗透失水，故坛中水分会因蔬菜细胞渗透失水而增多，D正确。故选B。2.培养基是一种人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。下表是某微生物培养基的配方，其相关叙述正确的是（）编号①②③④⑤成分(NH)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量0.6g5.0g0.7g0.7gl00mLA.此培养基可用来培养自养型微生物B.加入的KH2PO4既可从养分上提供P和K，又可为微生物提供能量C.若要观察微生物的菌落特征，培养基中还需要添加葡萄糖D.该培养基可选用干热灭菌进行灭菌〖答案〗A〖祥解〗各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求；培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类，液体培养基中加入琼脂可以制作固体培养基。【详析】A、根据表格分析，该培养基中含有氮源、无机盐、水，没有碳源，因此可以用来培养自养型微生物，A正确；B、表格中的KH2PO4可以为微生物提供P和K元素，还可以缓冲培养基的pH，但不能为微生物的生长提供能量，B错误；C、若要观察微生物的菌落特征，需要使用固体培养基，培养基中应该加入琼脂，C错误；D、培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法灭菌，D错误。故选A。3.啤酒生产的简要流程如图所示，制麦时用赤霉素溶液浸泡大麦种子，糖化主要将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子。下列说法错误的是（）A.过程①利用大麦发芽产生的淀粉酶进行发酵，在焙烤时该酶失活B.过程②碾磨有利于淀粉与淀粉酶充分接触，使淀粉分解，形成糖浆C.发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期可以延长排气时间间隔D.过程③在菌种的选育上，可通过基因工程改造啤酒酵母，缩短生产周期〖答案〗A〖祥解〗果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。【详析】A、利用大麦发芽产生的淀粉酶进行发酵,焙烤的目的是利用加热杀死种子的胚，并不是让酶失去活性，A错误；B、淀粉原料必须与酶充分接触，反应才能完全，过程②碾磨有利于淀粉与淀粉酶充分接触，使淀粉分解，形成糖浆，B正确；C、由于酵母菌的有氧呼吸和无氧呼吸都会产生二氧化碳，为了防止发酵液溢出，因此发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期由于糖类物质不充足，产生的气体变少，可以延长排气时间间隔，C正确；D、啤酒生产需要筛选产酒精量高的酵母菌，因此使用基因工程改造的啤酒酵母，使之产酒精量较高，可以加速发酵过程，缩短生产周期，D正确。故选A。4.人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷，利用植物细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下。下列叙述正确的是（）A.培养前人参根切块要经过严格的灭菌处理B.诱导后得到的①的分化程度高于外植体C.可用射线处理①获得人参皂苷高产的细胞D.进行过程②时常需要用胰蛋白酶处理①〖答案〗C〖祥解〗脱分化：已经分化的细胞经过脱分化，失去其特有的结构和功能，转变为未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块，即愈伤组织。【详析】A、培养前人参根切块要经过消毒，但不进行严格的灭菌处理，A错误；B、诱导后得到的①为愈伤组织，分化程度低于外植体，B错误；C、可用射线处理①愈伤组织，促使其发生突变，从中筛选人参皂苷高产的细胞，C正确；D、进行过程②时需要用酶水解细胞壁，植物细胞壁成分为纤维素和果胶，因此应该用纤维素酶和果胶酶，D错误。故选C。5.VEGF是血管内皮生长因子。研究表明恶性肿瘤患者血清中的VEGF水平普遍高于健康人，VEGF已成为新型肿瘤标志物，在肿瘤筛查中具有诊断价值。科研人员设计如下流程制备VEGF单克隆抗体。下列叙述错误的是（）A.该流程利用了动物细胞融合和动物细胞培养技术B.①是从免疫小鼠脾脏中提取的多种B淋巴细胞C.②和③所进行的两次筛选过程都不需要用到VEGFD.单克隆抗体能准确的识别抗原的细微差异〖答案〗C〖祥解〗单克隆抗体制备利用的就是动物细胞融合技术，在该过程中需要进行两次筛选，第一次筛选需要用到选择培养基，其目的是筛选获得杂交瘤细胞，第二次筛选需要进行单克隆培养和抗体检测，其目的是获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。【详析】A、制备单克隆抗体需要将已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，制成杂交瘤细胞，然后进行细胞培养使之产生单克隆抗体，该过程中需要用到动物细胞融合和动物细胞培养技术，A正确；B、由图可知，在①之前向小鼠体内注射VEGF（作抗原），引发小鼠特异性免疫，获得已免疫的B淋巴细胞，由于在此过程中，小鼠还可能接受其他抗原物质刺激，因此从其脾脏中提取的B淋巴细胞有多种，B正确；C、②代表利用选择培养基进行的第一次筛选，该过程不需要用到VEGF；③代表第二次筛选，即克隆化培养和抗体检测，其中抗体检测需要用到VEGF与克隆化培养的杂交瘤细胞产生的抗体进行抗原-抗体杂交，C错误；D、单克隆抗体特异性强、灵敏度高，能准确的识别抗原的细微差异，D正确。故选C。6.为解决大面积烧伤病人的植皮难题，科学家研制出人造皮肤，研制过程中需要将人的皮肤细胞置于培养液中进行培养。培养液配制除必需的已知成分外，还必须加入天然成分，细胞才能正常生长和增殖。下列相关叙述正确的是（）A.人的皮肤细胞培养前须用胃蛋白酶处理，使细胞分散开B.细胞培养过程中只需不断通入氧气，就能保证细胞的正常生命活动C.培养液中加入的天然成分可能是血清，用于补充细胞生长和增殖所需的物质D.经培养可得到由多层细胞构成的人造皮肤，能直接用于移植〖答案〗C〖祥解〗动物细胞的培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。【详析】A、人的皮肤细胞培养前须用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理，使细胞分散开，不能用胃蛋白酶，A错误；B、细胞培养过程中需适宜的气体环境（95%的空气和5%的CO2）、适宜的温度和pH、无菌无毒的环境等，B错误；C、在进行动物细胞培养时，通常培养液中需加入血清、血浆等一些天然成分，主要目的是为细胞提供促生长因子，以补充细胞生长和增殖所需的物质，C正确；D、动物细胞培养过程中存在接触抑制，当细胞与细胞相互靠近时，就会彼此限制细胞的生长和增殖，形成单层细胞，D错误。故选C。7.“国宝”熊猫一直深受大家的喜爱。熊猫在自然条件下受精困难，产子率较低，可以通过胚胎工程提高熊猫的产子率。下列说法错误的是（）A.自然条件下，熊猫的受精作用是在雌性熊猫的卵巢内完成的B.在精子的刺激下，卵子完成减数分裂，排出第二极体后形成雌原核C.体外受精时，可将培养成熟的卵子与获能精子置于适当的培养液中共同培养一段时间，促使他们完成受精D.胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚进行分割〖答案〗A〖祥解〗胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术，进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。【详析】A、自然条件下，哺乳动物（比如熊猫）的受精作用在输卵管内完成，完成受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体，A错误；B、精子入卵后，被激活的卵母细胞完成减数第二次分裂，排出第二极体后，形成雌原核，雌原核一般略小于雄原核，B正确；C、体外受精时，从卵巢中采集的卵母细胞，一般都要体外经人工培养成熟至MⅡ时，才能与获能的精子受精，C正确；D、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，D正确。故选A。8.对下图所示黏性末端的说法错误的是A.