微生物的培养课件

专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养微生物的培养上课微生物的培养上课微生物原核类:真核类：非细胞类：细菌等真菌原生生物、一、微生物的主要类群微生物的培养上课五大类营养要素物质是：二、微生物需要的营养物质及功能1.碳源2.氮源3.特殊营养物质（生长因子）4.无机盐5.水：凡是能为微生物提供所需碳元素的营养物质。①无机碳源：CO2；NaHCO3等②有机碳源：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等概念来源：微生物的培养上课①无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等微生物的氮源来源：微生物的培养上课几种菌落及其形态微生物的培养上课液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长半固体培养基：(是否运动)

无动力有动力(弥散)固体培养基：菌落微生物的培养上课1、牛肉膏是采用新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。牛肉膏当中含有肌酸、肌酸酐、多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素类的水溶性物质。2、蛋白胨是微生物培养基的主要基础成分，蛋白胨是由蛋白质经酶、酸、碱水解而获得的水溶性混合物。主要作用提供氮源,除此处，还可以提供C源和生长因子。其来源由：动物组织蛋白、植物组织蛋白、微生物蛋白质。3、酵母膏酵母膏实际上是膏状的酵母抽提物

酵母抽提物以酵母为原料，采用自溶法或加酶水解法工艺，经分离、脱色（或精制浓缩、喷雾干燥）而成的，含氨基酸、肽、多肽及酵母细胞水溶性成分的产品。包含粉状、与膏状的产品。

酵母膏可以有食品调味与生物发酵培养基两大类用途。在生物发酵行业应用还有一种习惯叫法是酵母浸膏。

微生物的培养上课三、无菌技术无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。⑴消毒：杀死部份微生物⑵灭菌：消灭所有微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒。

微生物的培养上课消毒方法：（1）日常生活经常用到的是

消毒法；（2）对一些不耐高温的液体，则使用

消毒法（3）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒

等溶液以增强消毒效果，然后使用

进行物理消毒。（4）实验操作者的双手使用

进行消毒；（5）饮水水源用

进行消毒。煮沸巴氏石炭酸或煤酚皂紫外线酒精氯气微生物的培养上课灭菌方法：（1）接种环、接种针、试管口等使

灭菌法；（2）玻璃器皿、金属用具等使用

法，所用器械是

；（3）培养基、无菌水等使用

灭菌法，所用器械是

。（4）表面灭菌和空气灭菌等使用

灭菌法，所用器械是

。灼烧干热灭菌箱干热灭菌高压蒸汽高压蒸汽灭菌锅紫外线紫外灯微生物的培养上课①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min(适用于金属器械、玻璃制品及橡胶类物品)②巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min。③化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源。④紫外线消毒：空气或表面消毒消毒的方法：微生物的培养上课①灼烧灭菌②干热灭菌（160-170℃下加热1-2h）③高压蒸气灭菌：（100kPa、121℃下维持15-30min）接种环的灭菌培养皿、玻璃器皿的灭菌培养基、无菌水的灭菌微生物的培养上课四、实验操作(以培养大肠杆菌为例)制备培养基计算

称量

溶化

调pH

，灭菌（加塞、包扎）倒平板灭菌微生物的培养上课纯化大肠杆菌微生物的培养上课微生物的培养上课一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；二是存留在划破处的单个细胞无法形成规则的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。微生物的培养上课微生物的培养上课稀释涂布平板法微生物的培养上课几种菌落及其形态微生物的培养上课菌种的保存接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。⑵长期保存：甘油冷冻管藏法⑴临时保藏：微生物的培养上课分离导入了目的基因的受体细胞几种选择培养基加入青霉素的培养基分离酵母菌、霉菌等真菌不加氮源的无氮培养基分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基back微生物的培养上课结果分析与评价㈠.培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。㈡.接种操作是否符合无菌要求如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。㈢.是否进行了及时细致的观察与记录培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。微生物的培养上课营养类型能源氢的供体基本碳源微生物举例代谢类型光能无机营养(光能自养型)光能有机营养(光能异养型)化能无机营养(化能自养型)化能有机营养(化能异养型)光光无机物有机物无机物有机物无机物有机物二氧化碳二氧化碳及简单有机物二氧化碳有机物大多数已知细菌和全部真核微生物硝化细菌氢细菌紫色非硫细菌蓝细菌绿色硫细菌藻类微生物的培养上课划分标准培养基种类特点用途物理性质化学成分天然培养基合成培养基用途鉴别培养基培养基的种类不加凝固剂加凝固剂，如琼脂工业生产观察微生物的运动、分类鉴定微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种含化学成分不明确的天然物质工业生产培养基成分明确分类、鉴