甲、乙、丙黏性末端是由各自不同的限制性核酸内切酶催化产生的B.甲、乙具相同的黏性末端可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能C.DNA连接酶作用位点在b处，催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键D.切割甲的限制性核酸内切酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子〖答案〗C〖祥解〗本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。【详析】甲、乙、丙粘性末是由各自不同的限制性核酸内切酶催化产生的，A正确；甲、乙的黏性末端虽然不完全相同，但是其露出来的碱基是配对的，所以可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能，B正确；DNA连接酶作用位点在a处，催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键，C错误；切出甲的限制酶识别的是GAATTC，在GA之间切割；切出乙的限制酶识别的是CAATTG，在CA之间切割；所以切出甲的限制性核酸内切酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子，D正确。9.下图表示“DNA的粗提取和鉴定”的相关流程。下列叙述正确的是（）A.步骤1和步骤2的目的是获取研磨液中的沉淀物B.步骤3中的DNA溶于酒精，而某些蛋白质不溶于酒精C.利用二苯胺试剂鉴定DNA时，将试管置于50℃的温水中D.步骤4中DNA在2的NaCl溶液中溶解度较高〖答案〗D〖祥解〗DNA的粗提取和鉴定的原理：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分离DNA和蛋白质。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol⋅L−1的NaCl溶液中。在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。【详析】A、步骤1和步骤2的目的是获取研磨液中的上清液，A错误；B、步骤3中的DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精，B错误；C、利用二苯胺试剂鉴定DNA时，将试管置于沸水中，C错误；D、DNA在不同浓度的NaCl中溶解度不同，DNA在2mol⋅L−1的NaCl溶液中溶解度较高，D正确。故选D。10.在基因工程中，常采用花粉管通道法和土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞。下图为花粉管通道法的一般原理示意图。相关叙述正确的是（）A.外源DNA需要来自于真核细胞B.花粉管通道法的操作方式还可以将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中C.植物生长各个时期均可通过花粉管通道导入外源DNAD.含外源DNA的种子发育成植株后均具有相应性状〖答案〗B〖祥解〗花粉管通道法有多种操作方式：可以用微量注射器将含目的基因的DNA直接注入子房内；可以在植物受粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道进入胚囊。【详析】A、外源DNA可来自于真核细胞，也可来自原核细胞，A错误；B、花粉管通道法有多种操作方式：可以用微量注射器将含目的基因的DNA直接注入子房内；可以在植物受粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道进入胚囊，B正确；C、花粉管通道法应在雌蕊成熟时进行操作，C错误；D、含外源DNA的种子发育成植株不一定均具有相应性状，还需进行个体生物学水平等的检测，D错误。故选B。11.下列关于生物工程相关知识的叙述，正确的有几项（）①植物组织培养过程中愈伤组织的代谢类型是自养需氧型②牛胚胎发育的历程是：受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚→幼体③若要生产转基因抗病棉花，可将目的基因先导入到土壤农杆菌中，再转入棉花细胞中④DNA分子具有可解离的基团，在一定的PH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷⑤PCR技术需要利用限制酶打开DNA双链A.2项 B.3项 C.4项 D.5项〖答案〗B〖祥解〗PCR反应过程：变性→复性→延伸。变性：当温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链，复性：温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，延伸：72℃左右时，Taq酶有最大活性，可使DNA新链由5'端向3'端延伸。【详析】①脱分化形成愈伤组织，愈伤组织没有叶绿体，代谢类型是异养需氧型，①错误；②牛胚胎发育的历程是：受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚→幼体，②正确；③目的基因导入植物受体细胞常用农杆菌转化法，因此若要生产转基因抗病棉花，可将目的基因先导入到土壤农杆菌中，再转入棉花细胞中，③正确；④DNA分子具有可解离的基团，在一定的pH条件下DNA分子可带上正电荷或负电荷，从而能在电泳的条件下发生定向移动，④正确；⑤PCR技术利用的是高温打开DNA双链，不是酶，⑤错误。综上②③④正确。故选B。12.OsCLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如下图所示），利用农杆菌转化法转化水稻，在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列叙述正确的是（）A.将重组Ti质粒导入农杆菌前，用Ca2+处理农杆菌可提高转化率B.四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译C.可用PCR技术检测四种酶在转基因水稻中的翻译产物D.应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞〖答案〗A〖祥解〗线粒体和叶绿体的DNA，都能够进行半自主自我复制，并通过转录和翻译控制某些蛋白质的合成，但同时受到细胞核基因的控制。标记基因：便于重组DNA分子的筛选。【详析】A、将重组Ti质粒导入农杆菌前，用Ca2+处理农杆菌使其处于感受态，易于接受重组质粒，从而提高转化率，A正确；B、这些基因在叶绿体外合成，由叶绿体转运肽引导合成的蛋白质进入叶绿体，B错误；C、可用抗原-抗体杂交技术检测是否有相应的蛋白质产生，从而检测四种酶在转基因水稻中的表达情况，C错误；D、卡那霉素不在T-DNA上，应用潮霉素培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞，D错误。故选A。13.下列关于利用乳腺生物反应器生产药用蛋白的叙述，正确的是（）A.需要将编码药用蛋白的基因与能在乳腺中特异性表达的基因的启动子等调控元件重组在一起B.需要将目的基因导入乳腺细胞中C.需要借助于核移植技术和胚胎移植技术培育出转基因动物D.药物的生产不会受到转基因动物性别和年龄的限制〖答案〗A〖祥解〗乳腺生物反应器是将外源基因在哺乳动物的乳腺中特异表达，以转基因动物的乳腺组织生产药用蛋白。【详析】A、要使药用蛋白基因在奶牛乳腺中特异性表达，应将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控元件重组在一起，保证相关基因正常转录和翻译，A正确；B、需要将目的基因导入受精卵中，B错误；C、乳腺生物反应器的培育过程中不涉及核移植技术，C错误；D、由于乳腺生物反应器需要利用动物产生的乳汁进行药物生产，故药物的生产受到转基因动物性别和年龄的限制，要求选择合适的雌性个体，D错误。故选A。14.资料一：科学家将牛的生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”。资料二：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。阅读以上资料，下列相关叙述错误的是（）A.将牛的生长激素基因导入小鼠受精卵常用显微注射法B.牛的生长激素基因在“超级小鼠”的所有细胞中都表达C.资料二中采用的技术还可以创造新的基因和蛋白质D.资料二中氨基酸的种类发生改变是个别碱基替换的结果〖答案〗B〖祥解〗基因工程的实质是将一种生物的基因转移到另一种生物体内，后者可以产生它本不能产生的蛋白质，进而表现出新性状。蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。【详析】A、小鼠受精卵属于动物细胞，将牛的生长激素基因（目的基因）导入动物细胞中常用显微注射法，A正确；B、由于基因的选择性表达，牛的生长激素基因只在“超级小鼠”的垂体细胞中表达，B错误；C、资料二中科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造，这属于蛋白质工程，蛋白质工程可以创造新的基因和蛋白质，C正确；D、据资料二分析可知，基因改造后，其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，说明基因中发生了碱基对的替换，D正确。故选B。15.下列有关现代生物工程技术应用的叙述，正确的是（）A.高产青霉素菌株属于转基因成果B.设计试管婴儿性别会引起性别比例失调，违背伦理道德C.中国政府对于克隆技术的态度是不反对治疗性克隆，可有限制的进行生殖性克隆D.由于存在生殖隔离，大田种植转基因抗旱、抗除草剂农作物不存在生物安全性问题〖答案〗B〖祥解〗高产青霉素菌株是诱变育种产生的，其原理是基因突变。设计试管婴儿性别会引起性别比例失调，违背伦理道德。中国政府禁止生殖性克隆，一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。但是，中国不反对治疗性克隆。面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，而不能因噎废食。【详析】A、高产青霉素菌株是诱变育种产生的，其原理是基因突变，A错误；B、设计试管婴儿性别会引起性别比例失调，违背伦理道德，B正确；C、中国政府对于克隆技术的态度是不反对治疗性克隆，禁止生殖性克隆，C错误；D、根据目前的研究，对转基因生物的风险还不完全清楚，大田种植转基因抗旱、抗除草剂农作物可能存在生物安全性问题，D错误。故选B。二、不定项选择题16.勤洗手是预防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠状病毒期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果，研究人员检测了用凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。下列叙述错误的是（）A.统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是稀释涂布平板法B.除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养C.培养基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌D.初步判断培养基上菌种的类型，需要用显微镜观察菌体的形状〖答案〗CD〖祥解〗微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详析】A、平板划线不能用于活菌计数，故统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是稀释涂布平板法，A正确；B、除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养，以验证培养基是否被杂菌污染，B正确；C、由于当两个或多个细胞连在一起时平板上显示的只是一个菌落，故培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个、甚至几个活菌，C错误；D、由于菌落肉眼可见，故可根据菌落的形态、颜色等特征初步判断培养基上菌种的类型，无需用显微镜观察菌体，D错误。故选CD。17.兔的免疫系统可对广泛的抗原产生应答，其较大的脾脏可产生更多抗体，兔的单克隆抗体具有天然多样性、高亲和力和特异性、易于人源化（已成为将外源抗体转化为有效安全的治疗药物的重要方式），因而是进行免疫研究的好材料。下列叙述正确的是（）A.若直接利用未人源化的兔单克隆抗体进行治疗，机体将会产生免疫反应，导致他的治疗效果降低B.用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞时，每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞C.利用选择培养基筛选出的杂交瘤细胞具有能迅速大量增殖的能力D.体外培养特异性杂交瘤细胞时，需要给予95%氧气和5%CO2的混合气体〖答案〗ABC〖祥解〗单克隆抗体由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体，B细胞和骨髓瘤细胞融合会出现未杂交的细胞以及自身融合的细胞，不一定全是杂交瘤细胞。【详析】A、若直接利用未人源化的兔单克隆抗体进行治疗，其作为外来物质，作为抗原使机体产生免疫反应，将其清除，导致其的治疗效果降低，A正确；B、为确保产生特异性强的抗体，用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞时，每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞，B正确；C、该过程中进行了两次筛选，第一次是筛选出能够大量增殖的杂交细胞，第二次是筛选出既能大量增殖又能产生单一性抗体的杂交瘤细胞，利用选择培养基能筛选出特异性强的杂交瘤细胞，其具有能迅速大量增殖的能力，C正确；D、体外培养特异性杂交瘤细胞时，需要给予95%的空气和5%的CO2，D错误。故选ABC。18.胚胎工程中各种操作技术如图所示。下列说法正确的是（）A.e具有分化为成年动物体内任何一种类型细胞的潜能B.早期囊胚a、b、c基因型相同，但发育得到的个体表型不一定相同C.d可直接移植给受体，且得到的两头小牛的性状一般相同D.胚胎移植时因代孕母牛几乎对外来胚胎不发生免疫排斥反应，因此无需使用免疫抑制剂〖答案〗ACD〖祥解〗试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。【详析】A、e是胚胎干细胞，具有全能性，即具有分化为成年动物体内任何一种类型细胞的潜能，A正确；B、据图可知，三种早期囊胚由不同受精卵发育而来，故a、b、c细胞核中的遗传物质不一定相同，B错误；C、d是经过胚胎分割形成的两个健康的胚胎，可直接移植给受体，该过程属于无性生殖，得到的两头小牛来自同一个受精卵，性状一般相同，C正确；D、胚胎具有免疫豁免现象，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，不需要注射免疫抑制剂，D正确。故选ACD。19.生物技术与工程实践中常利用特殊的化学试剂或一定的物理刺激进行“激活”操作。下列叙述正确的是（）A.将果酒用于果醋发酵时，适当提高温度是“激活”醋酸菌的重要条件之一B.制备单克隆抗体时，应先利用抗原“激活”小鼠产生相应的B淋巴细胞C.克隆高产奶牛时，获得的重构胚需要在胚胎移植后用Ca2+载体等试剂“激活”D.在PCR反应过程中，引物需要Mg2+“激活”〖答案〗AB〖祥解〗参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【详析】A、制作果酒的最适温度为18-30℃，而醋酸菌的最适温度为30-35℃，所以将果酒用于果醋发酵时，提高温度是“激活”醋酸菌的重要条件之一，A正确；B、单克隆抗体的制备过程中，需要用抗原“激活”小鼠产生相应的B淋巴细胞，再将该细胞与骨髓瘤细胞融合，B正确；C、获得的重构胚需要在胚胎移植前用Ca2+载体等试剂“激活”，C错误；D、在PCR反应过程中，耐高温的DNA聚合酶需要Mg2+"激活"，D错误。故选AB。20.淀粉经淀粉酶水解后得到的产物是重要的工业原料，但工业化生产常需在高温条件下进行，而现有的淀粉酶耐热性不强，科研人员发现将淀粉酶（AmyS1）第27位的亮氨酸替换为天冬氨酸能产生耐热性高的淀粉酶（AmyS2），由此科研人员根据AmyS2的氨基酸序列设计并人工合成了AmyS2基因，将其导入芽孢杆菌内，具体过程如下图所示。最终结果表明，与导入质粒B相比，导入质粒C的芽孢杆菌培养液中更易获得并提纯Amys2．下列说法错误的是（）A.获得AmyS2基因并将其导入芽孢杆菌得到AmyS2的过程是通过蛋白质工程实现的B.构建质粒C时需用限制酶Eco52I和BamHI同时切割质粒B和信号肽基因C.信号肽基因表达的产物可帮助核糖体上合成的AmyS2进入内质网和高尔基体D.可用PCR技术检测芽孢杆菌中是否导入了AmyS2基因〖答案〗BC〖祥解〗基因工程：目的基因的筛选与获取、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。分泌蛋白的合成：首先，在游离的核糖体中以氨基酸为原料开始多肽链的合成。当合成了一段肽链后，这段肽链会与核糖体一起转移到粗面内质网上继续合成过程，并且边合成边转移到内质网腔内，再经过加工、折叠，形成具有一定空间结构的蛋白质。内质网膜鼓出形成囊泡，包裹着蛋白质离开内质网，到达高尔基体，与高尔基体融合，高尔基体对蛋白质做进一步的加工，然后形成包裹着蛋白质的囊泡转运到细胞膜，与细胞膜融合。【详析】A、科研人员根据AmyS2的氨基酸序列设计并人工合成了AmyS2基因，因此获得AmyS2基因并将其导入芽孢杆菌得到AmyS2的过程是通过蛋白质工程实现的，A正确；B、BamHI会破坏AmyS2基因，B错误；C、在分泌蛋白的合成过程中，信号肽序列可帮助肽链进入内质网，在内质网被切割，因此信号肽基因表达的产物可帮助核糖体上合成的AmyS2进入内质网，但不能引导其进入高尔基体，C错误；D、可用PCR技术检测芽孢杆菌的DNA上是否插入了AmyS2基因，如果经过PCR扩增，不出现扩增产物，说明没有插入基因，反之，则成功插入，D正确。故选BC。三、非选择题21.发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产品的过程。发酵工程则是通过现代工程技术，利用微生物的特定功能，规模化生产对人类有用的产品。它涉及菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。请据此回答与发酵及发酵工程相关的问题。（1）在传统发酵生产葡萄酒和腐乳的过程中，所利用的主要的微生物分别来自于葡萄皮上的__________和空气中的__________。酿酒时，会因操作不当使酒变酸，此时在酒的表面会观察到一层膜，产生膜的原因是__________。（2）现代发酵工程中所利用的微生物需要使用选择培养基进行严格筛选，在微生物学中，将___________的培养基称为选择培养基。在筛选微生物时，可使用接种环在选择培养基上进行接种，这种接种方法称为__________。（3）利用发酵工程可以大量生产产品，发酵工程的中心环节是__________。（4）青霉菌在一定条件下可产生青霉素，青霉素具有杀菌的作用，有同学认为利用青霉菌发酵生产青霉素的过程中不必担心杂菌的污染，你是否认同这样的观点__________（是/否），为什么?__________。（5）为了研究某土壤的微生物组成，某同学测得每克土壤样品中有纤维素分解菌1.6×106个，在4个培养基上分别接种的土壤样液0.1mL，培养后菌落数分别为170、155、176、139个，则土壤样品的稀释倍数为__________。〖答案〗（1）①.酵母菌②.毛霉③.醋酸菌在液面大量繁殖形成（2）①.允许特定种类微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长②.平板划线法（3）发酵罐内发酵（4）①.否②.在青霉素生产过程中如果污染了杂菌,某些杂菌会分泌青霉素酶将青霉素分解掉（5）103〖祥解〗测定培养液中微生物的数目，可采用显微镜直接计数(或血细胞计数板计数)法对培养液中的微生物直接计数，也可用稀释涂布平板法将微生物接种于灭菌后的固体培养基上，培养一段时间后，通过计数菌落数目计算培养液中微生物的数目。由于采用第一种方法计数时不能剔除死菌，因此统计的结果往往偏大；采用第二种方法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以第一种方法统计的数目比实际活菌数目高，第二种方法统计的数目比实际活菌数目低。【小问1详析】在传统发酵生产葡萄酒和腐乳的过程中，所利用的主要的微生物分别来自于葡萄皮上附着的野生酵母菌和空气中的毛霉。酿酒时，若因操作不当使酒变酸，应该是醋酸菌活动的结果，此时在酒的表面会观察到一层膜，该膜的产生是醋酸菌在液面大量繁殖形成的。果酒变酸也是醋酸菌进行细胞呼吸的结果。【小问2详析】现代发酵工程中所利用的微生物需要使用选择培养基进行严格筛选，选择培养基是指能够允许某些微生物生长，同时抑制另外一些微生物生长的培养基称为选择培养基。在筛选微生物时，可使用平板划线法在选择培养基上进行接种，这样通过逐步划线可获得单菌落，该接种方法用到的接种工具是接种环。【小问3详析】微生物在发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。【小问4详析】这种观点是错误的，青霉菌产生的青霉只能抑制细菌和放线菌的生长和繁殖，况且也并不是所有的细菌都能被青霉素抑制，同时青霉素对真菌起不到杀灭的作用，且杂菌污染可能会影响青霉素的产量或者导致青霉素被分解，因此用青霉菌发酵生产青霉素的过程中依然需要防止杂菌的污染。【小问5详析】以设稀释倍数是x，可列出方程式为（170+155+176+139）÷4÷0.1×x=1.6×106，解得x=103，即土壤样品的稀释倍数为103。22.科学家利用植物体细胞杂交技术，将番茄叶片细胞制成的原生质体和马铃薯块茎细胞制成的原生质体融合，成功地培育出了“番茄——马铃薯”杂种植株，如图Ⅰ所示，其中①～⑤表示过程，a～f表示细胞、组织或植株。育种工作者还利用番茄进行了如图2所示的两组实验。据图回答下列问题：（1）图1的过程②中，所用的化学方法除PEG融合法外，还有__________融合法；过程③是__________﹔过程④⑤中，培养基中生长素和细胞分裂素的__________会影响植物细胞的发育方向。（2）图2过程I培育植物体A的过程主要应用的原理是__________；培育植物体B的育种方法Ⅱ称为___________。〖答案〗（1）①.高Ca2+-高pH②.再生出细胞壁③.浓度和比例（2）①.植物细胞的全能性②.单倍体育种〖祥解〗分析图1：图1利用植物体细胞杂交技术培育杂种植物植株，具体过程包括诱导植物细胞融合成杂种细胞和植物组织培养技术培育成杂种植株两过程，过程①是通过酶解法去除细胞壁获得原生质体a和b，过程②通过物理或化学方法(如聚乙二醇试剂)诱导原生质体融合成c，过程③是再生细胞壁形成杂种细胞d，过程④是脱分化过程形成愈伤组织e，过程⑤是再分化生成完整植株，过程④和⑤是植物组织培养技术培育完整植株。分析图2：I是植物组织培养；II是单倍体育种。【小问1详析】图1的过程②为原生质体融合，所用的化学方法除PEG融合法外，还有高Ca2+-高pH融合法；过程③是再生出细胞壁；过程④⑤为植物组织培养，培养基中生长素和细胞分裂素的浓度和比例会影响植物细胞的发育方向，当该比例高时，发育形成根，当比例低时，发育形成芽。【小问2详析】图2过程I培育植物体A的过程为植物组织培养，主要应用的原理是植物细胞的全能性。植物体B是花粉离体培养成单倍体植株，再用秋水仙素处理单倍体幼苗而来的，该育种方法为单倍体育种。23.单峰骆驼曾经分布于阿拉伯半岛，濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝（只生活在栽培、圈养条件下即认为该分类单元属于野外灭绝，但在人类活动区会有驯养）。近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示的研究。请回答下列问题：（1）胚胎工程中一般采用___________处理A使其超数排卵。若①是体外受精，需要提供发育至__________期的卵子和获能的精子。②过程通过__________去除受体卵子细胞核的目的是使重构胚__________。（2）过程③之后需要将获得的重构胚激活，使其__________。（3）与F相比，E更具有多样性，其原因是E是__________（有性/无性）生殖后代。〖答案〗（1）①.促性腺激素②.MⅡ（减数分裂Ⅱ中期）③.显微操作④.核遗传物质完全来自供体B（驯养单峰骆驼）（2）完成细胞分裂和发育进程（3）有性〖祥解〗分析图形：E后代是试管动物，属于有性生殖，F后代是克隆动物，属于无性生殖，其中①表示体外受精，②表示去掉卵母细胞的细胞核，③表示早期胚胎培养。【小问1详析】胚胎工程中采用注射促性腺激素，使雌性供体超数排卵。卵细胞需发育到MⅡ（减数分裂Ⅱ中期）才可以受精，若①是体外受精，则需要提供发育至MⅡ（减数分裂Ⅱ中期）的卵子和获能的精子。②过程通过显微操作去除受体卵子细胞核，目的是使重组细胞的核遗传物质完全来自供体驯养单峰骆驼B。【小问2详析】过程③之后需要将获得的重构胚激活，使其在适宜的培养液（包括无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸和血清等）和受体子宫内完成细胞分裂和发育进程，培养至桑葚胚或囊胚阶段进行胚胎移植。【小问3详析】E后代是试管动物，属于有性生殖，F后代是克隆动物，属于无性生殖，所以与F相比，E更具有多样性。24.新冠病毒是RNA病毒，病毒的s蛋白（刺突蛋白）是决定病毒入侵易感细胞的关键蛋白，可与宿主细胞的受体结合。下面为两种针对新冠病毒的疫苗研发方法以及抗S蛋白单克隆抗体制备过程。回答下列问题。方法技术路线基因工程疫苗S蛋白基因→基因表达载体→大肠杆菌→S蛋白→人体腺病毒载体重组疫苗S蛋白基因→腺病毒基因表达载体→人体（1）在制备疫苗的过程中，常采用_______（中文全称）技术获取和扩增新冠病毒的S蛋白基因。扩增时，除了缓冲溶液、模板、四种脱氧核苷酸，还需要加入引物和________。其产物一般通过__________来鉴定。（2）引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的___________。（3）腺病毒载体重组疫苗是将S蛋白基因重组到改造后的腺病毒内，改造后的腺病毒载体应具备的条件包括对宿主细胞无害、能够在宿主细胞中自我复制、具有标记基因和___________。其中标记基因的作用是__________。〖答案〗（1）①.聚合酶链式反应②.耐高温的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）③.琼脂糖凝胶电泳（2）短单链核酸（3）①.具有（一至多个）限制酶切割位点②.便于重组DNA分子的筛选〖祥解〗PCR技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以少量的DNA为模板，在几小时内复刻出上百万份的DNA拷贝。PCR反应需要在一定的缓冲液中进行，需要提供DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，耐热的DNA聚合酶，同时控制温度使DNA复制在体外反复进行。【小问1详析】PCR是体外扩增DNA的技术，在制备疫苗的过程中，常采用PCR（聚合酶链式反应）技术获取和扩增新冠病毒的S蛋白基因。在PCR扩增时，除了模板、四种脱氧核苷酸，还需要加入Taq酶（耐高温的DNA聚合酶）和两种引物。其产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，电泳后出现相关条带，说明扩增成功。【小问2详析】引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核苷酸，其可使DNA聚合酶从3′端延伸DNA链，从而达到扩增的目的。【小问3详析】载体应具备能够在宿主细胞中自我复制、具有（一至多个）限制酶切割位点和标记基因的条件，结合腺病毒可能会对宿主细胞造成伤害，可知改造后的腺病毒应该具有对宿主细胞无害、能够在宿主细胞中自我复制、具有（一至多个）限制酶切割位点和标记基因等条件。标记基因可用于重组DNA分子的筛选，能在特定培养基上生长的细胞为含有重组DNA的细胞。25.家禽饲料中富含纤维素，但家禽消化道中缺少降解纤维素的酶，阻碍了家禽对饲料的吸收与利用。研究人员从枯草芽孢杆菌中分离出编码纤维素酶的w基因，并借助图1所示的质粒载体导入到乳酸杆菌体内，以提高添加乳酸杆菌饲料的利用率，节省成本。图2为克隆得到的含W基因的DNA片段。回答下列问题：（1）启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，是___________识别和结合的部位。多数启动子具有物种特异性，为满足应用需要，在图1质粒中插入W基因的上游应选择___________（填“枯草芽孢杆菌”或“乳酸杆菌”）的启动子。（2）分析上述两图可知，应使用限制酶___________切割质粒和含W基因的DNA片段，以获得W基因能正确连接的重组质粒。所得重组质粒导入到乳酸杆菌后，使用含抗生素___________（填“氨苄青霉素”或“四环素”）的培养基筛选，以得到成功导入W基因的乳酸杆菌。（3）将纤维素含量为20%的培养基分为甲、乙、丙三组，其中甲组接种乳酸杆菌，乙组接种导入重组质粒的乳酸杆菌，丙组接种导入普通质粒的乳酸杆菌。相同条件下培养一段时间，发现甲、丙两组培养基中纤维素的含量无变化，而乙组含量下降，试从分子水平简要阐述出现上述结果的原因：__________。（4）人们也可以通过蛋白质工程获得作物新品种，该工程的起点是____________，最终通过改造或合成基因来完成。〖答案〗（1）①.RNA聚合酶②.乳酸杆菌（2）①.EcoRⅠ和HindⅢ（顺序可以颠倒）②.氨苄青霉素（3）W基因在乳酸杆菌中成功表达出分解纤维素的酶（4）预期蛋白质的功能〖祥解〗限制酶选择原则：(1)根据目的基因两端的限制酶识别和切割位点确定限制酶种类具体原则：应选择切点位于目的基因两端的，不能位于目的基因内部，防止破坏目的基因，同时为避免目的基因和质粒自身环化或随意连接，可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒。(2)根据质粒特点确定限制酶种类具体原则：①保证切割的黏性末端与目的基因的相同，以便两者能够连接。②保证切割后的质粒至少保留一个标记基因，以便进行筛选；保留复制原点，以便在受体细胞中维持稳定和表达；若题图中已标出启动子、终止子和T-DNA片段的位置，则切点应位于启动子和终止子之间，或位于T-DNA片段中。【小问1详析】启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，用于驱动基因的转录。结合题意可知，该基因工程是将枯草芽孢杆菌的W基因导入乳酸杆菌，想让W基因在乳酸杆菌中成功表达，所以在图1质粒中插入W基因的上游应选择乳酸杆菌的启动子。【小问2详析】选择限制酶时应当注意：不能破坏目的基因，质粒要确保至少含有一个完整的标记基因，目的基因和质粒切割后形成的黏性末端还要能互补配对，因为MfeⅠ会破坏目的基因，且BamHⅠ会破坏启动子，经综合分析，应使用限制酶EcoRⅠ和HindⅢ切割质粒和含W基因的DNA片段，以获得W基因能正确连接的重组质粒。因为使用限制酶EcoRⅠ和HindⅢ切割质粒，则构建的基因表达载体只含有标记基因氨苄青霉素抗性基因，所以应含抗生素氨苄青霉素的培养基筛选。【小问3详析】只有重组质粒中含有编码纤维素酶的W基因，乙组接种了导入重组质粒的乳酸杆菌，甲组接种了乳酸杆菌，丙组接种了导入普通质粒的乳酸杆菌，结果表明甲、丙两组培养基中纤维素的含量无变化，而乙组含量下降，说明W基因在乳酸杆菌中成功表达出分解纤维素的酶，在该酶的作用下，纤维素被分解利用，使得乙组纤维素含量下降。【小问4详析】蛋白质工程的基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过设计蛋白质的结构和推测氨基酸序列，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，最终通过基因改造或基因合成来完成，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物功能进行鉴定。辽宁省沈阳市郊联体2022-2023学年高二下学期期中试题一、单项选择题1.中国酸菜历史悠久，早在北魏的《齐民要术》中就记载了用白菜等原料腌制酸菜的多种方法。酸菜不仅口感好，而且对人体有益。下列说法错误的是（）A.酸菜制作过程中，主要起作用的微生物是乳酸菌B.制作泡菜时腌制时间过长会引起细菌大量繁殖C.真空包装的酸菜可能会因杂菌污染而发生“胀袋”D.腌制过程中，坛中水分会因蔬菜细胞渗透失水而增多〖答案〗B〖祥解〗1、泡菜的制作离不开乳酸菌，选用乳酸菌（异养厌氧型）在密闭条件下，利用乳酸菌的发酵作用，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸，发酵产物乳酸不断积累，抑制其他菌的活动。2、泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。【详析】A、酸菜制作过程中，白菜经乳酸菌发酵后产生大量乳酸，因此起主要作用的微生物是乳酸菌，A正确；B、温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，而腌制时间过长，由于发酵产物乳酸不断积累，pH降低，不利于细菌大量繁殖，B错误；C、真空包装的酸菜发生“胀袋”的原因可能是混入了其它微生物，这些混入的微生物呼吸作用会释放CO2，使包装袋膨胀，C正确；D、腌制过程中，因为外界溶液浓度高会使蔬菜细胞渗透失水，故坛中水分会因蔬菜细胞渗透失水而增多，D正确。故选B。2.培养基是一种人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。下表是某微生物培养基的配方，其相关叙述正确的是（）编号①②③④⑤成分(NH)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量0.6g5.0g0.7g0.7gl00mLA.此培养基可用来培养自养型微生物B.加入的KH2PO4既可从养分上提供P和K，又可为微生物提供能量C.若要观察微生物的菌落特征，培养基中还需要添加葡萄糖D.该培养基可选用干热灭菌进行灭菌〖答案〗A〖祥解〗各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求；培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类，液体培养基中加入琼脂可以制作固体培养基。【详析】A、根据表格分析，该培养基中含有氮源、无机盐、水，没有碳源，因此可以用来培养自养型微生物，A正确；B、表格中的KH2PO4可以为微生物提供P和K元素，还可以缓冲培养基的pH，但不能为微生物的生长提供能量，B错误；C、若要观察微生物的菌落特征，需要使用固体培养基，培养基中应该加入琼脂，C错误；D、培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法灭菌，D错误。故选A。3.啤酒生产的简要流程如图所示，制麦时用赤霉素溶液浸泡大麦种子，糖化主要将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子。下列说法错误的是（）A.过程①利用大麦发芽产生的淀粉酶进行发酵，在焙烤时该酶失活B.过程②碾磨有利于淀粉与淀粉酶充分接触，使淀粉分解，形成糖浆C.发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期可以延长排气时间间隔D.过程③在菌种的选育上，可通过基因工程改造啤酒酵母，缩短生产周期〖答案〗A〖祥解〗果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。【详析】A、利用大麦发芽产生的淀粉酶进行发酵,焙烤的目的是利用加热杀死种子的胚，并不是让酶失去活性，A错误；B、淀粉原料必须与酶充分接触，反应才能完全，过程②碾磨有利于淀粉与淀粉酶充分接触，使淀粉分解，形成糖浆，B正确；C、由于酵母菌的有氧呼吸和无氧呼吸都会产生二氧化碳，为了防止发酵液溢出，因此发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期由于糖类物质不充足，产生的气体变少，可以延长排气时间间隔，C正确；D、啤酒生产需要筛选产酒精量高的酵母菌，因此使用基因工程改造的啤酒酵母，使之产酒精量较高，可以加速发酵过程，缩短生产周期，D正确。故选A。4.人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷，利用植物细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下。下列叙述正确的是（）A.培养前人参根切块要经过严格的灭菌处理B.诱导后得到的①的分化程度高于外植体C.可用射线处理①获得人参皂苷高产的细胞D.进行过程②时常需要用胰蛋白酶处理①〖答案〗C〖祥解〗脱分化：已经分化的细胞经过脱分化，失去其特有的结构和功能，转变为未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块，即愈伤组织。【详析】A、培养前人参根切块要经过消毒，但不进行严格的灭菌处理，A错误；B、诱导后得到的①为愈伤组织，分化程度低于外植体，B错误；C、可用射线处理①愈伤组织，促使其发生突变，从中筛选人参皂苷高产的细胞，C正确；D、进行过程②时需要用酶水解细胞壁，植物细胞壁成分为纤维素和果胶，因此应该用纤维素酶和果胶酶，D错误。故选C。5.VEGF是血管内皮生长因子。研究表明恶性肿瘤患者血清中的VEGF水平普遍高于健康人，VEGF已成为新型肿瘤标志物，在肿瘤筛查中具有诊断价值。科研人员设计如下流程制备VEGF单克隆抗体。下列叙述错误的是（）A.该流程利用了动物细胞融合和动物细胞培养技术B.①是从免疫小鼠脾脏中提取的多种B淋巴细胞C.②和③所进行的两次筛选过程都不需要用到VEGFD.单克隆抗体能准确的识别抗原的细微差异〖答案〗C〖祥解〗单克隆抗体制备利用的就是动物细胞融合技术，在该过程中需要进行两次筛选，第一次筛选需要用到选择培养基，其目的是筛选获得杂交瘤细胞，第二次筛选需要进行单克隆培养和抗体检测，其目的是获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。【详析】A、制备单克隆抗体需要将已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，制成杂交瘤细胞，然后进行细胞培养使之产生单克隆抗体，该过程中需要用到动物细胞融合和动物细胞培养技术，A正确；B、由图可知，在①之前向小鼠体内注射VEGF（作抗原），引发小鼠特异性免疫，获得已免疫的B淋巴细胞，由于在此过程中，小鼠还可能接受其他抗原物质刺激，因此从其脾脏中提取的B淋巴细胞有多种，B正确；C、②代表利用选择培养基进行的第一次筛选，该过程不需要用到VEGF；③代表第二次筛选，即克隆化培养和抗体检测，其中抗体检测需要用到VEGF与克隆化培养的杂交瘤细胞产生的抗体进行抗原-抗体杂交，C错误；D、单克隆抗体特异性强、灵敏度高，能准确的识别抗原的细微差异，D正确。故选C。6.为解决大面积烧伤病人的植皮难题，科学家研制出人造皮肤，研制过程中需要将人的皮肤细胞置于培养液中进行培养。培养液配制除必需的已知成分外，还必须加入天然成分，细胞才能正常生长和增殖。下列相关叙述正确的是（）A.人的皮肤细胞培养前须用胃蛋白酶处理，使细胞分散开B.细胞培养过程中只需不断通入氧气，就能保证细胞的正常生命活动C.培养液中加入的天然成分可能是血清，用于补充细胞生长和增殖所需的物质D.经培养可得到由多层细胞构成的人造皮肤，能直接用于移植〖答案〗C〖祥解〗动物细胞的培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。【详析】A、人的皮肤细胞培养前须用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理，使细胞分散开，不能用胃蛋白酶，A错误；B、细胞培养过程中需适宜的气体环境（95%的空气和5%的CO2）、适宜的温度和pH、无菌无毒的环境等，B错误；C、在进行动物细胞培养时，通常培养液中需加入血清、血浆等一些天然成分，主要目的是为细胞提供促生长因子，以补充细胞生长和增殖所需的物质，C正确；D、动物细胞培养过程中存在接触抑制，当细胞与细胞相互靠近时，就会彼此限制细胞的生长和增殖，形成单层细胞，D错误。故选C。7.“国宝”熊猫一直深受大家的喜爱。熊猫在自然条件下受精困难，产子率较低，可以通过胚胎工程提高熊猫的产子率。下列说法错误的是（）A.自然条件下，熊猫的受精作用是在雌性熊猫的卵巢内完成的B.在精子的刺激下，卵子完成减数分裂，排出第二极体后形成雌原核C.体外受精时，可将培养成熟的卵子与获能精子置于适当的培养液中共同培养一段时间，促使他们完成受精D.胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚进行分割〖答案〗A〖祥解〗胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术，进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。【详析】A、自然条件下，哺乳动物（比如熊猫）的受精作用在输卵管内完成，完成受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体，A错误；B、精子入卵后，被激活的卵母细胞完成减数第二次分裂，排出第二极体后，形成雌原核，雌原核一般略小于雄原核，B正确；C、体外受精时，从卵巢中采集的卵母细胞，一般都要体外经人工培养成熟至MⅡ时，才能与获能的精子受精，C正确；D、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，D正确。故选A。8.对下图所示黏性末端的说法错误的是A.甲、乙、丙黏性末端是由各自不同的限制性核酸内切酶催化产生的B.甲、乙具相同的黏性末端可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能C.DNA连接酶作用位点在b处，催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键D.切割甲的限制性核酸内切酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子〖答案〗C〖祥解〗本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。【详析】甲、乙、丙粘性末是由各自不同的限制性核酸内切酶催化产生的，A正确；甲、乙的黏性末端虽然不完全相同，但是其露出来的碱基是配对的，所以可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能，B正确；DNA连接酶作用位点在a处，催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键，C错误；切出甲的限制酶识别的是GAATTC，在GA之间切割；切出乙的限制酶识别的是CAATTG，在CA之间切割；所以切出甲的限制性核酸内切酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子，D正确。9.下图表示“DNA的粗提取和鉴定”的相关流程。下列叙述正确的是（）A.步骤1和步骤2的目的是获取研磨液中的沉淀物B.步骤3中的DNA溶于酒精，而某些蛋白质不溶于酒精C.利用二苯胺试剂鉴定DNA时，将试管置于50℃的温水中D.步骤4中DNA在2的NaCl溶液中溶解度较高〖答案〗D〖祥解〗DNA的粗提取和鉴定的原理：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分离DNA和蛋白质。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol⋅L−1的NaCl溶液中。在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。【详析】A、步骤1和步骤2的目的是获取研磨液中的上清液，A错误；B、步骤3中的DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精，B错误；C、利用二苯胺试剂鉴定DNA时，将试管置于沸水中，C错误；D、DNA在不同浓度的NaCl中溶解度不同，DNA在2mol⋅L−1的NaCl溶液中溶解度较高，D正确。故选D。10.在基因工程中，常采用花粉管通道法和土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞。下图为花粉管通道法的一般原理示意图。相关叙述正确的是（）A.外源DNA需要来自于真核细胞B.花粉管通道法的操作方式还可以将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中C.植物生长各个时期均可通过花粉管通道导入外源DNAD.含外源DNA的种子发育成植株后均具有相应性状〖答案〗B〖祥解〗花粉管通道法有多种操作方式：可以用微量注射器将含目的基因的DNA直接注入子房内；可以在植物受粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道进入胚囊。【详析】A、外源DNA可来自于真核细胞，也可来自原核细胞，A错误；B、花粉管通道法有多种操作方式：可以用微量注射器将含目的基因的DNA直接注入子房内；可以在植物受粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道进入胚囊，B正确；C、花粉管通道法应在雌蕊成熟时进行操作，C错误；D、含外源DNA的种子发育成植株不一定均具有相应性状，还需进行个体生物学水平等的检测，D错误。故选B。11.下列关于生物工程相关知识的叙述，正确的有几项（）①植物组织培养过程中愈伤组织的代谢类型是自养需氧型②牛胚胎发育的历程是：受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚→幼体③若要生产转基因抗病棉花，可将目的基因先导入到土壤农杆菌中，再转入棉花细胞中④DNA分子具有可解离的基团，在一定的PH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷⑤PCR技术需要利用限制酶打开DNA双链A.2项 B.3项 C.4项 D.5项〖答案〗B〖祥解〗PCR反应过程：变性→复性→延伸。变性：当温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链，复性：温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，延伸：72℃左右时，Taq酶有最大活性，可使DNA新链由5'端向3'端延伸。【详析】①脱分化形成愈伤组织，愈伤组织没有叶绿体，代谢类型是异养需氧型，①错误；②牛胚胎发育的历程是：受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚→幼体，②正确；③目的基因导入植物受体细胞常用农杆菌转化法，因此若要生产转基因抗病棉花，可将目的基因先导入到土壤农杆菌中，再转入棉花细胞中，③正确；④DNA分子具有可解离的基团，在一定的pH条件下DNA分子可带上正电荷或负电荷，从而能在电泳的条件下发生定向移动，④正确；⑤PCR技术利用的是高温打开DNA双链，不是酶，⑤错误。综上②③④正确。故选B。12.OsCLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如下图所示），利用农杆菌转化法转化水稻，在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列叙述正确的是（）A.将重组Ti质粒导入农杆菌前，用Ca2+处理农杆菌可提高转化率B.四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译C.可用PCR技术检测四种酶在转基因水稻中的翻译产物D.应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞〖答案〗A〖祥解〗线粒体和叶绿体的DNA，都能够进行半自主自我复制，并通过转录和翻译控制某些蛋白质的合成，但同时受到细胞核基因的控制。标记基因：便于重组DNA分子的筛选。【详析】A、将重组Ti质粒导入农杆菌前，用Ca2+处理农杆菌使其处于感受态，易于接受重组质粒，从而提高转化率，A正确；B、这些基因在叶绿体外合成，由叶绿体转运肽引导合成的蛋白质进入叶绿体，B错误；C、可用抗原-抗体杂交技术检测是否有相应的蛋白质产生，从而检测四种酶在转基因水稻中的表达情况，C错误；D、卡那霉素不在T-DNA上，应用潮霉素培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞，D错误。故选A。13.下列关于利用乳腺生物反应器生产药用蛋白的叙述，正确的是（）A.需要将编码药用蛋白的基因与能在乳腺中特异性表达的基因的启动子等调控元件重组在一起B.需要将目的基因导入乳腺细胞中C.需要借助于核移植技术和胚胎移植技术培育出转基因动物D.药物的生产不会受到转基因动物性别和年龄的限制〖答案〗A〖祥解〗乳腺生物反应器是将外源基因在哺乳动物的乳腺中特异表达，以转基因动物的乳腺组织生产药用蛋白。【详析】A、要使药用蛋白基因在奶牛乳腺中特异性表达，应将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控元件重组在一起，保证相关基因正常转录和翻译，A正确；B、需要将目的基因导入受精卵中，B错误；C、乳腺生物反应器的培育过程中不涉及核移植技术，C错误；D、由于乳腺生物反应器需要利用动物产生的乳汁进行药物生产，故药物的生产受到转基因动物性别和年龄的限制，要求选择合适的雌性个体，D错误。故选A。14.资料一：科学家将牛的生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”。资料二：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。阅读以上资料，下列相关叙述错误的是（）A.将牛的生长激素基因导入小鼠受精卵常用显微注射法B.牛的生长激素基因在“超级小鼠”的所有细胞中都表达C.资料二中采用的技术还可以创造新的基因和蛋白质D.资料二中氨基酸的种类发生改变是个别碱基替换的结果〖答案〗B〖祥解〗基因工程的实质是将一种生物的基因转移到另一种生物体内，后者可以产生它本不能产生的蛋白质，进而表现出新性状。蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。【详析】A、小鼠受精卵属于动物细胞，将牛的生长激素基因（目的基因）导入动物细胞中常用显微注射法，A正确；B、由于基因的选择性表达，牛的生长激素基因只在“超级小鼠”的垂体细胞中表达，B错误；C、资料二中科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造，这属于蛋白质工程，蛋白质工程可以创造新的基因和蛋白质，C正确；D、据资料二分析可知，基因改造后，其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，说明基因中发生了碱基对的替换，D正确。故选B。15.下列有关现代生物工程技术应用的叙述，正确的是（）A.高产青霉素菌株属于转基因成果B.设计试管婴儿性别会引起性别比例失调，违背伦理道德C.中国政府对于克隆技术的态度是不反对治疗性克隆，可有限制的进行生殖性克隆D.由于存在生殖隔离，大田种植转基因抗旱、抗除草剂农作物不存在生物安全性问题〖答案〗B〖祥解〗高产青霉素菌株是诱变育种产生的，其原理是基因突变。设计试管婴儿性别会引起性别比例失调，违背伦理道德。中国政府禁止生殖性克隆，一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。但是，中国不反对治疗性克隆。面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，而不能因噎废食。【详析】A、高产青霉素菌株是诱变育种产生的，其原理是基因突变，A错误；B、设计试管婴儿性别会引起性别比例失调，违背伦理道德，B正确；C、中国政府对于克隆技术的态度是不反对治疗性克隆，禁止生殖性克隆，C错误；D、根据目前的研究，对转基因生物的风险还不完全清楚，大田种植转基因抗旱、抗除草剂农作物可能存在生物安全性问题，D错误。故选B。二、不定项选择题16.勤洗手是预防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠状病毒期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果，研究人员检测了用凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。下列叙述错误的是（）A.统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是稀释涂布平板法B.除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养C.培养基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌D.初步判断培养基上菌种的类型，需要用显微镜观察菌体的形状〖答案〗CD〖祥解〗微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详析】A、平板划线不能用于活菌计数，故统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是稀释涂布平板法，A正确；B、除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养，以验证培养基是否被杂菌污染，B正确；C、由于当两个或多个细胞连在一起时平板上显示的只是一个菌落，故培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个、甚至几个活菌，C错误；D、由于菌落肉眼可见，故可根据菌落的形态、颜色等特征初步判断培养基上菌种的类型，无需用显微镜观察菌体，D错误。故选CD。17.兔的免疫系统可对广泛的抗原产生应答，其较大的脾脏可产生更多抗体，兔的单克隆抗体具有天然多样性、高亲和力和特异性、易于人源化（已成为将外源抗体转化为有效安全的治疗药物的重要方式），因而是进行免疫研究的好材料。下列叙述正确的是（）A.若直接利用未人源化的兔单克隆抗体进行治疗，机体将会产生免疫反应，导致他的治疗效果降低B.用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞时，每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞C.利用选择培养基筛选出的杂交瘤细胞具有能迅速大量增殖的能力D.体外培养特异性杂交瘤细胞时，需要给予95%氧气和5%CO2的混合气体〖答案〗ABC〖祥解〗单克隆抗体由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体，B细胞和骨髓瘤细胞融合会出现未杂交的细胞以及自身融合的细胞，不一定全是杂交瘤细胞。【详析】A、若直接利用未人源化的兔单克隆抗体进行治疗，其作为外来物质，作为抗原使机体产生免疫反应，将其清除，导致其的治疗效果降低，A正确；B、为确保产生特异性强的抗体，用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞时，每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞，B正确；C、该过程中进行了两次筛选，第一次是筛选出能够大量增殖的杂交细胞，第二次是筛选出既能大量增殖又能产生单一性抗体的杂交瘤细胞，利用选择培养基能筛选出特异性强的杂交瘤细胞，其具有能迅速大量增殖的能力，C正确；D、体外培养特异性杂交瘤细胞时，需要给予95%的空气和5%的CO2，D错误。故选ABC。18.胚胎工程中各种操作技术如图所示。下列说法正确的是（）A.e具有分化为成年动物体内任何一种类型细胞的潜能B.早期囊胚a、b、c基因型相同，但发育得到的个体表型不一定相同C.d可直接移植给受体，且得到的两头小牛的性状一般相同D.胚胎移植时因代孕母牛几乎对外来胚胎不发生免疫排斥反应，因此无需使用免疫抑制剂〖答案〗ACD〖祥解〗试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。【详析】A、e是胚胎干细胞，具有全能性，即具有分化为成年动物体内任何一种类型细胞的潜能，A正确；B、据图可知，三种早期囊胚由不同受精卵发育而来，故a、b、c细胞核中的遗传物质不一定相同，B错误；C、d是经过胚胎分割形成的两个健康的胚胎，可直接移植给受体，该过程属于无性生殖，得到的两头小牛来自同一个受精卵，性状一般相同，C正确；D、胚胎具有免疫豁免现象，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，不需要注射免疫抑制剂，D正确。故选ACD。19.生物技术与工程实践中常利用特殊的化学试剂或一定的物理刺激进行“激活”操作。下列叙述正确的是（）A.将果酒用于果醋发酵时，适当提高温度是“激活”醋酸菌的重要条件之一B.制备单克隆抗体时，应先利用抗原“激活”小鼠产生相应的B淋巴细胞C.克隆高产奶牛时，获得的重构胚需要在胚胎移植后用Ca2+载体等试剂“激活”D.在PCR反应过程中，引物需要Mg2+“激活”〖答案〗AB〖祥解〗参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【详析】A、制作果酒的最适温度为18-30℃，而醋酸菌的最适温度为30-35℃，所以将果酒用于果醋发酵时，提高温度是“激活”醋酸菌的重要条件之一，A正确；B、单克隆抗体的制备过程中，需要用抗原“激活”小鼠产生相应的B淋巴细胞，再将该细胞与骨髓瘤细胞融合，B正确；C、获得的重构胚需要在胚胎移植前用Ca2+载体等试剂“激活”，C错误；D、在PCR反应过程中，耐高温的DNA聚合酶需要Mg2+"激活"，D错误。故选AB。